组织谷氨酰胺酶活性光度法定量检测试剂盒产品说明书

本文由 上海科学仪器有限公司 整理汇编

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• 组织谷氨酰胺酶活性光度法定量检测试剂盒产品说明书

  主要用途组织谷氨酰胺酶（glutaminase）活性光度法定量检测试剂是一种旨在通过谷氨酰胺酶和谷氨酸脱氢酶的酶偶联反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）还原后吸光峰值的，即采用光度法来测定组织裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解悬液样品（动物、人体、昆虫等）谷氨酰胺酶的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景谷氨酰胺酶（glutaminase；EC3.5.1.2）是一种氨基酸水解酶（amidohydrolase），将谷氨酰胺脱氨基（deaminating）转化为谷氨酸。其同工酶具有组织特异性：其功能在肝细胞中产生的氨，用于合成尿素；在肾小管上皮细胞中产生的氨通过氨离子分泌，调节肾的酸碱平衡；同时在胶质细胞（glialcell）和肠细胞中也有表达。谷氨酰胺酶在药物和食品工业方面应用广泛，例如调味品的生产和白血病ZL的药物等。基于底物谷氨酰胺在谷氨酰胺酶酶的作用下，转化为谷氨酸和氨气，进而在谷氨酸脱氢酶的催化下，伴随着氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidizednicotinamideadeninedinucleotide；NAD＋）转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH），产生的吸光峰值的变化（340nm波长），来定量分析谷氨酰胺酶的活性。其酶偶联反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 组织谷氨酰胺酶活性光度法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  组织谷氨酰胺酶活性光度法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-05-28 00:00

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• 细胞谷氨酰胺酶活性光度法定量检测试剂盒

  主要用途细胞谷氨酰胺酶（glutaminase）活性光度法定量检测试剂是一种旨在通过谷氨酰胺酶和谷氨酸脱氢酶的酶偶联反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）还原后吸光峰值的，即采用光度法来测定细胞裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解悬液样品（动物、人体、昆虫等）谷氨酰胺酶的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景谷氨酰胺酶（glutaminase；EC3.5.1.2）是一种氨基酸水解酶（amidohydrolase），将谷氨酰胺脱氨基（deaminating）转化为谷氨酸。其同工酶具有组织特异性：其功能在肝细胞中产生的氨，用于合成尿素；在肾小管上皮细胞中产生的氨通过氨离子分泌，调节肾的酸碱平衡；同时在胶质细胞（glialcell）和肠细胞中也有表达。谷氨酰胺酶在药物和食品工业方面应用广泛，例如调味品的生产和白血病ZL的药物等。基于底物谷氨酰胺在谷氨酰胺酶酶的作用下，转化为谷氨酸和氨气，进而在谷氨酸脱氢酶的催化下，伴随着氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidizednicotinamideadeninedinucleotide；NAD＋）转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH），产生的吸光峰值的变化（340nm波长），来定量分析谷氨酰胺酶的活性。其酶偶联反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细胞谷氨酰胺酶活性光度法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  细胞谷氨酰胺酶活性光度法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-01-15 00:00

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• 组织乙酰辅酶A羧化酶活性光度法定量 检测试剂盒产品说明书

  主要用途组织乙酰辅酶A羧化酶（ACETYL-COACARBOXYLASE）活性光度法定量检测试剂是一种旨在通过底物乙酰辅酶A和碳酸氢盐受到乙酰辅酶A羧化酶的催化反应后，进而由丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环法反应系统，测定产生ADP过程中，伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的氧化反应，即采用光度法测定其氧化后峰值的变化，以分析组织裂解样品中乙酰辅酶A羧化酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解萃取液样品（动物、人体）、部分或完全纯化酶样品中乙酰辅酶A羧化酶活性的定量检测，以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，高度敏感。技术背景乙酰辅酶A羧化酶（AcetylCoACarboxylase；ACC；EC6.4.1.2），又称为乙酰辅酶A碳酸氢盐连接酶（AcetylCoA：bicarbonateligase-ATP），是ATP依赖性含生物素酶，参与脂肪酸生物合成。哺乳动物乙酰辅酶A羧化酶单体分子量为225－250Kd，含有许多磷酸化位点，以及1个生物素辅基位点、2个催化位点和1个异构（allosteric）位点。乙酰辅酶A羧化酶催化生物素辅基（prostheticgroup）的羧基化反应，然后将生物素上的羧基转移到辅酶A上，产生丙二酰辅酶A（malonylCoA），成为长链脂肪酸合成前的关键步骤。AMP活化蛋白激酶（AMP-ActivatedKinase；AMPK）调节该酶的活性，而十四烷基氧糠酸（5-(tetradecyloxy)-2-furoicacid；TOFA）YZ该酶的活性。基于底物乙酰辅酶A（acetylCoA）和碳酸氢盐，在ATP的存在下，受到乙酰辅酶A羧化酶的催化，获得产物丙二酰辅酶A和ADP，进而通过丙酮酸激酶（pyruvatekinase；PK）和乳酸脱氢酶（lactatedehydrogenase；LDH）反应系统中，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidizednicotinamideadeninedinucleotide；NAD），其吸光峰值的变化（340nm），来定量分析乙酰辅酶A羧化酶的活性。其反应方式为：AcetylCoACarboxylaseAcetylCo-A+ATP+HCO3→MalonylCoA+ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+（高吸收峰）（低吸收峰）产品内容清理液（ReagentA）60毫升裂解液（ReagentB）10毫升缓冲液（ReagentC）20毫升酶促液（ReagentD）2毫升反应液（ReagentE）2毫升底物液（ReagentF）2毫升阴性液（ReagentG）500微升产品说明书1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里，避免反复冻融；有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品保存的容器15毫升锥形离心管：用于样品处理的容器DOUNCE匀浆器：用于裂解组织（微型）台式离心机：用于样品预处理1厘米光径比色皿或96孔板：用于光度分析操作的容器分光光度仪或酶标仪：用于样品光度分析[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 组织乙醛脱氢酶2活性光度法定量检测试剂盒

  主要用途组织乙醛脱氢酶2活性光度法定量检测试剂盒是一种旨在使用乙醛脱氢酶2敏感性YZ剂，通过检测反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）还原后峰值的，即采用光度法来测定组织裂解萃取液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解悬液样品（动物、人体等）乙醛脱氢酶2的特异活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景乙醛脱氢酶（aldehydedehydrogenase；ALDH；EC1.2.1.3），又称为乙醛NAD氧化还原酶（aldehydeNAD-oxidoreductase）是一类NAD（P）依赖性酶，催化广谱的外源性或内源性脂肪族和芳香族乙醛类底物氧化，包括乙醇、氨基酸、生物胺（biogenicamine）、维生素、固醇类、脂质、药物和环境分子等代谢产物。乙醛脱氢酶是乙醇在体内分解代谢过程中两种主要酶之一。乙醛脱氢酶把乙醛中的两个氢原子脱掉，使乙醛转化为乙酸，生成的乙酸进入脂肪酸氧化途径，Z终被氧化成二氧化碳和水。乙醛脱氢酶主要有两种同工酶：ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中，ALDH2存在于线粒体中，ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脱氢酶的缺少，使酒精不能被完全分解为水和二氧化碳，而是以乙醛继续留在体内，使人喝酒后产生恶心欲吐、昏迷不适等醉酒症状。基于来自于乙醇代谢产生的乙醛（acetaldehyde），在7-羟基-3-（4-羟苯基）-异黄酮-7-糖苷（Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside；Daidzin）存在与否的情况下，由乙醛脱氢酶2的催化作用，转化为乙酸（aceticacid）产物后，通过测定反应体系中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide；NAD）转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）的变化（340nm波长），来定量分析乙醛脱氢酶2的特异活性。乙醛脱氢酶2反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 组织乙醛脱氢酶2活性光度法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  组织乙醛脱氢酶2活性光度法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2014-12-30 00:00

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• 组织酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量检测试剂盒

  主要用途组织酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过酪氨酸酶反应系统中底物酪氨酸氧化后，产生多巴色素，呈现吸光峰值的变化，即采用比色法来测定组织裂解悬液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体和动物组织，尤其是皮肤、眼睛和黑色素瘤组织裂解悬液样品中酪氨酸酶的活性检测，以及YZ剂筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景酪氨酸酶（tyrosinase；EC1.14.18.1）是一种单酚单加氧酶（monophenolmonooxygenase），又称为单酚酶（monophenolase）或单酚二羟基苯丙氨酸：O2氧化还原酶（monophenoldihydroxyphenylalanin：O2oxidoreductase），具有双功能的含铜糖蛋白，广泛存在于植物、酵母和动物组织中，其蛋白结构、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人体酪氨酸酶是一个跨膜蛋白，而催化结构域在黑色素细胞（melanocyte）或色素细胞的黑色素器（melanosome）里。酪氨酸酶通过催化L-酪氨酸（L-tyrosine）等的o-羟基化（o-hydroxylation）反应变成L-多巴（L-dopamine），进而氧化产生黑色素底物多巴醌（dopaquinone），从而由多巴色素（dopachrome）转化为黑色素（melanin）中的真黑素（eumelanin），以及其它色素，包括毛发和眼睛色素。紫外线可以激活酪氨酸酶活性，严重时，会引起色素沉着（hyperpigmentation）。酪氨酸酶基因突变将导致I型眼皮肤白化病（oculocutaneousalbinism）。酪氨酸酶YZ剂成为增白化妆品的重要元素。基于底物酪氨酸，在酪氨酸酶的催化下，产生多巴色素，通过其吸光值的变化（475nm波长），来定量测定酪氨酸酶的活性。其反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 组织乙酰辅酶A羧化酶（ACETYL-COA CARBOXYLASE）活性光度法定量 检测试剂盒产品说明书（中文版）

  组织乙酰辅酶A羧化酶（ACETYL-COA CARBOXYLASE）活性光度法定量 检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2014-12-23 00:00

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• Ca-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

  Ca-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，机体在缺氧及等状态下，ATP酶受到损伤，活力下降。ATP酶活力的大小是各种细胞能量代谢及功能有无损伤的重要指标。本测试盒可测钠钾ATP酶、钙镁ATP酶的活性。样品为各种组织及红细胞等，本法的Zda特点是样品前处理不需要高速离心机，方法简便、快速。产品内容缓冲液（ReagentA）6毫升反应液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升阴性液（ReagentD）6毫升标准品（reagentE）6微升产品说明书1份保存方式保存反应液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于反应液配制的容器微型台式离心机：用于样品制备比色皿或酶标板：用于比色的容器分光光度仪：用于比色分析酶标仪：用于微量样品比色分析实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的反应液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后进行下列操作。样品准备选择一：血浆样品1．准备好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为5000g4．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分（注意：避免触碰白色液体层）5．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存6．（选择步骤）移取50微升进行蛋白定量测定选择二：血清样品1．准备好不含抗凝剂的储存管2．抽取2毫升血液，置于储存管里3．室温下，静置30分钟，直至血液凝结4．放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为5000g5．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分（注意：避免触碰白色液体层）6．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存7．（选择步骤）移取50微升进行蛋白定量测定选择三：组织样本准确称取组织重量，按照重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10分钟，去上清液待测。二、测定准备1.准备好上述待测样品，置于冰槽里2.设定好分光光度仪（温度为37℃）：波长440nm三、样本测定1．在96孔酶标板上做好相应标记：背景对照，标准品孔和样品孔2．分别移取50微升缓冲液（ReagentA）到相应孔中3．设定标准品孔(加入50微升标准品），样本孔(加入50微升样本)阴性液孔(加入50微升阴性液（ReagentD）4．分别加入50微升反应液（ReagentB）5．轻轻摇动96孔酶标板6．在37℃温度下孵育2分钟7．放进酶标仪，置零8．取出酶标板，分别加入50微升底物液（ReagentC）9．轻轻摇动酶标板10．即刻放进酶标仪检测，包括（0分钟初始读数和5分钟读数）四，样本计算样本活性=样本OD值/标准OD值*标品浓度[详细]

  2024-09-29 05:34

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• 人组织转谷氨酰胺酶(TGM2)检测试剂盒

  人组织转谷氨酰胺酶(TGM2)检测试剂盒[详细]

  2016-04-25 00:00

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• 组织乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  组织乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-05-28 00:00

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• 组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书...

  组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒是一种旨在使用乙醛脱氢酶2敏感性YZ剂，通过检测反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）还原后峰值的，即采用比色法来测定组织裂解萃取液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解悬液样品（动物、人体等）乙醛脱氢酶2的特异活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景乙醛脱氢酶（aldehydedehydrogenase；ALDH；EC1.2.1.3），又称为乙醛NAD氧化还原酶（aldehydeNAD-oxidoreductase）是一类NAD（P）依赖性酶，催化广谱的外源性或内源性脂肪族和芳香族乙醛类底物氧化，包括乙醇、氨基酸、生物胺（biogenicamine）、维生素、固醇类、脂质、药物和环境分子等代谢产物。乙醛脱氢酶是乙醇在体内分解代谢过程中两种主要酶之一。乙醛脱氢酶把乙醛中的两个氢原子脱掉，使乙醛转化为乙酸，生成的乙酸进入脂肪酸氧化途径，Z终被氧化成二氧化碳和水。乙醛脱氢酶主要有两种同工酶：ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中，ALDH2存在于线粒体中，ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脱氢酶的缺少，使酒精不能被完全分解为水和二氧化碳，而是以乙醛继续留在体内，使人喝酒后产生恶心欲吐、昏迷不适等醉酒症状。基于来自于乙醇代谢产生的乙醛（acetaldehyde），在7-羟基-3-（4-羟苯基）-异黄酮-7-糖苷（Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside；Daidzin）存在与否的情况下，由乙醛脱氢酶2的催化作用，转化为乙酸（aceticacid）产物后，通过测定反应体系中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide；NAD）转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）的变化（340nm波长），来定量分析乙醛脱氢酶2的特异活性。乙醛脱氢酶2反应系统为：产品内容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升缓冲液（ReagentC）毫升反应液（ReagentD）毫升底物液（ReagentE）毫升阴性液（ReagentF）毫升专性液（ReagentG）微升产品说明书1份保存方式保存缓冲液（ReagentC）、反应液（ReagentD）、底物液（ReagentE）和专性液（ReagentG）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；反应液（ReagentD）和底物液（ReagentE）避免光照；有效保证6月[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 组织基质金属蛋白酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

  主要用途组织基质金属蛋白酶2（MMP-2）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过含硫多肽底物以及特定YZ剂存在与否的情况下，受到MMP2的水解，释放出巯基，进而使用Ellman试剂，产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光峰值的变化，即采用比色法来测定组织裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解萃取液样品（动物、人体）、部分或完全纯化酶样品中基质金属蛋白酶2的特异活性定量检测，以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，安全可靠。技术背景基质金属蛋白酶（Matrixmetalloproteinases；MMPs）是一类结构高度同源的分泌型或膜相关性锌内肽酶的总称，因含有金属（锌、钙）离子而得名。其功能在于分解细胞外基质成分。迄今为止发现的MMPs至少有28种，几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质（extracellularmatrix）成分，同时参与胚胎发育、形态形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、组织再吸收（tissueresorption）、疾病发生，例如关节炎、癌细胞浸入转移等。根据降解的底物不同可将MMPs分为4大类：（1）胶原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和蛋白多糖；（2）明胶酶（Ⅳ型胶原酶）：MMP2、MMP9，又称明胶酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和弹性纤维；（3）基质溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12，主要作用于纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹力纤维、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ胶原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金属蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明胶、Ⅳ型胶原、MMP2。体内绝大多数细胞并不储备MMPs，当需要MMPs的信号传递到细胞后才临时合成，合成的MMPs以无活性的酶原（proenzyme）形式分泌到细胞外，随后被多种蛋白酶和非蛋白酶水解以及热处理激活，一种激活的MMPs可激活另一种MMPs，形成瀑布效应。基质金属蛋白酶-2，又称明胶酶A（gelatinase-A）或IV型胶原酶（typeIVcollagenase），其前体分子量为72kDa，激活后分子量为62和56kDa。它在血清或细胞上清中浓度通常为10至200纳克/毫升。它的作用目标是天然和变性胶原蛋白（collagens）、纤维连接蛋白（fibronectin）、弹性纤维蛋白（elastin）、层粘连蛋白-5（laminin-5）、前体肿瘤坏死因子-α（pro-TNF-α）和神经（蛋白）聚糖（neurocan）。基质金属蛋白酶-2与肿瘤发展与转移、血管形成、动脉粥样硬化等疾病有关。基于含硫多肽（thiopeptide）底物Ac-PLG（2-mercapto-4-methyl-pentanoyl）-LG-OC2H5，在特异性YZ剂OA-Hy存在与否的条件下，受到MMP2的水解，释放出巯基（sulfhydrylgroup），进而与Ellman试剂5，5-二硫基-双（2-硝基苯甲酸）[5，5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反应后，产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通过其吸收峰值的变化（412nm波长），来定量测定组织基质金属蛋白酶2的特异活性。基质金属蛋白酶2反应系统为：[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 组织转谷氨酰胺酶(TGM2)ELISA试剂盒

  组织转谷氨酰胺酶(TGM2)ELISA试剂盒[详细]

  2016-07-05 00:00

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• 细胞长链脂酰辅酶A合成酶活性酶连续循环光度法定量检测试剂盒产品说明书

  细胞长链脂酰辅酶A合成酶活性酶连续循环光度法定量检测试剂盒产品说明书主要用途细胞长链脂酰辅酶A合成酶（LONG-CHAINACYLCOASYNTHETASE；LACS）活性酶连续循环光度法定量检测试剂是一种旨在通过肌激酶、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶的酶连续反应系统中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用光度法来测定细胞裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解悬液样品（动物、人体等）长链脂酰辅酶A合成酶的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景脂肪酸β氧化过程（β-oxidation）在动物组织的线粒体发生的脂肪酸代谢通路，可概括为活化、转移、β氧化及Z后经三羧酸循环被彻底氧化生成CO2和H2O，并释放能量等四个阶段。脂酰辅酶A合成酶（acylcoAsynthetase；EC.6.2.1.3），又称为脂肪酸硫激酶（fattyacidthiokinase）或脂酰辅酶A连接酶（acylcoAligase），是脂肪酸进入β-氧化前的活化所必需：在ATP、CoA-SH、Mg2+存在下，催化饱和或不饱和直链脂肪酸分子（C4）连接辅酶A合成相应的脂酰辅酶A。其为一高能化合物，水溶性增强，提高代谢活性。当脂肪酸进入细胞后，在内质网及线粒体外膜上先被活化，形成脂酰辅酶A衍生物，然后再进入线粒体内氧化。脂酰辅酶A合成酶分成三种底物特异性的种类：小于4个碳（C4）的短链脂酰辅酶A合成酶（acetyl-CoAsynthetase），介于4至12个碳（C4－C12）的中链脂酰辅酶A合成酶（butyryl-CoAsynthetase），和大于12个碳（C12）的长链脂酰辅酶A合成酶（palmitoylCoAsynthetase）。基于长链脂肪酸棕榈酸（palmitate）和辅酶A在长链脂酰辅酶A合成酶的作用下，产生棕榈酰辅酶A（palmitoyl-CoA）后，通过肌激酶（myokinase）、丙酮酸激酶（pyruvatekinase）和乳酸脱氢酶（lacticdehydrogenase）系统，测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidizednicotinamideadeninedinucleotide；NAD）的变化（340nm波长），来定量分析长链脂酰辅酶A合成酶的活性。长链脂酰辅酶A合成酶连续循环反应系统为：Long-chainacylcoAsynthetasepalmitate+CoA+ATP→palmitoyl-CoA+AMP+PPimyokinaseAMP+ATP→2ADPpyruvatekinase2ADP+2phosphoenolpyruvate→2ATP+2pyruvatelacticdehydrogenase2pyruvate+2β-NADH→2lactate+2β-NAD＋产品内容清理液（ReagentA）120毫升裂解液（ReagentB）10毫升缓冲液（ReagentC）5毫升反应液（ReagentD）500微升酶促液（ReagentE）250微升底色液（ReagentF）250微升阴性液（ReagentG）250微升产品说明书1份保存方式保存反应液（ReagentD）、酶促液（ReagentE）和底色液（ReagentF）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；反应液（ReagentD）和底色液（ReagentF）避免光照；有效保证6月用户自备15毫升锥形离心管：用于样品制备的容器1.5毫升离心管：用于样品保存的容器细胞刮脱棒：用于脱离贴壁细胞（微型）台式离心机：用于样品制备200微升1厘米光径比色皿或96孔板：用于光度分析的容器分光光度仪或酶标仪：用于光度分析实验步骤样品准备准备好25cm2细胞培养瓶或60mm细胞培养皿的待测培养细胞（1至5X106细胞）小心加入3毫升清理液（ReagentA），覆盖生长表面小心抽去清理液使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞（注意：可以使用胰酶消化）加入3毫升清理液（ReagentA），混匀细胞移入到预冷的15毫升锥形离心管（注意：悬浮细胞从这一步骤开始）放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为300g小心抽去上清液加入500微升裂解液（ReagentB），充分混匀转移到预冷的1.5毫升离心管QL涡旋震荡15秒置于冰槽里孵育30分钟放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－HL30030.1）即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作测定准备开启并设定好分光光度仪（温度为25℃）：波长340nm，间隔5分钟，读数3次（共15分钟），并置零从－20℃冰箱里取出试剂，置于冰槽里融化；反应液（ReagentD）和底色液（ReagentF）避免光照缓冲液（ReagentC）室温下均衡温度背景对照测定移取195微升缓冲液（ReagentC）到新的比色皿加入25微升反应液（ReagentD）加入12.5微升酶促液（ReagentE）加入12.5微升底色液（ReagentF）上下倾倒数次，混匀在25℃温度下孵育3分钟加入5微升阴性液（ReagentG）上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照（0分钟读数－15分钟读数）样品测定移取195微升缓冲液（ReagentC）到新的比色皿加入25微升反应液（ReagentD）加入12.5微升酶促液（ReagentE）加入12.5微升底色液（ReagentF）上下倾倒数次，混匀在25℃温度下孵育3分钟加入5微升待测样品（20微克蛋白）（注意：样品须清澈）上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）即刻放进分光光度仪检测，此为样品读数（0分钟读数－15分钟读数）五、计算样品活性[（样品读数－背景读数）X0.25（体系容量；毫升）X样品稀释倍数]÷[0.005（样品容量；毫升）X6.22（毫摩尔吸光系数）X15（反应时间；分钟）X2]＝单位/毫升÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝单位/毫克单位＝微摩尔棕榈酰辅酶A/分钟酶标仪测定在96孔板上做好相应标记：背景对照和样品分别移取195微升缓冲液（ReagentC）到96孔板里分别加入25微升反应液（ReagentD）分别加入12.5微升酶促液（ReagentE）分别加入12.5微升底色液（ReagentF）轻轻摇动96孔板在25℃温度下孵育3分钟分别加入5微升阴性液（ReagentG）或待测样品（20微克蛋白）到相应孔里（注意：样品须清澈）轻轻摇动96孔板即刻放进酶标仪检测：0分钟读数和15分钟读数活性计算：[（样品读数－背景读数）X样品稀释倍数X0.25（体系容量；毫升）]÷[0.005（样品容量；毫升）X6.22（毫摩尔吸光系数）X0.6（光径距离；厘米）X15（反应时间；分钟）X2]＝单位/毫升÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝单位/毫克单位＝微摩尔棕榈酰辅酶A/分钟注意事项本产品为20次操作，包括背景对照操作时，须戴手套系统操作过程中，背景测定只需1次建议使用比色皿测定样品须澄清，至关重要加样后3秒内光度测定测定值由高到低变化；测定可持续15分钟光度测定后，比色皿须清洗彻底样本测定0分钟读数高于15分钟读数表明具有酶活性建议待测样本蛋白浓度为20微克/5微升（本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－HL30030.1）如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度长链脂酰辅酶A合成酶单位活性定义为：在25℃，pH8.1条件下，每分钟内能够合成1微摩尔棕榈酰辅酶A所需的酶量作为一个活性单位本公司提供系列脂肪酸代谢检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]

  2018-11-19 10:00

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• 线粒体呼吸链复合物V活性光度法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  MB50083v.A线粒体呼吸链复合物V活性光度法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途线粒体呼吸链复合物V（F0F1-ATP酶/ATP合成酶）活性光度法定量检测试剂是一种旨在使用丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环法反应系统，测定与ATP合成对应的ATP水解产生ADP过程中，伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后吸光峰值的降低，即采用光度法测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种纯化线粒体样品（动物、人体、酵母）以及细胞或组织裂解悬液样品的F0F1-ATP酶/ATP合成酶的特异性活性检测。可用于心肌、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。技术背景线粒体呼吸链复合物V，通常称为ATP合成酶（ATPsynthase）、F型ATP酶（FtypeATPase）和F1F0ATP酶（F1F0ATPase），是线粒体氧化磷酸化的反应。其分子量为500KD，含有十六个亚单位，其中两个：ATP酶6和8为线粒体DNA编码的。ATP酶主要有两个结构域：F0为质子通道，由几个膜蛋白构成，包括a、b、c、d、e、F6、A6L、OSCP（oligomycinsensitiveconferringprotein）等；和F1催化活性结构域，由水溶性的α3β3γδε蛋白构成。其Z特征性的酶活性是寡霉素敏感的ATP合成酶。复合物V的主要功能在于产生大部分细胞所需的能量ATP。ATP的合成需要线粒体内膜电子传递到氧分子时，呼吸链蛋白所产生的质子梯度变化。质子通过F0结构域传递到基质，激活F1催化活性结构域，促使ATP合成。该酶异常会导致心肌和神经系统疾病。基于ATP，在寡霉素参与下，受到F1F0ATP酶的水解，进而通过丙酮酸激酶（pyruvatekinase；PK）和乳酸脱氢酶（lactatedehydrogenase；LDH）反应系统中，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD），产生的吸光峰值的变化（340nm），来定量分析F1F0ATP酶活性。其反应系统为：F1F0ATPaseATP=ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+（高吸收峰）（低吸收峰）产品内容缓冲液（ReagentA）20毫升反应液（ReagentB）2.5毫升阴性液（ReagentC）2毫升底物液（ReagentD）500微升专性液（ReagentE）250微升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里，避免反复冻融；反应液（ReagentB），避免光照，有效保证6月用户自备比色皿：用于光度分析的容器分光光度仪：用于光度分析培养箱：用于孵育反应物实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液置入冰槽里融化；反应液（ReagentB）注意避光。然后进行下列操作。测定准备准备好待测样品（例如纯化线粒体样品等），置于冰槽里设定好分光光度仪（温度为30℃）：波长为340nm，间隔30秒，读数11次（共5分钟），并置零缓冲液（ReagentA）室温下均衡温度背景对照测定移取780微升缓冲液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反应液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放进30℃培养箱里孵育3分钟加入100微升阴性液（ReagentC）上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照：340波长读数0分钟－340波长读数1分钟或5分钟样品总活性测定移取780微升缓冲液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反应液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放进30℃培养箱里孵育3分钟加入100微升待测样品（注意：10微克总线粒体蛋白）上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）即刻放进分光光度仪检测，此为样品总活性读数：340波长读数0分钟－340波长读数1分钟或5分钟样品非特异活性测定实验开始前，移取100微升待测样品（注意：10微克总线粒体蛋白）到1.5毫升离心管，加入20微升专性液（ReagentE），混匀后，放进30℃培养箱里孵育15分钟。然后置于冰槽里备用移取760微升缓冲液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反应液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放进30℃培养箱里孵育3分钟加入120微升上述预处理的待测样品上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）即刻放进分光光度仪检测，此为样品非特异活性读数：340波长读数0分钟－340波长读数1分钟或5分钟计算样品活性1）样品活性（总活性和非特异活性）【（样品读数－背景读数）X1（体系容量；毫升）X样品稀释倍数】÷【0.1（样品容量；毫升）X6.22（毫摩尔吸光系数X1或5（反应时间；分钟）】＝单位/毫升÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝单位/毫克单位＝微摩尔NADH/分钟2）样品特异活性样品总活性－样品非特异活性＝样品特异活性[详细]

  2018-11-08 10:00

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• Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒说明书

  Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒说明书主要用途ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，机体在缺氧及等状态下，ATP酶受到损伤，活力下降。ATP酶活力的大小是各种细胞能量代谢及功能有无损伤的重要指标。本测试盒可测钠钾ATP酶、钙镁ATP酶的活性。样品为各种组织及红细胞等，本法的Zda特点是样品前处理不需要高速离心机，方法简便、快速。产品内容缓冲液（ReagentA）6毫升反应液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升阴性液（ReagentD）6毫升标准品（reagentE）6微升产品说明书1份保存方式保存反应液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于反应液配制的容器微型台式离心机：用于样品制备比色皿或酶标板：用于比色的容器分光光度仪：用于比色分析酶标仪：用于微量样品比色分析实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的反应液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后进行下列操作。样品准备选择一：血浆样品1．准备好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为5000g4．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分（注意：避免触碰白色液体层）5．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存6．（选择步骤）移取50微升进行蛋白定量测定选择二：血清样品1．准备好不含抗凝剂的储存管2．抽取2毫升血液，置于储存管里3．室温下，静置30分钟，直至血液凝结4．放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为5000g5．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分（注意：避免触碰白色液体层）6．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存7．（选择步骤）移取50微升进行蛋白定量测定选择三：组织样本准确称取组织重量，按照重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10分钟，去上清液待测。二、测定准备1.准备好上述待测样品，置于冰槽里2.设定好分光光度仪（温度为37℃）：波长440nm三、样本测定1．在96孔酶标板上做好相应标记：背景对照，标准品孔和样品孔2．分别移取50微升缓冲液（ReagentA）到相应孔中3．设定标准品孔(加入50微升标准品），样本孔(加入50微升样本)阴性液孔(加入50微升阴性液（ReagentD）4．分别加入50微升反应液（ReagentB）5．轻轻摇动96孔酶标板6．在37℃温度下孵育2分钟7．放进酶标仪，置零8．取出酶标板，分别加入50微升底物液（ReagentC）9．轻轻摇动酶标板10．即刻放进酶标仪检测，包括（0分钟初始读数和5分钟读数）四，样本计算样本活性=样本OD值/标准OD值*标品浓度[详细]

  2024-09-29 11:52

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• 组织NADPH氧化酶活性化学发光法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  组织NADPH氧化酶活性化学发光法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-01-21 00:00

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• 组织对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性定量试剂盒说明书

  主要用途组织对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性光度法定量检测试剂是一种旨在通过对氧磷酶1反应系统中，水解有机磷酸，释放出对硝基苯产物，出现吸光峰值的变化，即采用光度法来测定组织样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体组织裂解悬液样品对氧磷酶1的有机磷酸酶活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景对氧磷酶（parapxonase；PON；EC3.1.8.1）是一种水解酯类（esters）、有机磷酸酯（organophosphate）和内酯（lactone）的多态性酶，分成三个亚型：PON1、PON2、PON3。结构同源性在基因层面上达70%，在氨基酸层面上达65%。其中PON1，为钙离子依赖性和高密度脂蛋白（highdensitylipoprotein；HDL）相关性糖蛋白，含有354氨基酸，43Kd分子量，分布在肝脏、肾脏、小肠和血清（50毫克/升）中。具有有机磷酸酶（organophosphtase）、磷酸三酯酶（phosphotriesterase）、芳香酯酶（arylesterase）和硫内酯酶（thiolactonase）等多重活性：PON1与HDL结合，水解各种LDL和HDL上的氧化性磷酯，以及芳香族羧酸酯、芳香族和脂肪族内酯等，例如杀虫剂对硫磷（parathion）降解产物对氧磷（paraoxon）、毒死蜱（chlorpyriphos）、神经毒因子*（sarin）和*（soman）、同型半胱氨酸（homocysteine）硫内酯、二氢香豆素（dihydrocourmarin；DHC）、γ-丁内酯（γ-butyrolactone）等，延缓和YZ低密度脂蛋白（lowdensitylipoprotein；LDL）氧化作用，阻止脂质过氧化物产生，保护脂蛋白以及质膜受到氧化损伤，达到抗粥样硬化（antiatherogenic）、、抗氧化的功能。PON1活性降低与慢性肾衰、糖尿病、外周神经病变、家属性高胆固醇血症、心血管疾病、肝纤维化等有关。PON2为44Kd分子量，分布在脑、肝脏、肺、肾脏、睾丸等大多数组织中，但血清中测不到。PON2具有水解芳香酯和内酯酶的功能，但不能水解有机磷酸。具有细胞内抗氧化作用，预防粥样硬化等功能。PON3为40Kd分子量，主要分布在肝脏中，少量在肾脏中。主要水解各种内酯和环状羧酸酯，具有抗氧化功能。基于人工合成底物对硝基苯磷酸二乙酯（diethyl-p-nitrophenylphosphate），在对氧磷酶1的作用下，水解产生对硝基苯（p-nitrophenol）和磷酸二乙酯（diethylphosphate），通过对硝基苯产物吸收峰值的变化（405nm波长），来定量分析对氧磷酶1的有机磷酸酶活性。其反应系统为：[详细]

  2018-11-08 10:00

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