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001-02克伦特罗(Clenbuterol)定量检测试剂盒(ELISA)
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本文由 上海瓦兰生物科技有限公司 整理汇编
2018-09-22 10:00 242阅读次数
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www.biokanu.com克伦特罗(Clenbuterol)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书一、概要克仑特罗(Clenbuterol)属于β-兴奋剂,是一种高选择性的兴奋剂和激素,具有水解脂肪、合成代谢和对非条纹肌肉组织的松弛作用。近年来被非法添加到饲料中以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物生长,因其添加剂量是ZL剂量的5-10倍,以至于在动物体内残留而给消费者带来危害。通常情况下,HPLC或GC-MS是克伦特罗残留检测的确证方法,但是其前处理步骤繁琐、费用昂贵。酶联免疫快速检测试剂盒具有成本低廉、操作简便、一次处理样本量大等优点,已成为常规的初步筛查方法。本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点,能Zda限度地减少操作误差和工作强度。二、用途定量检测动物尿液中克仑特罗(Clenbuterol)的残留。三、检测原理本试剂盒采用竞争酶联免疫试验。检测的基础是抗原抗体反应,微孔板预包被羊抗鼠IgG捕获抗体,加入鼠抗克伦特罗抗体后,会与捕获抗体连接。经过孵育及洗板后,加入标准品、样品及克伦特罗酶标记物(Clen-HRP),游离的克伦特罗(Clen)与克伦特罗酶标记物(Clen-HRP)竞争克伦特罗抗体结合位点。经过孵育及洗板后,加入底物并孵育。结合的酶连接物将底物转化为蓝色的产物。加入反应终止液后使颜色由蓝转变为黄色。在450nm处测量,吸光度值与样品中的克伦特罗浓度成反比,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数即可得出样品中克仑特罗的含量。四、检测限检测限:0.03ng/ml(0.03ppb)五、特异性克仑特罗……………………………………………1**%沙丁胺醇…………………………………………约10%他林…………………………………………小于10%非诺特罗……………………………………………小于1%马布特罗……………………………………………约30%西马特罗……………………………………………小于1%溴布特罗……………………………………………约92%塞曼特罗……………………………………………小于1%异丙肾上腺素………………………………………小于1%六、试剂盒组成每一个盒中的试剂足够进行96个试验(包括标准测定),试剂盒中的组份如下:1、96孔酶标板1块(12孔×8条):预包被羊抗鼠IgG2、标准液×6瓶(1ml/瓶):0ng/mL、0.03ng/mL、0.1ng/mL、0.3ng/mL、0.9ng/mL、2.7ng/mL3、酶标记物(6mL):辣根过氧化物酶标记的克伦特罗工作液4、克伦特罗抗体(10mL):鼠抗克伦特罗单克隆抗体工作液5、底物液A(6mL):过氧化脲6、底物液B(6mL):四甲基联苯胺(TMB)7、终止液(6mL):2NH2SO48、浓缩洗涤液(20×)(25mL):含Tween-20的磷酸盐缓冲液(PBST)9、其他:封板膜3张,自封袋1个,说明书1份七、样本处理处理任何样本,必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。取50μL清亮尿样直接测定,如尿样浑浊3000转离心10min,取上层清亮尿液测定,暂不使用的样本应于-20℃冷冻保存。八、检测步骤仔细的洗涤非常重要。避免在操作过程中微孔出现干燥。1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20-25℃)平衡30min以上。2、准备:取出需要数量的微孔板,将用剩的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。将微孔板条插入微孔架,标准品和样品做两个平行实验,记录下标准品和样品的位置。3、加抗体:每孔加入100μL抗体溶液,37℃恒温箱孵育30分钟。4、洗板:倒出孔中的液体,将微孔架倒置在干净吸水纸上拍打,以保证完全除去孔中的液体。每孔加满稀释后的洗涤工作液,静置20秒钟,甩去液体,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次。5、加标准品/样品:加入50μL标准品或处理好的样品到各自的微孔中,标准品和样品做两个平行实验,然后加入50μL酶标记物到微孔,小心地充分混合,37℃恒温箱孵育30分钟。6、重复3的操作。7、显色:每孔先加入底物液A50μL,再加入底物液B50μL,37℃避光孵育15min(如果显色过浅,可适当延长孵育时间,反之亦然)。8、测定:每孔加入终止液50μL,设定酶标仪于450nm处,测定每孔OD值。九、结果判定(1)百分吸光率的计算,标准品或样本的百分吸光率等于标准品或样本的百分吸光度值的平均值(双孔)除以**个标准(0标准)的吸光度值,再乘以1**%,即百分吸光度值(%)=B×1**%B0B标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B00ppb标准溶液的平均吸光度值(2)标准曲线的绘制与计算以标准品百分吸光率为纵坐标,以克仑特罗标准品浓度(ppb)的半对数为横坐标,绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中克仑特罗的实际浓度。若利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于大量样本的准确、快速分析。(欢迎来电索取)十、注意事项1、严格按照说明书操作时间,每加一种试剂前需要将其摇匀,各操作步骤紧凑进行。2、室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温(20-25℃)会导致所有标准的OD值偏低。3、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。4、试剂变质的迹象底物有任何颜色表明变质,应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。5、不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。6、在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色15min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到25min(或更长),但不得超过30min。反之,则减短反应时间。7、反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。十一、贮存条件及有效期贮存条件:2-8℃、干燥避光防潮。有效期:在正确贮存条件下,有效期为12个月。
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001-02克伦特罗(Clenbuterol)定量检测试剂盒(ELISA)
- www.biokanu.com克伦特罗(Clenbuterol)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书一、概要克仑特罗(Clenbuterol)属于β-兴奋剂,是一种高选择性的兴奋剂和激素,具有水解脂肪、合成代谢和对非条纹肌肉组织的松弛作用。近年来被非法添加到饲料中以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物生长,因其添加剂量是ZL剂量的5-10倍,以至于在动物体内残留而给消费者带来危害。通常情况下,HPLC或GC-MS是克伦特罗残留检测的确证方法,但是其前处理步骤繁琐、费用昂贵。酶联免疫快速检测试剂盒具有成本低廉、操作简便、一次处理样本量大等优点,已成为常规的初步筛查方法。本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点,能Zda限度地减少操作误差和工作强度。二、用途定量检测动物尿液中克仑特罗(Clenbuterol)的残留。三、检测原理本试剂盒采用竞争酶联免疫试验。检测的基础是抗原抗体反应,微孔板预包被羊抗鼠IgG捕获抗体,加入鼠抗克伦特罗抗体后,会与捕获抗体连接。经过孵育及洗板后,加入标准品、样品及克伦特罗酶标记物(Clen-HRP),游离的克伦特罗(Clen)与克伦特罗酶标记物(Clen-HRP)竞争克伦特罗抗体结合位点。经过孵育及洗板后,加入底物并孵育。结合的酶连接物将底物转化为蓝色的产物。加入反应终止液后使颜色由蓝转变为黄色。在450nm处测量,吸光度值与样品中的克伦特罗浓度成反比,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数即可得出样品中克仑特罗的含量。四、检测限检测限:0.03ng/ml(0.03ppb)五、特异性克仑特罗……………………………………………1**%沙丁胺醇…………………………………………约10%他林…………………………………………小于10%非诺特罗……………………………………………小于1%马布特罗……………………………………………约30%西马特罗……………………………………………小于1%溴布特罗……………………………………………约92%塞曼特罗……………………………………………小于1%异丙肾上腺素………………………………………小于1%六、试剂盒组成每一个盒中的试剂足够进行96个试验(包括标准测定),试剂盒中的组份如下:1、96孔酶标板1块(12孔×8条):预包被羊抗鼠IgG2、标准液×6瓶(1ml/瓶):0ng/mL、0.03ng/mL、0.1ng/mL、0.3ng/mL、0.9ng/mL、2.7ng/mL3、酶标记物(6mL):辣根过氧化物酶标记的克伦特罗工作液4、克伦特罗抗体(10mL):鼠抗克伦特罗单克隆抗体工作液5、底物液A(6mL):过氧化脲6、底物液B(6mL):四甲基联苯胺(TMB)7、终止液(6mL):2NH2SO48、浓缩洗涤液(20×)(25mL):含Tween-20的磷酸盐缓冲液(PBST)9、其他:封板膜3张,自封袋1个,说明书1份七、样本处理处理任何样本,必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。取50μL清亮尿样直接测定,如尿样浑浊3000转离心10min,取上层清亮尿液测定,暂不使用的样本应于-20℃冷冻保存。八、检测步骤仔细的洗涤非常重要。避免在操作过程中微孔出现干燥。1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20-25℃)平衡30min以上。2、准备:取出需要数量的微孔板,将用剩的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。将微孔板条插入微孔架,标准品和样品做两个平行实验,记录下标准品和样品的位置。3、加抗体:每孔加入100μL抗体溶液,37℃恒温箱孵育30分钟。4、洗板:倒出孔中的液体,将微孔架倒置在干净吸水纸上拍打,以保证完全除去孔中的液体。每孔加满稀释后的洗涤工作液,静置20秒钟,甩去液体,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次。5、加标准品/样品:加入50μL标准品或处理好的样品到各自的微孔中,标准品和样品做两个平行实验,然后加入50μL酶标记物到微孔,小心地充分混合,37℃恒温箱孵育30分钟。6、重复3的操作。7、显色:每孔先加入底物液A50μL,再加入底物液B50μL,37℃避光孵育15min(如果显色过浅,可适当延长孵育时间,反之亦然)。8、测定:每孔加入终止液50μL,设定酶标仪于450nm处,测定每孔OD值。九、结果判定(1)百分吸光率的计算,标准品或样本的百分吸光率等于标准品或样本的百分吸光度值的平均值(双孔)除以**个标准(0标准)的吸光度值,再乘以1**%,即百分吸光度值(%)=B×1**%B0B标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B00ppb标准溶液的平均吸光度值(2)标准曲线的绘制与计算以标准品百分吸光率为纵坐标,以克仑特罗标准品浓度(ppb)的半对数为横坐标,绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中克仑特罗的实际浓度。若利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于大量样本的准确、快速分析。(欢迎来电索取)十、注意事项1、严格按照说明书操作时间,每加一种试剂前需要将其摇匀,各操作步骤紧凑进行。2、室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温(20-25℃)会导致所有标准的OD值偏低。3、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。4、试剂变质的迹象底物有任何颜色表明变质,应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。5、不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。6、在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色15min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到25min(或更长),但不得超过30min。反之,则减短反应时间。7、反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。十一、贮存条件及有效期贮存条件:2-8℃、干燥避光防潮。有效期:在正确贮存条件下,有效期为12个月。[详细]
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2018-09-22 10:00
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克伦特罗酶联免疫定量检测试剂盒使用说明书
- 克伦特罗酶联免疫定量检测试剂盒(I)使用说明书概述:克伦特罗(Clenbuterol)属于一类β-兴奋剂,具有改进脂肪型动物体内肉与脂肪的比例的作用,亦可促进动物生长。但同时,此药物还会使非横纹肌松弛,人体摄入后可引起心跳、心率不正常等副反应,甚至可导致心脏病。因此在我国,克伦特罗在畜牧业上的使用是被严格禁止的。本试剂盒利用竞争酶联免疫法对生物样品中的克伦特罗进行定量分析。适用于动物尿液、血清、内脏等物质中克伦特罗的快速检测。由于ELISA法的高通量与简便快速,适合大量样本的定量筛查,自样本加入至结果读出,不超过60分钟,检测灵敏度为0.1ppb。简要原理试剂盒所提供的微孔板上包被有抗体,然后将校准品或样本中的克伦特罗与酶标记的克伦特罗加入微孔中后,两者可竞争结合克伦特罗抗体,洗去未结合的酶标记克伦特罗。加入底物后,在酶作用下,底物溶液会显蓝色,加入终止剂后,溶液由蓝转为金黄色。在450nm波长光下测吸光度,吸光度高低与校准品或样品中克伦特罗的含量呈反比,根据校准品的读数作出校准曲线,并利用校准曲线计算出样品中克伦特罗的含量。试剂盒组成酶标反应板:96孔易折板,抗体已包被克伦特罗校准品:1ml/瓶×6瓶浓度:0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb11×酶标记克伦特罗浓缩液:1.2ml/瓶×1瓶(稀释11倍使用)底物液:11ml/瓶×1瓶酶标稀释液:20ml/瓶×1瓶50×浓缩洗涤液:20ml/瓶×1瓶(稀释50倍使用)终止剂:11ml/瓶×1瓶其他:说明书×1份自封袋×1个2-8℃贮存,有效期一年实验需要但试剂盒不提供的试剂和仪器试剂――――――10mM盐酸溶液――――――氯化钠――――――50mMPH7.0PBS(配制:9gNaCl;4.65gNa2HPO412H2O;0.56gNaH2PO42H2O溶解于1000ml蒸馏水中)――――――异丙醇――――――乙酸乙酯2.仪器――――――微孔板酶标仪――――――涡旋振荡器或超声波粉碎仪[详细]
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2018-11-16 10:02
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人NFkBp65定量检测试剂盒(ELISA)
- 上海金穗生物科技有限公司专业销售各种生化试剂、标准品、透析袋。本公司所有产品主要用于科研方面,不用于临床诊断。欢迎来电洽询!全国免费客服热线:400-021-1237本公司多年专业酶免服务,质量保证,价格低,超过5万家科研单位、10万家工厂的合作经验,让我们的elisa试剂盒、生化试剂更具有竞争力。期待您的来电合作![详细]
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2018-10-08 10:00
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人脂蛋白(Lpa)定量检测试剂盒 ELISA 试剂盒
- 人脂蛋白(Lpa)定量检测试剂盒 ELISA 试剂盒[详细]
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2015-03-20 00:00
安装说明
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大鼠胰岛素(INS)定量检测试剂盒(ELISA)
- 本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。大鼠胰岛素(INS)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】大鼠胰岛素(INS)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中胰岛素(INS)的含量。【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠胰岛素(INS)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中大鼠胰岛素(INS)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中大鼠胰岛素(INS)含量。【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品0.3mL×6管8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4样本稀释液6mL10说明书1份5特殊稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品(1号→6号)浓度依次为:16、8、4、2、1、0.5mU/L。【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先2加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。8、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。9、显色:每孔先加入显色剂A液50μL,再加入显色剂B液50μL,平板混匀器混匀30s(或用手轻轻震荡混匀30s),37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。Z终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的YZ剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。5、本试剂盒定量范围为0.5-16mU/L,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(0.5-16mU/L范围内),乘以总稀释倍数即为样本Z终浓度。6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。3【操作程序总结】准备试剂,样品和标准品加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值计算【检测范围】0.5mU/L-16mU/L【规格】96人份/盒【贮藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6个月[详细]
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2018-09-03 10:00
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大鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)定量检测试剂盒(ELISA)
- www.biokanu.com本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。大鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】大鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的含量。【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中大鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中大鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)含量。【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品:80pg/mL0.6mL8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4标准品稀释液6mL10说明书1份5样本稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:80、40、20、10、5、2.5pg/mL【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱标准规格酶标仪精密移液器及一次性吸头蒸馏水一次性试管吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:重复4的操作。8、洗板:重复5的操作。9、显色:每孔先加入显色剂A液50μL,再加入显色剂B液50μL,37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。Z终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的YZ剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。5、本试剂盒定量范围为2.5-80pg/mL,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用标准品稀释液稀释后测定准确结果(2.5-80pg/mL范围内),乘以总稀释倍数即为样本Z终浓度。6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。【操作程序总结】准备试剂,样品和标准品加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值计算【检测范围】2.5-80pg/mL【规格】96人份/盒【贮藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6个月[详细]
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2018-09-22 10:00
产品样册
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大鼠c-fos(c-fos)定量检测试剂盒(ELISA)
- www.biokanu.com本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。大鼠c-fos(c-fos)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】大鼠c-fos(c-fos)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测大鼠血清、血浆、组织及其它相关液体样本中c-fos(c-fos)的含量。【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠c-fos(c-fos)抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中大鼠c-fos(c-fos)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中大鼠c-fos(c-fos)含量。【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品(160pg/mL)0.6mL8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4样本稀释液6mL10说明书1份5标准品稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液倍比稀释为:160、80、40、20、10、5pg/mL.【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱标准规格酶标仪精密移液器及一次性吸头蒸馏水一次性试管吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。8、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。9、显色:每孔先加入显色剂A液50μL,再加入显色剂B液50μL,平板混匀器混匀30s(或用手轻轻震荡混匀30s),37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。Z终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的YZ剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。5、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。6、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。7、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。8、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。【操作程序总结】准备试剂,样品和标准品加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值计算【检测范围】5pg/mL160pg/mL【规格】96T/盒【贮藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6个月[详细]
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2018-09-22 10:00
产品样册
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鲍鱼睾酮(T)定量检测试剂盒(ELISA)
- www.biokanu.com本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。鲍鱼睾酮(T)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】鲍鱼睾酮(T)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测鲍鱼血清、血浆及相关液体样本中睾酮(T)的含量。【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被鲍鱼睾酮(T)抗体的透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中鲍鱼睾酮(T)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中鲍鱼睾酮(T)含量。【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品:8ng/mL0.6mL8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4标准品稀释液6mL10说明书1份5样本稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:8、4、2、1、0.5、0.25pg/mL【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱标准规格酶标仪精密移液器及一次性吸头蒸馏水一次性试管吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:重复4的操作。8、洗板:重复5的操作。9、显色:每孔先加入显色剂A液50μL,再加入显色剂B液50μL,37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。Z终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的YZ剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。5、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。6、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。7、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。【操作程序总结】准备试剂,样品和标准品加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值计算【检测范围】0.25-8ng/mL【规格】96人份/盒【贮藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6个月[详细]
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2018-09-22 10:00
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鲍鱼雌二醇(E2)定量检测试剂盒(ELISA)
- www.biokanu.com本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。鲍鱼雌二醇(E2)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】鲍鱼雌二醇(E2)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测鲍鱼血清、血浆及相关液体样本中雌二醇(E2)的含量。【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被鲍鱼雌二醇(E2)抗体的透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中鲍鱼雌二醇(E2)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中鲍鱼雌二醇(E2)含量。【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品:160pg/mL0.6mL8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4标准品稀释液6mL10说明书1份5样本稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:160、80、40、20、10、5pg/mL【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱标准规格酶标仪精密移液器及一次性吸头蒸馏水一次性试管吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:重复4的操作。8、洗板:重复5的操作。9、显色:每孔先加入显色剂A液50μL,再加入显色剂B液50μL,37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。Z终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的YZ剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。5、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。6、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。7、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。【操作程序总结】准备试剂,样品和标准品加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值计算【检测范围】5-160pg/mL【规格】96人份/盒【贮藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6个月[详细]
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2018-09-22 10:00
产品样册
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猪肿瘤坏死因子α(TNF-α)定量检测试剂盒(ELISA)
- 上海金穗生物科技有限公司是一家专门从事生物技术相关产品研发和销售的综合性生命科学公司,公司以超前的市场观念、良好的产品形象以及雄厚的技术实力取得了多家国内外知名公司的代理权,目前拥有国内外各产品,坐拥上海,辐射全ZG。面向各地科研院所、高等院校、卫生检验检疫部门、工农业部门、环境保护部门相关实验室和制药、食品、饮料、化工、畜牧、水产等企业提供服务。市场业务遍布全国各地,公司始终坚持不懈地跟踪Zxin科研方向,掌控Zxin国际前沿科学新技术,不断进取,为广大客户提供**、Z快的服务和优质产品而不懈努力。400-021-1237[详细]
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2018-10-08 10:00
产品样册
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猪胰岛素(INS)定量检测试剂盒(ELISA)
- 上海金穗生物科技有限公司是一家专门从事生物技术相关产品研发和销售的综合性生命科学公司,公司以超前的市场观念、良好的产品形象以及雄厚的技术实力取得了多家国内外知名公司的代理权,目前拥有国内外各产品,坐拥上海,辐射全ZG。面向各地科研院所、高等院校、卫生检验检疫部门、工农业部门、环境保护部门相关实验室和制药、食品、饮料、化工、畜牧、水产等企业提供服务。市场业务遍布全国各地,公司始终坚持不懈地跟踪Zxin科研方向,掌控Zxin国际前沿科学新技术,不断进取,为广大客户提供**、Z快的服务和优质产品而不懈努力。400-021-1237[详细]
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2024-09-29 14:41
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检测猪肉盐酸克伦特罗
- 检测猪肉盐酸克伦特罗[详细]
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2016-01-20 00:00
实验操作
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(NSP)定量检测试剂盒
- 牛口蹄疫病毒非结构蛋白(NSP)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】牛口蹄疫病毒非结构蛋白(NSP)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测牛血清、血浆及相关液体样本中口蹄疫病毒非结构蛋白(NSP)的含量。【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被牛口蹄疫病毒非结构蛋白(NSP)多克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中牛口蹄疫病毒非结构蛋白(NSP)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中牛口蹄疫病毒非结构蛋白(NSP)含量。【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7底物夜A6mL2标准品:80ng/ml0.6mL8底物夜B6mL320倍浓缩洗涤液20mL9终止液6mL4标准品稀释液6mL10说明书1份5样本稀释液6mL11封板膜1张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:80、40、20、10、5、2.5ng/ml【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:重复4的操作。8、洗板:重复5的操作。9、显色:每孔先加入显色剂A液50μL,再加入显色剂B液50μL,37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。Z终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。相关产品:小鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA试剂盒大鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒CAS号:14588-08-0,三苯基膦醋酸钯,Pd14.2%CAS号:7770-78-7,牛蒡子苷元,分析标准品,>98%CAS号:591-54-8,4-氨基嘧啶?CAS号:55745-70-5,2,3-二氢-5-醛基-1-苯并呋喃,95%CAS号:1878-65-5,3-氯,98%MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAkitCAS号:36052-24-1,6-氨基烟酸甲酯?CAS号:17733-22-1,2-氯茴香硫醚,98%FishCortisolELISAKitRatVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAkit大鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒CAS号:80745-09-1,Z-Arg(Mtr)-OHCHA,98%CAS号:58775-05-6,2,7-二叔丁基芴,98%CAS号:9000-90-2,α-淀粉酶,BRBovinesecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit人肌球蛋白(Myosin)ELISA试剂盒rabbittelomerase,TEELISAKitCAS号:4411-26-1,1-Adamantylisothiocyanate?大鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒HumanLegionellaantibodyIgA,LPAb-IgAELISAKitCAS号:1866-38-2,3-氯肉桂酸,98%RatKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒CAS号:38222-83-2,2,6-二叔丁基-4-甲基吡啶,98%CAS号:1016-05-3,二苯并噻吩砜,97%CAS号:10538-51-9,2,5-二甲氧基肉桂酸,99%[详细]
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2018-10-23 10:31
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人白介素6(IL-6)定量检测试剂盒(ELISA)说明书
- 本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。人白介素6(IL-6)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】人白介素6(IL-6)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测人血清、血浆及相关液体样本中白介素6(IL-6)的含量。【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被人白介素6(IL-6)多克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人白介素6(IL-6)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人白介素6(IL-6)含量。【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7底物夜A6mL2标准品:120pg/ml0.6mL8底物夜B6mL320倍浓缩洗涤液20mL9终止液6mL4标准品稀释液6mL10说明书1份5样本稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:120、60、30、15、7.5、3.7pg/ml【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先2加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:重复4的操作。8、洗板:重复5的操作。9、显色:每孔先加入显色剂A液50μL,再加入显色剂B液50μL,37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。Z终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的YZ剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。5、本试剂盒定量范围为3.7-120pg/ml,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(3.7-120pg/ml范围内),乘以总稀释倍数即为样本Z终浓度。6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。【操作程序总结】3准备试剂,样品和标准品加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值计算【检测范围】3.7-120pg/ml【规格】96T/盒【贮藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6个月[详细]
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2018-09-03 10:00
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人促黄体生成素定量ELISA检测试剂盒
- 定量检测人血清、血浆及相关液体样本中白介素1(IL-1)的含量。【检测原理】本试剂盒采用双抗体一步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本和酶标工作液加入到预先包被人促黄体生成素(LH)抗体的透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入显色剂A、B液,显色剂(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人促黄体生成素(LH)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人促黄体生成素(LH)含量。备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:80、40、20、10、5、2.5mIU/mL人促黄体生成素定量ELISA检测试剂盒【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸人促黄体生成素定量ELISA检测试剂盒【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);每孔再加入酶标工作液100μL;空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、显色:每孔先加入显色剂A液50μL,再加入显色剂B液50μL,37℃避光显色15min。7、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。8、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD<,/SPAN>值)。9、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。Z终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。人促黄体生成素定量ELISA检测试剂盒【样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的YZ剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。5、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。6、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。7、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。[详细]
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2018-09-14 10:00
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大鼠聚集蛋白聚糖 (Agc)定量检测试剂盒(ELISA)
- www.biokanu.com本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。大鼠聚集蛋白聚糖(Agc)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】大鼠聚集蛋白聚糖(Agc)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中聚集蛋白聚糖(Agc)的含量。【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠聚集蛋白聚糖(Agc)抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中大鼠聚集蛋白聚糖(Agc)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中大鼠聚集蛋白聚糖(Agc)含量。【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品0.6mL8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4样本稀释液6mL10说明书1份5标准品稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:16、8、4、2、1、0.5μg/L【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱标准规格酶标仪精密移液器及一次性吸头蒸馏水一次性试管吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。8、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。9、显色:每孔先加入显色剂A液50μL,再加入显色剂B液50μL,平板混匀器混匀30s(或用手轻轻震荡混匀30s),37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。Z终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的YZ剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。5、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。6、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。7、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。8、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。【操作程序总结】准备试剂,样品和标准品加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值计算【检测范围】0.5μg/L-16μg/L【规格】96T/盒【贮藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6个月[详细]
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2018-09-22 10:00
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大鼠Ⅱ型胶原 (ColⅡ)定量检测试剂盒(ELISA)
- www.biokanu.com本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。大鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】大鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中Ⅱ型胶原(ColⅡ)的含量。【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中大鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中大鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)含量。【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品0.6mL8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4样本稀释液6mL10说明书1份5标准品稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:8、4、2、1、0.5、0.25μg/L【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱标准规格酶标仪精密移液器及一次性吸头蒸馏水一次性试管吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。8、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。9、显色:每孔先加入显色剂A液50μL,再加入显色剂B液50μL,平板混匀器混匀30s(或用手轻轻震荡混匀30s),37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。Z终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的YZ剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。5、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。6、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。7、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。8、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。【操作程序总结】准备试剂,样品和标准品加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值计算【检测范围】0.25μg/L-8μg/L【规格】96T/盒【贮藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6个月[详细]
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2018-09-22 10:00
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莱克多巴胺(Rac)定量检测试剂盒(ELISA)
- www.biokanu.com莱克多巴胺(Rac)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书一、概要β兴奋剂是一种人和兽医作为ZL哮喘的药物。在牲畜中超剂量使用可以脂肪组织转化为肌肉组织,由于能够显著改善脂肪率和生产效率,β兴奋剂往往被滥用于畜牧养殖生产中。已经有克伦特罗或其他β兴奋剂中毒的病例报道,近来又有一些非法使用莱克多巴胺(Rac)来替代克伦特罗作为饲料添加,并存在滥用现象。通常情况下,HPLC或GC-MS是克伦特罗残留检测的确证方法,但是其前处理步骤繁琐、费用昂贵。酶联免疫快速检测试剂盒具有成本低廉、操作简便、一次处理样本量大等优点,已成为常规的初步筛查方法。本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点,能Zda限度地减少操作误差和工作强度。二、用途定量检测动物尿液中莱克多巴胺(Rac)的残留。三、检测原理本试剂盒采用竞争酶联免疫试验。检测的基础是抗原抗体反应,微孔板预包被羊抗鼠IgG捕获抗体,加入鼠抗莱克多巴胺抗体后,会与捕获抗体连接。经过孵育及洗板后,加入标准品、样品及莱克多巴胺酶标记物(Rac-HRP),游离的莱克多巴胺(Rac)与莱克多巴胺酶标记物(Rac-HRP)竞争莱克多巴胺抗体结合位点。经过孵育及洗板后,加入底物并孵育。结合的酶连接物将底物转化为蓝色的产物。加入反应终止液后使颜色由蓝转变为黄色。在450nm处测量,吸光度值与样品中的莱克多巴胺浓度成反比,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数即可得出样品中莱克多巴胺的含量。四、检测限检测限:0.05ng/ml(0.05ppb)五、特异叉物交叉率(%)Dobutamine……………………………………5.3Ritodrine………………………………………3.6RactopamineGluc.A…………………………1.0RactopamineGlucB……………………………384(1S,3S)Ractopamine…………………………2.1(1R,3S)-Ractopamine……………………………0.9Isoxsuprine………………………………………0.3Salmeterol…………………………………………0.3Fenoterol…………………………………………0.1Clenbuterol……………………………………<0.01Salbutamol………………………………………<0.01六、试剂盒组成每一个盒中的试剂足够进行96个试验(包括标准测定),试剂盒中的组份如下:1、96孔酶标板1块(12孔×8条):预包被羊抗鼠IgG2、标准液×6瓶(1ml/瓶):0ng/mL、0.1ng/mL、0.3ng/mL、0.9ng/mL、2.7ng/mL、8.1ng/mL3、酶连接物(6mL):辣根过氧化物酶标记的莱克多巴胺工作液4、莱克多巴胺抗体(6mL):鼠抗莱克多巴胺单克隆抗体工作液5、底物液A(6mL):过氧化脲6、底物液B(6mL):四甲基联苯胺(TMB)7、终止液(6mL):2NH2SO48、浓缩洗涤液(25×)(25mL):含Tween-20的磷酸盐缓冲液(PBST)9、其他:封板膜3张,自封袋1个,说明书1份七、样本处理处理任何样本,必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。取50μL清亮尿样直接测定,如尿样浑浊3000转离心10min,取上层清亮尿液测定,暂不使用的样本应于-20℃冷冻保存。八、检测步骤仔细的洗涤非常重要。避免在操作过程中微孔出现干燥。1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20-25℃)平衡30min以上。2、准备:取出需要数量的微孔板,将用剩的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。将微孔板条插入微孔架,标准品和样品做两个平行实验,记录下标准品和样品的位置。3、加抗体:每孔加入100μL稀释后的抗体溶液,37℃恒温箱孵育30分钟。4、洗板:倒出孔中的液体,将微孔架倒置在干净吸水纸上拍打,以保证完全除去孔中的液体。每孔加满稀释后的洗涤工作液,静置20秒钟,甩去液体,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次。5、加标准品/样品:加入50μL标准品或处理好的样品到各自的微孔中,标准品和样品做两个平行实验,然后加入50μL稀释后的酶连接物到微孔,小心地充分混合,37℃恒温箱孵育30分钟。6、重复3的操作。7、显色:每孔先加入底物液A50μL,再加入底物液B50μL,37℃避光孵育15min(如果显色过浅,可适当延长孵育时间,反之亦然)。8、测定:每孔加入终止液50μL,设定酶标仪于450nm处,测定每孔OD值。九、结果判定(1)百分吸光率的计算,标准品或样本的百分吸光率等于标准品或样本的百分吸光度值的平均值(双孔)除以**个标准(0标准)的吸光度值,再乘以1**%,即百分吸光度值(%)=B×1**%B0B标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B00ppb标准溶液的平均吸光度值(2)标准曲线的绘制与计算以标准品百分吸光率为纵坐标,以莱克多巴胺标准品浓度(ppb)的半对数为横坐标,绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中莱克多巴胺的实际浓度。若利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于大量样本的准确、快速分析。(欢迎来电索取)十、注意事项1、严格按照说明书操作时间,每加一种试剂前需要将其摇匀,各操作步骤紧凑进行。2、室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温(20-25℃)会导致所有标准的OD值偏低。3、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。4、试剂变质的迹象底物有任何颜色表明变质,应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。5、不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。6、在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色20min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到25min(或更长),但不得超过30min。反之,则减短反应时间。7、反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。十一、贮存条件及有效期贮存条件:2-8℃、干燥避光防潮。有效期:在正确贮存条件下,有效期为12个月。[详细]
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2018-09-22 10:00
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人P21蛋白(P21)定量检测试剂盒(ELISA)
- 上海金穗生物科技有限公司专业销售各种生化试剂、标准品、透析袋。本公司所有产品主要用于科研方面,不用于临床诊断。欢迎来电洽询!全国免费客服热线:400-021-1237本公司多年专业酶免服务,质量保证,价格低,超过5万家科研单位、10万家工厂的合作经验,让我们的elisa试剂盒、生化试剂更具有竞争力。期待您的来电合作![详细]
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2018-10-08 10:00
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人过氧化氢酶(CAT)定量检测试剂盒(ELISA)说明书
- 本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。人过氧化氢酶(CAT)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】人过氧化氢酶(CAT)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测人血清、血浆及相关液体样本中过氧化氢酶(CAT)的含量。【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被人过氧化氢酶(CAT)多克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人过氧化氢酶(CAT)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人过氧化氢酶(CAT)含量。【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7底物夜A6mL2标准品:40ng/ml0.6mL8底物夜B6mL320倍浓缩洗涤液20mL9终止液6mL4标准品稀释液6mL10说明书1份5样本稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:40、20、10、5、2.5、1.25ng/ml【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先2加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:重复4的操作。8、洗板:重复5的操作。9、显色:每孔先加入显色剂A液50μL,再加入显色剂B液50μL,37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。Z终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的YZ剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。5、本试剂盒定量范围为1.0-40ng/ml,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(1.0-40ng/ml范围内),乘以总稀释倍数即为样本Z终浓度。6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。【操作程序总结】3准备试剂,样品和标准品加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值计算【检测范围】1.0-40ng/ml【规格】96T/盒【贮藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6个月[详细]
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2024-09-29 14:33
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