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Ⅱ型胶原蛋白抗体(COL-Ⅱ Ab)ELISA试剂盒说明
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本文由 上海谷研生物科技有限公司 整理汇编
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Ⅱ型胶原蛋白抗体(COL-Ⅱ Ab)ELISA试剂盒说明
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Ⅱ型胶原蛋白抗体(COL-Ⅱ Ab)ELISA试剂盒说明
- Ⅱ型胶原蛋白抗体(COL-Ⅱ Ab)ELISA试剂盒说明[详细]
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2016-08-01 00:00
课件
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Ⅱ型胶原蛋白抗体说明书试剂盒检测说明
- Ⅱ型胶原蛋白抗体说明书试剂盒检测说明本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T0.4g/L-20g/L使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中Ⅱ型胶原蛋白抗体(COL-ⅡAb)含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠Ⅱ型胶原蛋白抗体(COL-ⅡAb)水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入Ⅱ型胶原蛋白抗体(COLⅡAb),再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的Ⅱ型胶原蛋白抗体(COL-ⅡAb)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠Ⅱ型胶原蛋白抗体(COL-ⅡAb)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(32g/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。16g/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液8g/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液4g/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液2g/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液1g/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2024-09-28 07:02
产品样册
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人I型胶原蛋白抗体elisa试剂盒使用方法
- 本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T1.5μg/L-40μg/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中I型胶原蛋白抗体(COL-IAb)含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人I型胶原蛋白抗体(COL-IAb)水平。用纯化的人I型胶原蛋白抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入I型胶原蛋白抗体(COL-IAb),再与HRP标记的I型胶原蛋白抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的I型胶原蛋白(COL-I)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人I型胶原蛋白抗体(COL-IAb)浓度。[详细]
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2018-12-30 10:00
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绵羊I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 绵羊I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T0.15μg/L5.0μg/L使用目的:本试剂盒用于测定绵羊血清、血浆及相关液体样本中I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中绵羊I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)水平。用纯化的绵羊I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入I型胶原蛋白(Col-Ⅰ),再与HRP标记的I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中绵羊I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)浓度。绵羊I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)酶联免疫分析试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。4.8μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液2.4μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液1.2μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液0.6μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液0.3μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。绵羊I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)酶联免疫分析试剂盒操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。绵羊I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-04 10:00
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牛I型胶原蛋白抗体(COL-I Ab)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 检测范围:96T0.7μg/L-16μg/L使用目的:本试剂盒用于测定牛血清、血浆及相关液体样本中I型胶原蛋白抗体(COL-IAb)含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中牛I型胶原蛋白抗体(COL-IAb)水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入I型胶原蛋白抗体(COL-IAb),再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的I型胶原蛋白(COL-I)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛I型胶原蛋白抗体(COL-IAb)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(32μg/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。16μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液8.0μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液4.0μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液2.0μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液1.0μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月__[详细]
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2018-10-03 10:00
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人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡ Ab)试剂盒(ELISA)
- 人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)试剂盒(ELISA)使用说明书l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)的含量。l有效期:6个月l保存条件:2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断实验原理试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)捕获抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样本处理及要求1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。7.建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水[详细]
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2018-11-15 10:03
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大鼠抗Ⅱ型胶原抗体(Col Ⅱ Ab)ELISA试剂盒说明书
- 检测范围:96T0.5μg/L-12μg/L大鼠抗Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)ELISA试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中抗Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中大鼠抗Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)水平。用纯化的大鼠抗Ⅱ型胶原(ColⅡ)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入抗Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb),再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠抗Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)浓度。标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。大鼠抗Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)ELISA试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。大鼠抗Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)ELISA试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-05 10:00
产品样册
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人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡ Ab)ELISA试剂盒使用说明书
- 人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)试剂盒(ELISA)使用说明书l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)的含量。l有效期:6个月l保存条件:2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断实验原理试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)捕获抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡAb)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样本处理及要求1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。7.建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无备注:1.标准品浓度依次为:64、32、16、8、4、0ng/mL2.经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Zda标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。试剂盒性能1.检测范围:2ng/mL64ng/mL。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于0.1ng/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。问题解答若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:问题可能原因解决方案标准曲线差吸取及洗涤不充分充分的吸取及洗涤移液不极ng确检查和校正移液器精密度低洗涤不充分按说明书要求充分洗涤和浸泡混匀不充分和吸取试剂不足充分混匀和吸取试剂重复利用吸头、容器和覆膜使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜加样不极ng确检查和校正移液器O.D值低每孔加的试剂量不极ng确校正移液器,极ng确加入试剂温育时间不正确保证充足的温育时间温育温度不正确试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度酶标记物或底物失效通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查没有加入终止液按照说明书实验操作步骤加入终止液超出读数时间读数在说明书推荐的读数时间内读数样本值不正确的样本储存方式正确储存样本,使用新鲜样本进行实验不正确的样本收集和处理方法采取正确的样本收集和处理方法待测物质在样本中含量低使用新鲜样本,重复实验[详细]
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2024-10-03 12:55
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白喉抗体(Diphtheria Ab)ELISA试剂盒说明书
- 白喉抗体(DiphtheriaAb)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液白喉抗体(DiphtheriaAb)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。白喉抗体(DiphtheriaAb)ELISA试剂盒说明书自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。白喉抗体(DiphtheriaAb)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。白喉抗体(DiphtheriaAb)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。白喉抗体(DiphtheriaAb)ELISA试剂盒说明书操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。白喉抗体(DiphtheriaAb)ELISA试剂盒说明书性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。白喉抗体(DiphtheriaAb)ELISA试剂盒说明书结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlESF人红细胞刺激因子规格:48T/96TsmActinin-α人横纹肌辅肌动蛋白α规格:48T/96TMLZE人黑素瘤衍生亮氨酸拉链额外核因子规格:48T/96TMCAb人黑色素细胞抗体规格:48T/96TMSH人黑色素细胞刺激素规格:48T/96TMMSAM人黑色素瘤转移表面黏附分子规格:48T/96TMAGE人黑色素瘤相关抗原规格:48T/96TMAGE人黑色素瘤相关抗原规格:48T/96TMART/Melan-A人黑色素瘤标记物规格:48T/96TNF-κBp65人核因子-κB亚基p65亲和肽规格:48T/96TRANKL人核因子κB受体活化因子配基规格:48T/96TRNASE人核糖核酸酶规格:48T/96TAg-NORs人核仁形成区嗜银蛋白规格:48T/96TNMP-22人核基质蛋白22规格:48T/96TLPO人过氧化脂质/乳过氧化物酶规格:48T/96TPPAR-γ人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ规格:48T/96TPPARs人过氧化物酶体增殖因子活化受体规格:48T/96TPPAR-α人过氧化物酶体增殖物激活受体α规格:48T/96TC4a人过敏毒素/补体片断4规格:48T/96TFDA人果糖1,6二磷酸醛缩酶规格:48T/96TP-CK人广谱细胞角蛋白规格:48T/96TCasp-9人胱天蛋白酶9规格:48T/96TCasp-3人胱天蛋白酶3规格:48T/96TCasp-12人胱天蛋白酶12规格:48T/96Toligomeric人寡聚蛋白规格:48T/96TON人骨粘连蛋白规格:48T/96TBMP-6人骨形成蛋白6规格:48T/96TBMPs人骨形成蛋白规格:48T/96TBSP人骨涎蛋白规格:48T/96TCTX-2人骨退化特异标志物规格:48T/96TALP-B人骨特异性碱性磷酸酶B规格:48T/96TMPIF-1/CCL23人YZ因子1规格:48T/96TOPN人骨桥素规格:48T/96TCr人骨胶原交联规格:48T/96TBALP人骨碱性磷酸酶规格:48T/96TOT/BGP人骨钙素/骨谷氨酸蛋白规格:48T/96TBMPR-Ⅱ人骨成型蛋白受体Ⅱ规格:48T/96TBMPR-1A人骨成型蛋白受体1A规格:48T/96TBMP-7人骨成型蛋白7规格:48T/96TBMP-4人骨成型蛋白4规格:48T/96TBMP-2人骨成型蛋白2规格:48T/96TOPGL人骨保护素配体规格:48T/96TOPG人骨保护素规格:48T/96TGSTpi人谷胱甘肽硫转移酶pi基因规格:48T/96TGSH-Px人谷胱甘肽过氧化酶规格:48T/96TGSH人谷胱甘肽规格:48T/96TGAD-Ab人谷氨酸脱羧酶自身抗体规格:48T/96TGAD人谷氨酸脱羧酶规格:48T/96TGDH人谷氨酸脱氢酶规格:48T/96TOFQ/N人孤腓肽规格:48T/96TLebtospira人钩端螺旋体IgM规格:48T/96TLebtospira人钩端螺旋体IgG规格:48T/96THGV-IgM人庚型肝炎病毒IgM规格:48T/96THGV-IgG人庚型肝炎病毒IgG规格:48T/96TT人睾酮规格:48T/96THVA人高香草酸规格:48T/96TMHB人高铁血红蛋白规格:48T/96Tu-T4人高敏甲状腺素规格:48T/96THDL-C人高密度脂蛋白胆固醇规格:48T/96THDL人高密度脂蛋白规格:48T/96TGP-73人高尔基蛋白73规格:48T/96THGF人肝细胞生长因子规格:48T/96THB-EGF人肝素结合性表皮生长因子规格:48T/96THCⅡ人肝素辅因子Ⅱ规格:48T/96TMR人甘露糖受体规格:48T/96TMBLR人甘露糖凝集素受体规格:48T/96TMBP/MBL人甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素规格:48T/96TMannose人甘露糖规格:48T/96TCG人甘胆酸规格:48T/96TSCFR人干细胞因子受体规格:48T/96TSCF/MGF人干细胞因子/肥大细胞生长因子规格:48T/96TIP-10/CXCL10人干扰素诱导蛋白10规格:48T/96TIRF人干扰素调节因子规格:48T/96TCNR-1人钙粘蛋白相关的神经受体1规格:48T/96TCRT人钙网蛋白规格:48T/96Tcalnexin人钙联蛋白规格:48T/96TVGCC人钙离子通道抗体规格:48T/96TCR人钙结合蛋白规格:48T/96TCAM人钙调素规格:48T/96TCaN人钙调磷酸酶规格:48T/96TCaN人钙调磷酸酶规格:48T/96TCALD人钙调结合蛋白规格:48T/96TCALD人钙调结合蛋白规格:48T/96Thistatin5人富组蛋白规格:48T/96TPNP人副肿瘤性天疱疮抗体规格:48T/96TRPA-70人复制蛋白A规格:48T/96TCPSA人复合前列腺特异性抗原规格:48T/96TBA人封闭抗体规格:48T/96TSLPI人分泌性白细胞蛋白酶YZ因子规格:48T/96TSIgA人分泌型免疫球蛋白A规格:48T/96TMP-Ab人肺炎支原体抗体规格:48T/96TCpn-Ab人肺炎衣原体抗体规格:48T/96TPARC/CCL18人肺部活化调节趋化因子规格:48T/96TSP-D人肺表面活性物质相关蛋白D规格:48T/96TSP-C人肺表面活性物质相关蛋白C规格:48T/96TSP-B人肺表面活性物质相关蛋白B规格:48T/96TSP-A人肺表面活性物质相关蛋白A规格:48T/96T人肺癌标志物ELISAKit,48T/96T人肺癌标志物ELISAKit,48T/96T规格:48T/96TDR-70TM人肺癌标志物DR-70规格:48T/96TLTA人非小细胞肺癌抗原规格:48T/96TNNE人非神经元性烯醇化酶规格:48T/96TNON人非甲基化寡核苷酸规格:48T/96TAhR人芳香烃受体规格:48T/96TE1/UBAE人泛素激活酶规格:48T/96TUb人泛素蛋白规格:48T/96TrT3人反三碘甲状腺原氨酸规格:48T/96TDNM2人发动蛋白规格:48T/96TDPPⅣ人二肽基肽酶Ⅳ规格:48T/96T人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4规格:48T/96TSLC/CCL21人二级淋巴组织趋化因子规格:48T/96TDAO人二胺氧化酶规格:48T/96TCA人儿茶酚胺规格:48T/96TPMNElastase人多形核白细胞弹性蛋白酶规格:48T/96TPMNElastase人多形核白细胞弹性蛋白酶规格:48T/96TPTN人多效生长因子规格:48T/96TPTN人多效生长因子规格:48T/96Tpoly-IgR人多免疫球蛋白受体规格:48T/96TPHSA人多聚血清蛋白规格:48T/96TPARP人多聚ADP核糖聚合酶规格:48T/96TDDC人多巴胺脱羧酶规格:48T/96TDBH人多巴胺-β羟化酶规格:48T/96TD2R人多巴胺D2受体规格:48T/96TD1R人多巴胺D1受体规格:48T/96TD1R人多巴胺D1受体规格:48T/96TDA人多巴胺规格:48T/96TPON人对氧磷酶规格:48T/96TPABA人对氨基苯甲酸规格:48T/96TTE人端粒酶规格:48T/96TTSST-1人毒性休克综合征毒素1规格:48T/96THDVIgM人丁型肝炎IgM规格:48T/96THDVIgG人丁型肝炎IgG规格:48T/96TAZT人叠氮胸苷规格:48T/96TASK-1人凋亡信号调节激酶I规格:48T/96TFASL人凋亡相关因子配体规格:48T/96TFAS/CD95人凋亡相关因子规格:48T/96TβAPP人淀粉样前体蛋白规格:48T/96TAmylase人淀粉酶规格:48T/96TETFB人电子转移黄素蛋白β肽规格:48T/96TFⅧAg人第八因子相关抗原规格:48T/96TResistin人抵抗素规格:48T/96THIF-1α人低氧诱导因子1α规格:48T/96TLRP-6人低密度脂蛋白受体相关蛋白6规格:48T/96TLDLR人低密度脂蛋白受体规格:48T/96TLDL-IC人低密度脂蛋白免疫复合物规格:48T/96TLDL人低密度脂蛋白规格:48T/96TLMP7/PSMB9人低分子质量蛋白7规格:48T/96TLMWH人低分子肝素规格:48T/96TNGF人的神经生长因子规格:48T/96T人的牛血清白蛋白残留检测ELISAKit,48T/96T人的牛血清白蛋白残留检测ELISAKit,48T/96T规格:48T/96TConA人刀豆素A规格:48T/96TPLP人蛋白脂质蛋白抗体规格:48T/96TPR3-ANCA人蛋白酶3特异性抗中性粒细胞胞质抗体规格:48T/96TPPP1R1A人蛋白磷酸酶1调控/YZ因子亚基1A规格:48T/96TPP人蛋白磷酸酶规格:48T/96TPTP/PTPase/CD148人蛋白酪氨酸磷酸酶规格:48T/96TPTP/PTPase/CD148人蛋白酪氨酸磷酸酶规格:48T/96TPTK/CD115人蛋白酪氨酸激酶规格:48T/96TPTK/CD115人蛋白酪氨酸激酶规格:48T/96TPKC人蛋白激酶C规格:48T/96TPKB人蛋白激酶B规格:48T/96TPKA人蛋白激酶A规格:48T/96TPDI人蛋白二硫化物异构酶前体规格:48T/96TPDIA3人蛋白二硫化物异构酶A3规格:48T/96TProteinZ人蛋白Z规格:48T/96TProteinS人蛋白S规格:48T/96T[详细]
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2018-10-09 10:00
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人白喉抗体(Diphtheria Ab)ELISA试剂盒
- 人白喉抗体(DiphtheriaAb)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人白喉抗体(DiphtheriaAb)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白喉抗体(DiphtheriaAb)水平。用纯化的人白喉抗体(DiphtheriaAb)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白喉抗体(DiphtheriaAb),再与HRP标记的白喉抗体(DiphtheriaAb)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白喉抗体(DiphtheriaAb)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白喉抗体(DiphtheriaAb)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-10-19 10:00
产品样册
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乙脑IgG抗体(JE-IgG Ab)Elisa试剂盒
- 乙脑IgG抗体(JE-IgG Ab)Elisa试剂盒[详细]
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2024-09-18 18:10
操作手册
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人NOGO-A抗体(Nogo-A Ab)ELISA试剂盒
- 人NOGO-A抗体(Nogo-A Ab)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 00:26
期刊论文
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人旋毛虫抗体(Trichinella Ab)ELISA试剂盒
- 人旋毛虫抗体(Trichinella Ab)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 01:06
实验操作
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人破伤风抗体(Tetanus Ab)ELISA试剂盒
- 人破伤风抗体(Tetanus Ab)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-30 13:57
产品样册
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人红细胞生成素受体抗体(EPOR Ab)试剂盒操作说明
- 本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T3.5ng/ml-120ng/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中红细胞生成素受体抗体(EPORAb)含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人红细胞生成素受体抗体(EPORAb)水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入红细胞生成素受体抗体(EPORAb),再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的红细胞生成素受体抗体(EPORAb)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人红细胞生成素受体抗体(EPORAb)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(200ng/ml)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1、标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。100ng/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液50ng/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液25ng/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液12.5ng/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液6.25ng/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7、温育:操作同3。8、洗涤:操作同5。9、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。[详细]
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2018-10-03 10:00
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小鼠Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)试剂盒使用方法
- 检测范围:96T3μg/L-80μg/L使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)水平。用纯化的小鼠Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ),再与HRP标记的Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(160μg/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]
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2018-09-19 10:01
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小鼠Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)试剂盒使用方法
- 检测范围:96T0.5μg/L-13μg/L使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)水平。用纯化的小鼠Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ),再与HRP标记的Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(24μg/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]
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2018-10-03 10:00
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人I型胶原蛋白elisa试剂盒使用方法
- 本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T1.5μg/L-40μg/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)水平。用纯化的人I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入I型胶原蛋白(Col-Ⅰ),再与HRP标记的I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)浓度。[详细]
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2018-10-01 10:00
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鱼I型胶原蛋白(ColⅠ)ELISA试剂盒
- 鱼I型胶原蛋白(ColⅠ)ELISA试剂盒l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中鱼I型胶原蛋白(ColⅠ)的含量。l有效期:6个月l保存条件:2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被鱼I型胶原蛋白(ColⅠ)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的鱼I型胶原蛋白(ColⅠ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样本处理及要求1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。7.建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无备注:1.标准品浓度依次为:40、20、10、5、2.5、0ng/mL2.经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Zda标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。试剂盒性能1.检测范围:1.25ng/mL40ng/mL。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于0.1ng/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。问题解答若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:问题可能原因解决方案标准曲线差吸取及洗涤不充分充分的吸取及洗涤移液不极ng确检查和校正移液器精密度低洗涤不充分按说明书要求充分洗涤和浸泡混匀不充分和吸取试剂不足充分混匀和吸取试剂重复利用吸头、容器和覆膜使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜加样不极ng确检查和校正移液器O.D值低每孔加的试剂量不极ng确校正移液器,极ng确加入试剂温育时间不正确保证充足的温育时间温育温度不正确试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度酶标记物或底物失效通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查没有加入终止液按照说明书实验操作步骤加入终止液超出读数时间读数在说明书推荐的读数时间内读数样本值不正确的样本储存方式正确储存样本,使用新鲜样本进行实验不正确的样本收集和处理方法采取正确的样本收集和处理方法待测物质在样本中含量低使用新鲜样本,重复实验[详细]
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2018-11-15 10:02
产品样册
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大鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA试剂盒
- 大鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-10 00:00
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