酶联免疫吸附实验（ELISA） 全套解决方案

本文由 湖南湘仪实验室仪器开发有限公司 整理汇编

2024-09-16 12:05 647阅读次数

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  1原理包被于塑料板上的固相凝聚IgG与酶联C1q的结合受标本中免疫复合物的YZ，是一种竞争性YZ试验。为避免标本中内源C1q的干扰，应预先用IgG免疫吸附剂将其除去。2材料（1）聚苯乙烯反应板，酶联免疫检测仪。（2）免疫吸附剂系结合有IgG的纤维素。取纤维素（5%，pH值105）与溴化*一起室温反应10min，用01mol/L碳酸氢钠缓冲液（pH值80）充分洗涤。再与IgG一起于4℃下作用18h（20ml缓冲液中含3g纤维素和100mgIgG）。制备物用27mol/L甘氨酸缓冲液（pH值80）配成20%（W/V）悬液，贮于4℃。（3）酶联C1q用戊二醛法将辣根过氧化物酶标记C1q，再经超滤AmiconXM200滤膜）分离贮于－20℃。（4）其他试剂002mol/LTrisHCl缓冲液（pH值90）；02mol/LTrisHCl缓冲液（pH值7.4），以及含005%Tween20的同一缓冲液；02mol/LEDTA（pH值76）；酶底物溶液和中止液。3方法（1）包被凝聚IgG取经002mol/LTrisHCl缓冲液（pH值90）透析过夜的凝聚IgG（100μg/ml），加入聚苯乙烯板孔内，每孔100μl，37℃包被30min后，用缓冲液洗3次（第1次、第3次用02mol/LTrisHCl缓冲液（pH值74）；第2次用含005%Tween20的同一缓冲液）,真空干燥，贮于4℃。（2）取血清标本50μl，加入02mol/LEDTA（pH值76）50μl，室温作用10min，使内源C1q游离，然后加入IgG免疫吸附剂500μl，室温振荡20min，再以500r/min离心5min，得到1∶10稀释的上清液。（3）取已包被凝聚IgG的塑料反应板，每孔中加入上述上清液90μl，酶联C1q10μl（1∶100～200稀释液），室温下反应20min，然后用含02mol/LNaCl，005%Tween20的02mol/LTrisHCl缓冲液（pH值74）洗3次，再加入100μl底物溶液（pH值60、01mol/L磷酸盐枸橼酸盐缓冲液50ml中，加入邻苯二胺20mg，30%（W/V）过氧化氢10μl），室温放30min，加入2mol/L硫酸50μl中止反应，于492nm读取吸光值。如果定量，可用凝聚IgG制作标准曲线，测出免疫复合物的相对含量。上海恒远主营产品/服务:ELISA试剂盒,免疫组化试剂盒，放免试剂盒，标准品，血清，抗体，培养基，细胞，生物试剂，实验耗材等欢迎联系，联系电话：021-60515410,18221290082！[详细]

  2018-11-15 10:03

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  大连依利特分析仪器有限公司作为国内知名厂家，秉承着“质量更佳、服务更优、创新更快”的理念，十几年来为食品安全、药品检测及高校应用等众多行业提供着完善的分析方法及先进的仪器配置。从苏丹红、孔雀石绿到“三鹿奶粉三聚氰胺”事件，关系着国计民生的“食品安全”问题一次次的为我们敲响警钟，并引起社会的广泛关注。针对“三聚氰胺”事件，依利特人在**时间做出反应，荣获由国家认证认可监督管理委员会颁发的“能力验证合格实验室证书”，并且按照GB/T22388-2008《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》、GB/T22400-2008《原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法》的国家标准，在经过大量实验验证后，为您提供符合国标的三聚氰胺检测解决方案，包括分析方法验证及推荐仪器配置在内的全套解决方案！[详细]

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  2016-05-07 00:00

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