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细胞培养减少污染的方法
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本文由 上海索宝生物科技有限公司 整理汇编
2018-09-02 10:00 1264阅读次数
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细胞培养减少污染的方法●很多实验者都不bother自己洗手，酒精一喷就去实验了，这极端错误。个人经验：你仔细洗手比喷酒精效果还好。**的是肥皂/香皂仔仔细细的洗手，一直到手腕，指甲缝都要洗。洗两遍是一个不错的选择。然后手上喷酒精。●有人穿半截袖白大褂去做实验，白大褂袖口要长，**是袖口扎紧的那种，如果不能的话，把袖口窝向手臂。裸露的手腕部分一定也要喷酒精。戴上手套后手请避免接触工作台外面，如果不得已接触，那再喷酒精。宁可手套酒精味多一些。●拿培养瓶和培养液时候请托下面拿，切忌不要拿瓶颈部位。●每天实验开始时候，超净台/实验间照20分钟紫外是不错的选择。●有一点要注意的是，超净台里面的东西一定要尽量少放。放的越多越容易污染。●尽量避免操作时候说话，尤其是严禁细胞房打闹说笑。●每天观察细胞状态，不要总想着save，而是发现细胞不对劲（比如生长缓慢）就立即扔掉。有些（比如支原体）污染，镜检是看不到的，但是细胞的生长异常。所以如果细胞生长异常，那么请扔掉，同时由于支原体空气传播，请检查自己的培养液和培养箱是不是污染。
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细胞培养减少污染的方法- 细胞培养减少污染的方法●很多实验者都不bother自己洗手，酒精一喷就去实验了，这极端错误。个人经验：你仔细洗手比喷酒精效果还好。**的是肥皂/香皂仔仔细细的洗手，一直到手腕，指甲缝都要洗。洗两遍是一个不错的选择。然后手上喷酒精。●有人穿半截袖白大褂去做实验，白大褂袖口要长，**是袖口扎紧的那种，如果不能的话，把袖口窝向手臂。裸露的手腕部分一定也要喷酒精。戴上手套后手请避免接触工作台外面，如果不得已接触，那再喷酒精。宁可手套酒精味多一些。●拿培养瓶和培养液时候请托下面拿，切忌不要拿瓶颈部位。●每天实验开始时候，超净台/实验间照20分钟紫外是不错的选择。●有一点要注意的是，超净台里面的东西一定要尽量少放。放的越多越容易污染。●尽量避免操作时候说话，尤其是严禁细胞房打闹说笑。●每天观察细胞状态，不要总想着save，而是发现细胞不对劲（比如生长缓慢）就立即扔掉。有些（比如支原体）污染，镜检是看不到的，但是细胞的生长异常。所以如果细胞生长异常，那么请扔掉，同时由于支原体空气传播，请检查自己的培养液和培养箱是不是污染。[详细]
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- 污染是细胞培养的大敌常见的污染类型细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物，而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质，包括生物和化学物质。1、细菌污染细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染，即使在细胞培养液中加入了KJ素，也可能因为操作不慎而引起污染。Z常见的有革兰氏阳性菌，如枯草杆菌以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌，其中又以白色葡萄球菌较常见。培养细胞受细菌污染后，会出现培养液变混浊，pH改变。污染后细胞发生病理改变，胞内颗粒增多、增粗，Z后变圆脱落死亡。2、支原体污染支原体是介于细菌与病毒之间能独立生活的Z小微生物，Z小直径0.2μm，一般过滤CJ无法去除它，光镜下难以看清它的形态结构。开始不易发现，能在偏碱条件下生存，对青霉素有抗药性。多吸附于细胞表面或散在于细胞之间。培养细胞受支原体污染后，部分敏感细胞可见细胞生长增殖变慢，部分细胞变圆，从瓶壁脱落。但多数细胞污染后无明显变化，或略有变化，若不及时处理，还会产生交叉污染。3、病毒污染组织细胞培养过程中，如果没有除去潜在的病毒，就会产生病毒污染。目前，从原代猴肾细胞的培养中已发现不少于20种血清性病毒。尽管病毒污染的细胞不影响原代培养，但生产疫苗是不安全的。因此，潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题。4、真菌污染真菌污染是细胞培养过程中Z常见的一种，Z常见的真菌有烟曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。培养细胞受真菌污染后，可见培养液中漂浮着白色或浅黄色的小点，有的散在生长，培养液一般不发生混浊;倒置显微镜下可见丝状、管状或树枝状的菌丝纵横交错在细胞之间或培养基中，有的呈链状排列。真菌污染后，细胞生长变慢，但Z后由于营养耗尽及毒性作用而使细胞脱落死亡。5、非同种细胞污染由于细胞培养操作时各细胞株所需的器材和溶液没有严格分开，往往会使一种细胞被另一种细胞污染。目前，世界上已有几十种细胞都被HeLa细胞所污染，致使许多实验宣告无效。非细胞培养物所造成的化学成分的污染也偶有发生，大多是由于细胞培养所需物品清洗消毒不彻底而带入一些有毒化学物质所致。[详细]
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