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大鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒
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2024-09-17 01:55 143阅读次数
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大鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒
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大鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒
- 大鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-17 01:55
安装说明
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人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)检测试剂盒
- 人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)检测试剂盒[详细]
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2015-03-09 00:00
操作手册
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小鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)酶联免疫分析试剂盒
- 小鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)酶联免疫分析试剂盒本试剂盒仅供研究使用检测范围:1.56pg/ml-100pg/mlZdi检测限:0.39pg/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠VEGF-C,且与其他相关蛋白无交叉反应。有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中VEGF-C含量。说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗VEGF-C抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗VEGF-C抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的VEGF-C呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assayplate):一块(96孔)。2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。3.样品稀释液(SampleDiluent):1×20ml/瓶。4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibodyDiluent):1×10ml/瓶。5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidinDiluent):1×10ml/瓶。6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8.底物溶液(TMBSubstrate):1×10ml/瓶。9.浓洗涤液(WashBuffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。10.终止液(StopSolution):1×10ml/瓶(2NH2SO4)。需要而未提供的试剂和器材1.标准规格酶标仪2.高速离心机3.电热恒温培养箱4.干净的试管和Eppendof管5.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,**用多通道移液器6.蒸馏水,容量瓶等标本的采集及保存1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。Z后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释100pg/ml,50pg/ml,25pg/ml,12.5pg/ml,6.25pg/ml,3.12pg/ml,1.56pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0pg/ml,临用前15分钟内配制。如配制50pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)100pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。生物素标记抗体的稀释原则:临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。操作步骤实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,200μl/每孔,甩干。4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,200μl/每孔,甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔显色不明显,即可终止)。7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后15分钟以内进行检测。注:1.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。2.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是Z后加底物溶液及2NH2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。3.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。4.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液、或辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。5.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。洗板方法手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。计算以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。2.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。3.一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。5.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请Z后乘以稀释倍数。6.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。7.底物请避光保存。8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。[详细]
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2018-11-05 10:00
产品样册
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人血管内皮生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒
- 人血管内皮生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒[详细]
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2015-10-13 00:00
其它
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大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
- 大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 18:08
产品样册
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大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒
- 大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-11 00:00
课件
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大鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒
- 大鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-20 13:34
课件
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人血管内皮生长因子C(VEGF-C)酶联免疫分析
- ELATS试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血管内皮生长因子C(VEGF-C)水平。用纯化的人血管内皮生长因子C(VEGF-C)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血管内皮生长因子C(VEGF-C),再与HRP标记的血管内皮生长因子C(VEGF-C)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的血管内皮生长因子C(VEGF-C)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人血管内皮生长因子C(VEGF-C)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(480pg/ml)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个ELATS试剂盒标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。ELATS试剂盒操作步骤标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。E-(Hu)(03)-04402人柯萨奇病毒(CoxV)抗体(IgG)elisa试剂盒,英文名:Coxsackievirus(CoxV)antibody(IgG)ELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04403人抗组织转谷氨酰铵酶(tTG)抗体(IgG)elisa试剂盒,英文名:Anti-tissuetransglutaminase(tTG)antibody(IgG)ELISAkit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04404人抗组织转谷氨酰铵酶(tTG)抗体(IgA)elisa试剂盒,英文名:Anti-tissuetransglutaminase(tTG)antibody(IgA)ELISAkit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04405人抗着丝点抗体(ACA)elisa试剂盒,英文名:Anti-centromereAntibody,ACAELISAkit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04406人抗转谷氨酰铵酶抗体(IgG)elisa试剂盒,英文名:Transglutaminase6antibodyIgGELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04407人抗转谷氨酰铵酶抗体(IgA)elisa试剂盒,英文名:Transglutaminase6antibodyIgAELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04408人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)IgMelisa试剂盒,英文名:anti-neutrophilcytoplasmicantibody,cANCAIgMELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04409人抗中性粒/ZX体抗体(ACA)elisa试剂盒,英文名:anti-centrolandcentrosomeantibody,ACAELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04410人抗增殖细胞核抗原(PCNA)抗体elisa试剂盒,英文名:proliferatingcellnuclearantigen(PCNA)antibodyELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04411人抗YZ素B抗体(IgG)elisa试剂盒,英文名:anti-InhibinBantibodyIgGElisakit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04412人抗异质型核糖核蛋白抗体/抗RA33抗体(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)elisa试剂盒,英文名:anti-hnRNP-ab/anti-RA33-abELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04413人抗胰岛素受体抗体(AIRA)elisa试剂盒,英文名:anti-insulinreceptorantibody,AIRAELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04414人抗血小板抗体IgM(PA-IgM)elisa试剂盒,英文名:plateletantibodiesIgM,PA-IgMELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04415人抗血小板抗体IgG(PA-IgG)elisa试剂盒,英文名:plateletantibodiesIgG(PA-IgG)ELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04416人抗血小板抗体IgA(PA-IgA)elisa试剂盒,英文名:plateletantibodiesIgA,PA-IgAELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04417人抗血小板抗体(anti-PAAb)elisa试剂盒(半定量),英文名:anti-PAAbELISAKit(Semi-quantitative),规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04418人抗血小板抗体(anti-PAAb)elisa试剂盒,英文名:anti-plateletantibody,anti-PAAbELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04419人抗胸腺细胞球蛋白(ATG)elisa试剂盒,英文名:anti-thymocyteglobulin,ATGELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04420人抗信号识别颗粒54kDa蛋白(SRP54)抗体elisa试剂盒,英文名:antisignalrecognitionparticle54kDaprotein(SRP54)antibodyELISAkit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04421人抗心肌β1受体(MB1R)自身抗体elisa试剂盒,英文名:myocardialβ1receptor(MB1R)autoantibodyELISAkit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04422人抗小鼠抗体(HAMA)elisa试剂盒,英文名:anti-mouseantibody,HAMAELISAkit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04423人抗小脑(CE)自身抗体elisa试剂盒,英文名:anticerebellum(CE)autoantibodyELISAkit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04424人抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗体elisa试剂盒,英文名:smallnuclearribonucleoprotein(snRNP/Sm)antibodyELISAkit,规格:48T/96TE-(Hu)(03)-04425人抗线粒体抗体M2亚型(AMA-M2)elisa试剂盒,英文名:anti-mitochondrialantibodyM2subtype,AMA-M2ELISAkit,规格:48T/96T[详细]
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2018-09-14 10:00
产品样册
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大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)检测试剂盒
- 大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)检测试剂盒[详细]
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2014-09-29 00:00
课件
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人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
- 人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-05 00:00
其它
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人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
- 人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-25 00:10
选购指南
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小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
- 小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-20 03:55
专利
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鸡血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
- 鸡血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-29 13:46
标准
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大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)elisa试剂盒使用说明书
- 上海一基实业有限公司主要生产经营标准物质/标准样品,实验室耗材等。同时代理美国、日本、英国,德国等国家的标准物质、标准样品。本着标准**、质量**,服务**,信誉**的宗旨,为客户提供售前.售中.售后的优质服务。我公司全体工作人员真诚的欢迎国内外客户的大力支持与合作。业务范围:a,销售中检所、自制标准品/对照品及进口试剂b,承接克级至公斤级高纯度单体的定制业务c,承接中药单体/标准品新品研发业务[详细]
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2018-09-25 10:08
产品样册
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大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)elisa试剂盒使用说明书
- 大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)elisa试剂盒使用说明书[详细]
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2024-10-08 05:25
安装说明
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大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒
- 大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-11 00:00
专利
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人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒
- 人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒[详细]
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2015-10-13 00:00
报价单
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人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒
- 人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-15 17:55
专利
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大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠sEPCR单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的sEPCR与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠sEPCR,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,sEPCR浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中sEPCR浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清测定前用标本稀释液作1:5至10倍稀释。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成40ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入40ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应sEPCR含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的sEPCR检测浓度小于30pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠sEPCR。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
产品样册
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血管内皮细胞生长因子试剂盒检测说明书
- 血管内皮细胞生长因子试剂盒检测说明书试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T5pg/ml-160pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中血管内皮细胞生长因子(VEGF)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平。用纯化的大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血管内皮细胞生长因子(VEGF),再与HRP标记的血管内皮细胞生长因子(VEGF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的血管内皮细胞生长因子(VEGF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(320pg/ml)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。160pg/ml5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液80pg/ml4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液40pg/ml3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液20pg/ml2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液10pg/ml1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2024-10-10 03:42
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