ELISA中的试剂－结合物

本文由 上海希美化学有限公司 整理汇编

2024-09-19 03:52 187阅读次数

收藏 评价 举报

• 分享

立即下载

参与评论

评论

登录后参与评论

登录或新用户注册

• 微信登录
• 密码登录
• 短信登录

请用手机微信扫描下方二维码
快速登录或注册新账号

微信扫码，手机电脑联动

注册登录即表示同意《仪器网服务条款》和《隐私协议》

账  号：

密  码：

图片码： 看不清？
换一张？

手机和邮箱号注册新账号>> 忘记密码？

手机号：

图片码： 看不清？
换一张？

短信码： 获取短信码

手机和邮箱号注册新账号>> 忘记密码？

更多资料

• ELISA中的试剂－结合物

  ELISA中的试剂－结合物[详细]

  2024-09-19 03:52

  期刊论文

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• ELISA中的试剂－免疫吸附剂

  ELISA中的试剂－免疫吸附剂[详细]

  2024-09-18 18:10

  专利

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• ELISA中的试剂－酶的底物

  ELISA中的试剂－酶的底物[详细]

  2024-09-14 21:22

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• AKF-2010V卡氏水分仪测定视黄醇结合蛋白试剂中的水分

  视黄醇结合蛋白测定试剂用于体外定量测定人血清或尿液中视黄醇结合蛋白的含量。 视黄醇结合蛋白是反映机体营养状态的一个灵敏指标。本试验采用AKF-2010V卡尔费休水分测定仪，通过直接进样测定视黄醇结合蛋白测定试剂中的水分含量。[详细]

  2024-09-10 21:55

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• elisa试剂器材

  Elisa试剂器材：试剂：　　（1）　包被缓冲液（PH9.60.05M碳酸盐缓冲液）:　　Na2CO31.59克　　NaHCO3　2.93克　　加蒸馏水至1000ml　　（2）　洗涤缓冲液（PH7.4PBS）：0.15M　　KH2PO40.2克　　Na2HPO412H2O　2.9克　　NaCl　8.0克　　KCl　0.2克　　Tween-20　0.05%　0.5ml更多资料请下载文件小鼠elisa试剂盒[详细]

  2024-09-29 07:19

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠ELISA试剂盒实验中的试剂详细介绍

  小鼠ELISA试剂盒实验中的试剂详细介绍在小鼠ELISA试剂盒临床检验中大多采用商品试剂盒进行测定。ELISA中必须要有三种试剂：免疫吸附剂、结合物和酶的底物。完整的ELISA试剂盒应该具备以下几种试剂：（1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；（2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；（3）酶的底物；（4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量测定中）；（5）结合物及标本的稀释液；（6）洗涤液；（7）酶反应终止液。下面就对几种试剂进行详细的介绍：1　免疫吸附剂已包被抗原或抗体的固相载体在低温（2~8℃）干燥的条件下一般可保存6个月。有些不完整的试盒，仅供应包被用抗原或抗体，检测人员需自行包被。以下简述固相载体和包被过程。1.1　固相载体固相载体在ELISA测定过程中作为吸附剂和容器，不参与化学反应。可作ELISA中载体的材料很多，Z常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或蛋白质抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性，加之它的价格低廉，所以被普遍采用。聚苯乙烯为塑料，可制成各种形式。ELISA载体的形状主要有三种：微量滴定板、小珠和小试管。以微量滴定板Z为常用，专用于EILSA的产品称为ELISA板，国际上标准的微量滴定板为8×12的96孔式。为便于作少量标本的检测，有制成8联孔条或12联孔条的，放入座架后，大小与标准ELISA板相同。ELISA板的特点是可以同时进行大量标本的检测，并可在特制的比色计上迅速读出结果。现在已有多种自动化仪器用于微量滴定板型的ELISA检测，包括加样、洗涤、保温、比色等步骤，对操作的标准化极为有利。聚苯乙烯经射线照射后，其吸附性能特别是对免疫球蛋白的吸附性能增加，应用于双抗体夹心法可使固相上抗体量增多，但用于间接法测抗体时空白值较大。良好的ELISA板应该是吸附性能好，空白值低，孔底透明度高，各板之间、同一板各孔之间、同一板各孔之间性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工艺的差别，各种产品的质量差异很大，因此，每一批号的ELISA板在使用前须事先检查其性能。小鼠ELISA试剂盒常用的检查方法为：以一定浓度的人IgG（一般为10ng/ml）包被ELISA板各孔，洗涤后每孔内加入适当稀释度的酶标抗人IgG抗体，保温后洗涤，加底物显色，终止酶反应后，分别测每孔溶液的吸光度。控制反应条件，使各孔读数在吸光度0.8左右。计算全部读数的平均值。所有单个读数与全部读数的均数之差，应小于10%。与聚苯乙烯类似的塑料是聚氯乙烯。作为ELISA固相载体，聚氯乙烯的特点为质软板薄，可剪割，价廉，但光洁度不如聚苯乙烯板，孔底亦不如聚苯乙烯平整。聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值也略高。为比较不同固相在某一ELISA测定中的优劣，可应用如下的试验：用其他免疫学测定方法选出一个典型的阳性标本和阴性标本，将它们进行一系列稀释后，在不同的固相载体上按预定的ELISA操作步骤进行测定，然后比较结果。在哪一种载体上阳性结果与阴性结果差别Zda，这种载体就是这一ELISA测定项目的Z合适的固相载体。在ELISA中，用作固相载体的小珠一般为直径0.6cm的圆珠，表面经磨砂处理后吸附面积大大增加。ELISA板孔的吸附面积约为200mm2，小珠均为1000mm2，将近ELISA板孔的5倍。吸附面积的增大即意味着固相抗原或抗体量的增加。再者，球型小珠的表面弧度更有利于吸附的抗原决定簇或抗体结合位点的暴露面处于**反应状态，因此珠式ELISA的反应往往更为灵敏。小珠的另一特点是更易于使洗涤彻底，使用特殊的洗涤器，使小珠在洗涤过程中滚动淋洗，其洗涤效果远较板孔的浸泡式为好。但由于磨砂工艺的难度较大，小珠的均一性较差。小试管作为固相载体也有较大的吸附表面，而且标本的反应量也相应增加。板式及珠式ELISA的标本量一般为100-200ul，而小试管可根据需要加大反应体积，标本反应量的增加有助于试验敏感性的提高。小试管还可以当作比色杯，Z后直接放入分光光度计中比色。也有小鼠ELISA试剂盒应用聚苯乙烯胶乳或其他材料制成的微粒作为ELISA固相载体的。其优点是表面积极大，反应在悬液中进行，其速率与液相反应近似。以含铁的磁性微粒作为ELISA固相载体，反应后用磁铁的吸引进行分离，洗涤方便，试剂盒一般均配以特殊仪器。[详细]

  2018-09-14 10:01

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 细胞培养中的一些试剂

  细胞培养中的一些试剂[详细]

  2024-09-14 16:59

  应用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• ELISA试剂的临床质量评价

  ELISA试剂的临床质量评价[详细]

  2010-03-26 00:00

  其它

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• ELISA试剂的选用和质检

  蛋白酶YZ剂,9087-70-1Aprotininfrombovinelung别名：抑肽酶；Trypsininhibitor（basic）分子式：C284H432N84O79S7分子量：6511.44CAS＃：9087-70-1外观：白色粉末特性：活性（KIU/mg）：>4500纯度（HPLC）：PASSR：42/43S：36/37/39储存条件：2-8℃使用说明：用0.01mol/LHepes溶解，储存液浓度1mg/ml工作浓度：0.6-2ug/ml蛋白酶YZ剂,9087-70-1XY8260Aprotinin蛋白酶YZ剂2mg瓶蛋白酶YZ剂,9087-70-1XY8260Aprotinin蛋白酶YZ剂5mg瓶[详细]

  2019-01-02 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• ELISA的技术要点--试剂的制备

  ELISA的技术要点--试剂的制备试剂的制备　　ELISA的主要试剂有固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。以下分别介绍这些试剂的原料和制备方法。　　（一）固相载体　检测中可作ELISA中载体的物质很多，Z常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯为塑料，可制成各种形式。在ELISA测定过程中，它作为载体和容器，不参与化学反应。重要的是聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或蛋白质抗原吸附其上后依然保留原来的免疫活性。加之它的价格低廉，所以被普遍采用。　　ELISA载体的形状主要有三种：小试管、小珠和微量反应板。小试管的特点是兼作反应的容器，Z后放入分光光度计中比色。小珠一般为直径0.6cm的圆球，表面经磨砂处理后吸附面积大增加。如用特殊的洗涤器，在洗涤过程中使圆珠滚动淋洗，效果更好。Z常用的载体为微量反应板，专用于ELISA测定的产品也称为ELISA试剂盒，国际通用的标准板形是8×12的96孔式。为便于作少量标本的检测，有制成8联或12联孔条的，放入座架后，大小与标准ELISA板相同。ELISA试剂盒的特点是可以同时进行大量标本的检测，并可在特定的比色计上迅速读出结果。现在已有多种自动化仪器用于微量反应板型的ELISA检测，包括加样、洗涤、保温、比色等步骤，对操作的标准化有重要意义。　　良好的ELISA试剂盒应该是吸附性能好，空白值低，孔底透明度高，各板之间和同一板各孔之间性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工艺的差别，各种产品的质量差异很大。因此每一批号的聚苯乙烯制品在使用前须检查其性能。常用的检查方法为：以一定浓度的人IgG（一般为10ng/ml）包被ELISA板各孔后，每孔内加入适当稀释的酶标抗人IgG抗人IgG抗体，保温后洗涤，加底物显色，终止酶反应后分别测每孔溶液的吸光度。控制反应条件，使各读数在0.8左右。计算所有读数的平均值。所有单个读数与平均读数之差应小于10％。　　与聚苯乙烯类似的塑料为聚氯乙烯。作为ELISA固相载体，聚氯乙烯板的特点为质软板薄，可切割，价廉、但光洁度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值有时也略高。　　为比较不同固相在某一ELISA测定中的优劣，可用以下方法加以检验：用其它免疫学测定方法选出一个典型的阳性标本和一个典型的阴性标本。将它们分别进行一系列稀释后，在不同的固相载体上按预定的ELISA操作步骤进行测定，然后比较测定结果。在哪一种载体上阳性结果与阴性结果判别Zda，这种载体就是这一ELISA测定的Z合适的固相载体。　　除塑料制品外，固相酶免疫测定的载体还有两种材料：一是微孔滤膜，如硝酸纤维素膜、尼龙膜等。另一种载体是以含铁的磁性微粒制作的，反应时固相微粒悬浮在溶液中，具有液相反应的速率，反应结束后用磁铁吸引作为分离的手段，洗涤也十分方便，但需配备特殊的仪器。　　（二）抗原和抗体　　在ELISA实施过程中，抗原和抗体的质量是实验是否成功的关键因素。本法要求所用抗原纯度高，抗体效价高、亲和力强。　　ELISA所用抗原有三个来源：天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原。天然抗原取材于动物组织或体液、微生物培养物等，一般含有多种抗原成分，需经纯化，提取出特定的抗原成分后才可应用，因此也称提纯抗原（purifiedantigen）。重组抗原（recombinantantigen）和多肽抗原（peptideantigen）均为人工合成品，使用安全，而且纯度高，干扰物质少。因此虽然制备合成抗原有较高的技术难度且要求较为昂贵的仪器设备和试剂，其应用仍十分普遍，特别是对那些天然抗原不易得到的试验，更显出其独到之处。　　用于ELISA的抗体有多克隆的和单克隆的。抗血清成分复杂，应从中提取IgG才可用于包被固相或酶标记。含单克隆抗体的小鼠腹水中的特异性抗体含量较高，有时可适当稀释后直接进行包被。制备酶结合物用的抗体的质量往往要求有较高的纯度。经硫酸铵盐析纯化的IgG可进一步用各种分子筛层析提纯。也可用亲和层析法提纯特异性IgG，如用酶消化IgG后提取的Fab片段，则效果更好。　　（三）免疫吸附剂　　固相的抗原或抗体称为免疫吸附剂。将抗原或抗体固相化的过程称为包被（coating）。由于载体的不同，包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板为载体，通常将抗原或抗体溶于缓冲液（Z常用的为pH9.6的碳酸缓冲液）中，加于ELISA板孔中在4℃，经清洗后即可应用。如果包被液中的蛋白质浓度过低，固相载体表面有能被此蛋白质完全覆盖，其后加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面，Z后产生非特异性显色而导致本底偏高。在这种情况下，如在包被后再用1％～5％牛血清白蛋白包被一次，可以消除这种干扰。这一过程称为封闭（blocking）。包被好的ELISA试剂盒在低温可放置一段时间而不失去其免疫活性。　　（四）酶和底物　　ELISA中所用的酶要求纯度高、催化反应的转化率高、专一性强、性质稳定、来源丰富、价格不贵、制备成的酶标抗体或抗原性质稳定，继续保留着它的活性部分和催化能力。**在受检标本中不存在与标记酶相同的酶。另外它的相应底物应易于制备和保存，价格低廉，有色产物易于测定，光吸收高。ELISA中Z常用的酶为辣根过氧化酶（HRP）和从牛肠粘膜或大肠杆菌提取的碱性磷酸酶（AP）。HRP在蔬菜作物辣根中含量很高，纯化方法也不复杂。它是一种糖蛋白，含糖量约18％；分子量为44kD；是一种复合酶，由主酶（酶蛋白）和辅基（亚铁血红素）结合而成的一种卟啉蛋白质。主酶为无色糖蛋白，在275nm波长处有Z高吸收峰；辅基是深棕色的含铁卟啉环.[详细]

  2018-09-27 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 生物样品预处理-样品冷冻干燥及结合物水解

  生物样品预处理-样品冷冻干燥及结合物水解[详细]

  2024-09-21 00:30

  其它

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 食品中掺假物的分析

  食品中掺假物的分析[详细]

  2024-09-20 13:28

  其它

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 石化行业 试剂甲醛中含水量的测试

  石化行业 试剂甲醛中含水量的测试[详细]

  2019-01-25 09:17

  应用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 石化行业 试剂甲醇中含水量的测定

  石化行业 试剂甲醇中含水量的测定[详细]

  2019-01-25 09:17

  应用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 中药注射剂中絮状物的检测

  中药注射剂中絮状物的检测[详细]

  2016-01-22 00:00

  应用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 饮用酒中芳香物的研究

  生产威士忌需要将其置于木桶中陈化，以使其Z终产品的品质得以全面完善。木桶中细微的条件差别可产生不同的风味和香味，这就需要熟练的混合技巧，以使产品的品质一致。PerkinElmerTurboMatrix顶空捕集系统与ClarusSQ8GC/MS和SNFR闻香仪联合使用，可有效地鉴别饮用酒中低浓度的挥发性有机化合物（VOCs）。顶空进样器具有捕获上层空间物质的能力，以近似模拟消费者享用少量威士忌的情况。经气相色谱分离后，质谱可以鉴定那些消费者嗅觉能够体验的化合物，从而可以直接对消费者的体验进行详细分析。顶空进样与人类反应相比，独特的挑战是测定样品体积。由于化合物种类多及其气味阈值差距大，将顶空测定结果与人的鼻子直接从玻璃杯中闻到的挥发性有机物相比较时，大体积蒸气进样是比较合适的。为了达到该目的，利用TurboMatrix顶空捕集阱系统将顶空的气体收集在吸附捕集阱中。在本应用文献中，研究了一种麦芽威士忌中的VOCs。样品制备简单，包括移取一定体积的威士忌于样品瓶中，盖紧。样品瓶中上层空间的样品进入气相色谱，经过分离，质谱和嗅觉系统进行检测[详细]

  2018-08-17 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 衡器在物联网中的应用

  本文以一位木材老板外地实时查询木材称重情况的事例，介绍了物联网整体框架、工作原理及主要功能，从而达到人不在现场还可以监督和处理的目的。继而说明衡器在物联网中的现代化的应用。[详细]

  2018-11-22 17:34

  期刊论文

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• Orbitrap Exploris GC结合Compound Discoverer软件分析酒中的风味物质及其差异性标记物

  酒中风味物质的种类和含量十分丰富，主要包括醇类、醛类、酸类、酯类、芳香族化合物等多种类型化合物，这些物质是决定酒类香气、口感和风格的关键。[详细]

  2025-08-25 15:28

  应用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 石化行业 试剂二甲苯中水分含量的测定

  石化行业 试剂二甲苯中水分含量的测定[详细]

  2019-01-25 09:16

  应用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 采用岛津LC-20A结合ECD723电化学检测器检测儿茶酚胺类物

  采用岛津LC-20A结合ECD723电化学检测器检测儿茶酚胺类物[详细]

  2024-09-20 23:24

  选购指南

  |

  • 
  • 
  • 
  •