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酸水解法测定脂肪操作方法
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本文由 上海恒远ELISA试剂盒供应商 整理汇编
2018-11-16 10:02 3353阅读次数
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酸水解法测定脂肪内容摘要:酸水解法适用于各类食品中脂肪的测定,对固体、半固体、黏稠液体或液体食品,特别是加工后的混合食品,容易吸湿、结块,不易烘干的食品,不能采用索氏提取法时,用此法效果较好。1.酸水解法原理强酸与样品一同加热进行水解,结合或包藏在组织里的脂肪可游离出来,然后用乙迷和石油醚提取脂肪,回收溶剂,除去溶剂后即为脂肪含量。2.仪器①100mL具塞刻度量筒。②烘箱。3.试剂①95%乙醇。②乙迷(不含过氧化物)。③石油醚(30~60℃沸程)。④浓盐酸。4.测定步骤①样品处理a.固体样品:准确称取约2.0g,置于50mL试管中,加8mL水,混匀后再加10mL浓盐酸。b.液体样品:准确称取10.0g置于50mL试管中,加10mL,浓盐酸。②水解:将试管放入70~80℃水浴中,每隔5~10min用玻璃棒搅拌一次,至样品脂肪游离消化完全为止,时间约需40~50rain。水解过程中,如水分蒸发,应适当补加水,保持溶液总体积不变,以避免酸浓度升高。③提取:取出试管,加入10mL乙醇,混合。冷却后将混合物移人100mL具塞量筒中,用25mL乙迷分次洗试管,洗液一并倒人量筒中。加塞振摇1rain,小心开塞放出气体,再塞好,静置12min,小心开塞,用石油醚一乙迷等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10~20min,待上部液体澄清,吸出上清液于已恒重的烧瓶内,再加5mL石油醚一乙迷等量混合液于具塞量筒内,振摇,静置后,仍将上层乙迷吸出,放人原烧瓶内。④回收溶剂、烘干、称重:回收烧瓶内乙迷后,将烧瓶于水浴上蒸干后,置100~105℃烘箱中干燥2h,取出放进干燥器内,冷却30min后称重,反复干燥冷却操作至恒重。5.说明①测定的样品需充分磨细,液体样品需充分混合均匀,以使消化完全。②水解后加的乙醇可使蛋白质沉淀,促进脂肪球聚合,同时溶解一些碳水化合物、有机酸等。后面用乙迷提取,因乙醇可溶于乙迷,故需加入石油醚,降低乙醇在醚中的溶解度,使乙醇溶解物残留在水层,并使分层清晰。③挥干溶剂后,残留物中若有黑色焦油状杂质,是分解物与水一同混入所致,会使测定值增大,造成误差,可用等量的乙迷及石油醚溶解后过滤,再次进行挥干溶剂的操作。④因磷脂在酸水解条件下分解为脂肪酸和碱,故本法不宜用于测定含有大量磷脂的食品如鱼类、贝类和蛋品。此法也不适于含糖高的食品,因糖类遇强酸易碳化而影响测定结果。
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酸水解法测定脂肪操作方法
- 酸水解法测定脂肪内容摘要:酸水解法适用于各类食品中脂肪的测定,对固体、半固体、黏稠液体或液体食品,特别是加工后的混合食品,容易吸湿、结块,不易烘干的食品,不能采用索氏提取法时,用此法效果较好。1.酸水解法原理强酸与样品一同加热进行水解,结合或包藏在组织里的脂肪可游离出来,然后用乙迷和石油醚提取脂肪,回收溶剂,除去溶剂后即为脂肪含量。2.仪器①100mL具塞刻度量筒。②烘箱。3.试剂①95%乙醇。②乙迷(不含过氧化物)。③石油醚(30~60℃沸程)。④浓盐酸。4.测定步骤①样品处理a.固体样品:准确称取约2.0g,置于50mL试管中,加8mL水,混匀后再加10mL浓盐酸。b.液体样品:准确称取10.0g置于50mL试管中,加10mL,浓盐酸。②水解:将试管放入70~80℃水浴中,每隔5~10min用玻璃棒搅拌一次,至样品脂肪游离消化完全为止,时间约需40~50rain。水解过程中,如水分蒸发,应适当补加水,保持溶液总体积不变,以避免酸浓度升高。③提取:取出试管,加入10mL乙醇,混合。冷却后将混合物移人100mL具塞量筒中,用25mL乙迷分次洗试管,洗液一并倒人量筒中。加塞振摇1rain,小心开塞放出气体,再塞好,静置12min,小心开塞,用石油醚一乙迷等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10~20min,待上部液体澄清,吸出上清液于已恒重的烧瓶内,再加5mL石油醚一乙迷等量混合液于具塞量筒内,振摇,静置后,仍将上层乙迷吸出,放人原烧瓶内。④回收溶剂、烘干、称重:回收烧瓶内乙迷后,将烧瓶于水浴上蒸干后,置100~105℃烘箱中干燥2h,取出放进干燥器内,冷却30min后称重,反复干燥冷却操作至恒重。5.说明①测定的样品需充分磨细,液体样品需充分混合均匀,以使消化完全。②水解后加的乙醇可使蛋白质沉淀,促进脂肪球聚合,同时溶解一些碳水化合物、有机酸等。后面用乙迷提取,因乙醇可溶于乙迷,故需加入石油醚,降低乙醇在醚中的溶解度,使乙醇溶解物残留在水层,并使分层清晰。③挥干溶剂后,残留物中若有黑色焦油状杂质,是分解物与水一同混入所致,会使测定值增大,造成误差,可用等量的乙迷及石油醚溶解后过滤,再次进行挥干溶剂的操作。④因磷脂在酸水解条件下分解为脂肪酸和碱,故本法不宜用于测定含有大量磷脂的食品如鱼类、贝类和蛋品。此法也不适于含糖高的食品,因糖类遇强酸易碳化而影响测定结果。[详细]
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