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蛋白质提取与制备的原理和方法
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本文由 上海士锋生物科技有限公司 整理汇编
2015-03-19 00:00 323阅读次数
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蛋白质提取与制备的原理和方法
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蛋白质提取与制备的原理和方法- 蛋白质提取与制备的原理和方法[详细]
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2015-03-19 00:00
标准
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提取蛋白质的方法- 植物组织蛋白质提取方法：1、根据样品重量（1g样品加入3.5ml提取液，可根据材料不同适当加入），准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上静置（3-4小时）。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜，样品制备完成。蛋白质提取液：300ml1、1Mtris-HCl（PH8）45ml2、甘油（Glycerol）75ml3、聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinylpolypyrrordone）6g这种方法针对SDS-PAGE，垂直板电泳！三氯醋酸丙酮沉淀法1、在液氮中研磨叶片2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下，然后离心（4℃8000rpm以上1小时）弃上清。3、加入等体积的冰浴丙酮（含0.07%的β-巯基乙醇），摇匀后离心（4℃8000rpm以上1小时），然后真空干燥沉淀，备用。4、上样前加入裂解液，室温放置30分钟，使蛋白充分溶于裂解液中，然后离心（15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准），可临时保存在4℃待用。5、用Brandford法定量蛋白，然后可分装放入-80℃备用。[详细]
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2018-09-27 10:00
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2018-08-15 10:57
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2011-12-08 00:00
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蛋白质提取与纯化技术- 蛋白质提取与纯化技术[详细]
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2013-04-09 00:00
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2018-10-02 10:03
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