猪白介素2（IL-2）Elisa试剂盒使用说明书

本文由 上海恒远ELISA试剂盒供应商 整理汇编

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  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4　　　　　猪白介素2（IL-2）Elisa试剂盒使用说明书FORRESEARCHUSEONLYAssayrange：20pg/ml-480pg/ml96determinationsPurposeThiskitallowsforthedeterminationofIL-2concentrationsinPorcineserum,cellculturesupernatesandotherbiologicalfluidsPrincipleoftheassayThekitassayPorcineIL-2levelinthesample，usePurifiedPorcineIL-2antibodytocoatmicrotiterplatewells,makesolid-phaseantibody,thenaddPorcineIL-2towells,CombinedantibodywhichWithHRPlabeledgoatanti-Porcinebecomeantibody-antigen-enzyme-antibodycomplex,afterwashingCompletely,AddTMBsubstratesolution,TMBsubstratebecomesbluecolorAtHRPenzyme-catalyzed,reactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionandthecolorchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.TheconcentrationofPorcineIL-2inthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.Materialsprovidedwiththekit1washsolution20ml×1bottle7StoppSolution6ml×1bottle2HRP-Conjugatereagent6ml×1bottle8Standard（960pg/ml）0.5ml×1bottle3Microelisastripplate12well×8strips9Standarddiluent1.5ml×1bottle4Samplediluent6ml×1bottle10Instruction15ChromogenSolutionA6ml×1bottle11Closureplatemembrane26ChromogenSolutionB6ml×1bottle12Sealedbags1Specimenrequirements1.extractassoonaspossibleafterSpecimencollection,andaccordingtotherelevantliterature,and首ldbeexperimentassoonaspossibleaftertheextraction.Ifitcan’t,specimencanbekeptin-20℃topreserve,Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.2.Can’tdetectthesamplewhichcontainNaN3,becauseNaN3inhibitsHRPactive.Assayprocedure1.Diluteandaddsample:DiluteOriginaldensityStandardasfollowtable:480pg/ml5Standard150μlOriginaldensityStandard+150μlStandarddiluent240pg/ml4Standard150μl5Standard+150μlStandarddiluent120pg/ml3Standard150μl4Standard+150μlStandarddiluent60pg/ml2Standard150μl3Standard+150μlStandarddiluent30pg/ml1Standard150μl2Standard+150μlStandarddiluent2.addsample：Setblankwellsseparately（blankcomparisonwellsdon’taddsampleandHRP-Conjugatereagent,othereachstepoperationissame）.testingsamplewell.addSampledilution40μltotestingsamplewell,thenaddtestingsample10μl（samplefinaldilutionis5-fold）,addsampletowells,don’ttouchthewellwallasfaraspossible,andGentlymix.3.Incubate:AfterclosingplatewithClosureplatemembrane,incubatefor30minat37℃.4.Configurateliquid:30-foldwashsolutiondiluted30-fold（or20-fold）withdistilledwaterandreserve.5.washing：UncoverClosureplatemembrane,discardLiquid,drybyswing,addwashingbuffertoeverywell,stillfor30sthendrain,repeat5times,drybypat.6.addenzyme：AddHRP-Conjugatereagent50μltoeachwell,exceptblankwell.7.incubate：Operationwith3.8.washing：Operationwith5.9.color：AddChromogenSolutionA50ulandChromogenSolutionBtoeachwell,evadethelightpreservationfor15minat37℃10.Stopthereaction：AddStopSolution50μltoeachwell,Stopthereaction（thebluecolorchangetoyellowcolor）.11.assay：takeblankwellaszero,Readabsorbanceat450nmafterAddingStopSolutionandwithin15min.StepsdescriptionStandard,SamplediluentAddStandard,Samplediluent,incubatefor30minat37℃.Wash5time,AddHRP-Conjugatereagent,incubatefor30minat37℃.Wash5times,AddChromogenSolutionAandB,incubatefor30minat37℃.AddStoppSolutionReadabsorbanceat450nmwithin15mincalculateCalculateTakethestandarddensityasthehorizontal,theODvalueforthevertical,drawthestandardcurveongraphpaper,FindoutthecorrespondingdensityaccordingtothesampleODvaluebytheSamplecurve,multipliedbythedilutionmultiple,orcalculatethestraightlineregressionequationofthestandardcurvewiththestandarddensityandtheODvalue,withthesampleODvalueintheequation,calculatethesampledensity,multipliedbythedilutionfactor,theresultisthesampleactualdensity.Importantnotes1.Thekittakesoutfromtherefrigerationenvironment首ldbebalanced15-30minutesintheroomtemperature,ELISAplatescoatedifhasnotuseupafteropened,theplate首ldbestoredinSealedbag.2.washingbufferwillCrystallizationseparation,itcanbeheatedthewaterhelpsdissolvewhendilute.Washingdoesnotaffecttheresult.3.addSamplewithsamplerEachstep,Andproofreaditsaccuracyfrequently,avoidstheexperimentalerror.addsamplewithin5min,ifthenumberofsampleismuch,recommendtouseVolley.4.ifthetestingmaterialcontentisexcessivelyhigher（ThesampleODisbiggerthanthefirststandardwell）,pleasediluteSample（n-fold）,Pleasediluenteandmultipliedbythedilutionfactor.（×n×5）.5.Closureplatemembraneonlylimitsthedisposableuse,toavoidcross-contamination.6.Thesubstrateevadethelightpreservation.7.Pleaseaccordingtouseinstructionstrictly,Thetestresultdeterminationmusttakethemicrotiterplatereaderasastandard.8.Allsamples,washingbufferandeachkindofreject首ldaccordingtoinfectivematerialprocess.9.Donotmixreagentswiththosefromotherlots.Storageandvalidity1．Storage：2-8℃.2．validity：sixmonths.ContactTEL:021-60521817,60547786,13636351073[详细]

  2018-11-16 10:02

  产品样册

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• 猪白介素2（IL-2）ELISA 使用说明书

  猪白介素2（IL-2）ELISA 使用说明书[详细]

  2014-04-10 00:00

  安装说明

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• 猪白介素2(IL-2)ELISA试剂盒

  猪白介素2(IL-2)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-28 01:53

  应用文章

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• 小鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒

  小鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-08 00:00

  其它

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• 大鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒

  大鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-11 00:00

  报价单

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• 人白介素2(IL-2)ELISA试剂盒

  人白介素2(IL-2)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-05 00:00

  报价单

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• 小鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒

  小鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒[详细]

  2013-11-15 00:00

  操作手册

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• 人IL-2试剂盒，白介素2(IL-2)ELISA检测试剂盒

  人IL-2试剂盒，白介素2(IL-2)ELISA检测试剂盒本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准。[详细]

  2024-11-25 13:30

  应用文章

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• 猪白细胞介素-2（IL-2）elisa试剂盒说明书

  上海恒远生物科技有限公司是一家专注于生命科学和生物技术领域的高科技企业。从事生物技术领域相关产品的开发，销售和技术服务。我们的主营业务为：ELISA试剂盒，化学试剂，标准品，抗体以及耗材。本公司联系方式：www.RDELISA.com电话：021-6052049815021667557何经理QQ：1005074258猪白细胞介素-2（IL-2）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T20pg/ml-480pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-2（IL-2）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪白细胞介素-2（IL-2）水平。用纯化的猪白细胞介素-2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素-2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-2（IL-2）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中猪白细胞介素-2（IL-2）浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（960pg/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。480pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液240pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液120pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液60pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液30pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月标本收集方法：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。3.尿液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。5.培养细胞检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6.组织标本切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。[详细]

  2018-11-16 10:02

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• 人白介素2(IL-2)检测试剂盒

  人白介素2(IL-2)检测试剂盒[详细]

  2024-10-01 06:37

  期刊论文

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• ELISA检测试剂盒使用说明书，猪（Porcine）白细胞介素2（IL-2）

  本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被白细胞介素2（IL-2）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，Z终结果乘以5才是样本实际浓度。4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5.所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、20、40、80、160、320pg/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。2.自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3.样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。试剂盒性能1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2.灵敏度：Zdi检测浓度小于1.0pg/mL。3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6.有效期：6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。FORRESEARCHUSEONLY.NOTFORUSEINDIAGNOSTICPROCEDURES.PorcineInterleukin2（IL-2）ELISAKitinstructionIntendeduseThisIL-2ELISAkitisintendedLaboratoryforResearchuseonlyandisnotforuseindiagnosticortherapeuticprocedures.TheStopSolutionchangesthecolorfrombluetoyellowandtheintensityofthecolorismeasuredat450nmusingaspectrophotometer.InordertomeasuretheconcentrationofIL-2inthesample,thisIL-2ELISAKitincludesasetofcalibrationstandards.ThecalibrationstandardsareassayedatthesametimeasthesamplesandallowtheoperatortoproduceastandardcurveofOpticalDensityversusIL-2concentration.TheconcentrationofIL-2inthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.SamplecollectionandstoragesSerum-Useaserumseparatortubeandallowsamplestoclotfor30minutesbeforecentrifugationfor10minutesatapproximately3000×g.Removeserumandassayimmediatelyoraliquotandstoresamplesat-20℃or-80℃.Avoidrepeatedfreeze-thawcyclesPlasma-CollectplasmausingEDTAorheparinasananticoagulant.Centrifugesamplesfor30minutesat3000×gat2-8℃within30minutesofcollection.Storesamplesat-20℃or-80℃.Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.Cellculturesupernatesandotherbiologicalfluids-Removeparticulatesbycentrifugationandassayimmediatelyoraliquotandstoresamplesat-20℃or-80℃.Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.Note:Thesamples首lebecentrifugateddequatelyandnohemolysisorgranulewasallowed.Materialsrequiredbutnotsupplied1.Standardmicroplatereader（450nm）2.PrecisionpipettesandDisposablepipettetips.3.37℃incubatorPrecautions1.Donotsubstitutereagentsfromonekittoanother.Standard,conjugateandmicroplatesarematchedforoptimalperformance.Useonlythereagentssuppliedbymanufacturer.2.Donotremovemicroplatefromthestoragebaguntilneeded.Unusedstrips首ldbestoredat2-8°Cintheirpouchwiththedesiccantprovided.3.Mixallreagentsbeforeusing.Removeallkitreagentsfromrefrigeratorandallowthemtoreachroomtemperature（20-25°C）MaterialssuppliedName96determinations48determinationsMicroelisastripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSampleDiluent6.0ml3.0mlHRP-Conjugatereagent10.0ml5.0ml20XWashsolution25ml15mlChromogenSolutionA6.0ml3.0mlChromogenSolutionB6.0ml3.0mlStopSolution6.0ml3.0mlClosureplatemembrane22Usermanual11Sealedbags11Note:Standard（S0→S5）concentrationwasfollowedby:0,20,40,80,160,320pg/ml.Reagentpreparation20×washsolution:DilutewithDistilledordeionizedwater1:20.Assayprocedure1.Prepareallreagentsbeforestartingassayprocedure.ItisrecommendedthatallStandardsandSamplesbeaddedinduplicatetotheMicroelisaStripplate.2.Addstandard:SetStandardwells,testingsamplewells.Addstandard50μltostandardwell.3.AddSample:Addtestingsample10μlthenaddSampleDiluent40μltotestingsamplewell;Blankwelldoesn’taddanyting.4.Add100μlofHRP-conjugatereagenttoeachwell,coverwithanadhesivestripandincubatefor60minutesat37°C.5.Aspirateeachwellandwash,repeatingtheprocessfourtimesforatotaloffivewashes.Washbyfil领eachwellwithWashSolution（400μl）usingasquirtbottle,manifolddispenserorautowasher.Completeremovalofliquidateachstepisessentialtogoodperformance.Afterthelastwash,removeanyremainingWashSolutionbyaspiratingordecanting.Inverttheplateandblotitagainstcleanpapertowels.6.AddchromogensolutionA50μlandchromogensolutionB50μltoeachwell.Gentlymixandincubatefor15minutesat37°C.Protectfromlight.7.Add50μlStopSolutiontoeachwell.Thecolorinthewells首ldchangefrombluetoyellow.Ifthecolorinthewellsisgreenorthecolorchangedoesnotappearuniform,gentlytaptheplatetoensurethoroughmixing.8.ReadtheOpticalDensity（O.D.）at450nmusingamicrotiterplatereaderwithin15minutes.Calculationofresults1.Thisstandardcurveisusedtodeterminetheamountinanunknownsample.ThestandardcurveisgeneratedbyplottingtheaverageO.D.（450nm）obtainedforeachofthesixstandardconcentrationsonthevertical（Y）axisversusthecorrespondingconcentrationonthehorizontal（X）axis.2.First,calculatethemeanO.D.valueforeachstandardandsample.AllO.D.values,aresubtractedbythemeanvalueofthezerostandardbeforeresultinterpretation.Constructthestandardcurveusinggraphpaperorstatisticalsoftware.3.Todeterminetheamountineachsample,firstlocatetheO.D.valueontheY-axisandextendahorizontallinetothestandardcurve.Atthepointofintersection,drawaverticallinetotheX-axisandreadthecorrespondingconcentration.4.Anyvariationinoperator,pipettingandwashingtechnique,incubationtimeortemperature,andkitagecancausevariationinresult.Eachuser首ldobtaintheirownstandardcurve.5.Thesensitivitybythisassayis1.0pg/ml6.StandardcurveStorage：2-8℃.validity：sixmonths.FORRESEARCHUSEONLY;NOTFORTHERAPEUTICORDIAGNOSTICAPPLICATIONS!PLEASEREADTHROUGHENTIREPROCEDUREBEFOREBEGINNING![详细]

  2018-11-15 10:00

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• 小鼠（IL-2）Elisa试剂盒使用说明书

  小鼠白细胞介素-2（IL-2）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素-2（IL-2）含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素2（IL-2）水平。用纯化的小鼠白细胞介素2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素2（IL-2）浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：3600pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。操作步骤1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为2400pg/mL，1600pg/mL，800pg/mL，400pg/mL，200pg/mL）。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：150pg/mL-3000pg/mL保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-10-23 10:31

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• 大鼠白介素2（IL-23）ELISA试剂盒使用说明书

  大鼠白介素2（IL-23）ELISA试剂盒使用说明书操作步骤：编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。人骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISAKit，48T/96T小鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISAKit，48T/96T大鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISAKit，48T/96T人全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISAKit，48T/96T小鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISAKit，48T/96T大鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISAKit，48T/96T人维生素D受体(VDR)ELISAKit，48T/96T人抗巨细胞病毒抗体IgM(anti-CMVIgM)ELISAKit，48T/96T人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)ELISAKit，48T/96T人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit，48T/96T小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit，48T/96T猪心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit，48T/96T大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit，48T/96T人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISAKit，48T/96T犬肌红蛋白(MYO/MB)ELISAKit，48T/96T鸡肌红蛋白(MYO/MB)ELISAKit，48T/96T人肌红蛋白(MYO/MB)ELISAKit，48T/96T小鼠肌红蛋白(MYO/MB)ELISAKit，48T/96T大鼠肌红蛋白(MYO/MB)ELISAKit，48T/96T人迟现抗原(VLA)ELISAKit，48T/96T大鼠迟现抗原(VLA)ELISAKit，48T/96T犬内皮素1(ET-1)ELISAKit，48T/96T骆驼内皮素1(ET-1)ELISAKit，48T/96T豚鼠内皮素1(ET-1)ELISAKit，48T/96T人内皮素1(ET-1)ELISAKit，48T/96T小鼠内皮素1(ET-1)ELISAKit，48T/96T猴子内皮素1(ET-1)ELISAKit，48T/96T猪内皮素1(ET-1)ELISAKit，48T/96T大鼠内皮素1(ET-1)ELISAKit，48T/96T兔子内皮素1(ET-1)ELISAKit，48T/96T人大内皮素(BigET)ELISAKit，48T/96T小鼠大内皮素(BigET)ELISAKit，48T/96T大鼠大内皮素(BigET)ELISAKit，48T/96T人前心钠肽(Pro-ANP)ELISAKit，48T/96T[详细]

  2018-09-28 10:00

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• Porcine IL-2试剂盒使用说明书

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4RDPorcineIL-2FORRESEARCHUSEONLYAssayrange：20pg/ml-480pg/ml96determinationsPurposeThiskitallowsforthedeterminationofIL-2concentrationsinPorcineserum,cellculturesupernatesandotherbiologicalfluidsPrincipleoftheassayThekitassayPorcineIL-2levelinthesample，usePurifiedPorcineIL-2antibodytocoatmicrotiterplatewells,makesolid-phaseantibody,thenaddPorcineIL-2towells,CombinedantibodywhichWithHRPlabeledgoatanti-Porcinebecomeantibody-antigen-enzyme-antibodycomplex,afterwashingCompletely,AddTMBsubstratesolution,TMBsubstratebecomesbluecolorAtHRPenzyme-catalyzed,reactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionandthecolorchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.TheconcentrationofPorcineIL-2inthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.Materialsprovidedwiththekit1washsolution20ml×1bottle7StoppSolution6ml×1bottle2HRP-Conjugatereagent6ml×1bottle8Standard（960pg/ml）0.5ml×1bottle3Microelisastripplate12well×8strips9Standarddiluent1.5ml×1bottle4Samplediluent6ml×1bottle10Instruction15ChromogenSolutionA6ml×1bottle11Closureplatemembrane26ChromogenSolutionB6ml×1bottle12Sealedbags1Specimenrequirements1.extractassoonaspossibleafterSpecimencollection,andaccordingtotherelevantliterature,and首ldbeexperimentassoonaspossibleaftertheextraction.Ifitcan’t,specimencanbekeptin-20℃topreserve,Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.2.Can’tdetectthesamplewhichcontainNaN3,becauseNaN3inhibitsHRPactive.Assayprocedure1.Diluteandaddsample:DiluteOriginaldensityStandardasfollowtable:480pg/ml5Standard150μlOriginaldensityStandard+150μlStandarddiluent240pg/ml4Standard150μl5Standard+150μlStandarddiluent120pg/ml3Standard150μl4Standard+150μlStandarddiluent60pg/ml2Standard150μl3Standard+150μlStandarddiluent30pg/ml1Standard150μl2Standard+150μlStandarddiluent2.addsample：Setblankwellsseparately（blankcomparisonwellsdon’taddsampleandHRP-Conjugatereagent,othereachstepoperationissame）.testingsamplewell.addSampledilution40μltotestingsamplewell,thenaddtestingsample10μl（samplefinaldilutionis5-fold）,addsampletowells,don’ttouchthewellwallasfaraspossible,andGentlymix.3.Incubate:AfterclosingplatewithClosureplatemembrane,incubatefor30minat37℃.4.Configurateliquid:30-foldwashsolutiondiluted30-fold（or20-fold）withdistilledwaterandreserve.5.washing：UncoverClosureplatemembrane,discardLiquid,drybyswing,addwashingbuffertoeverywell,stillfor30sthendrain,repeat5times,drybypat.6.addenzyme：AddHRP-Conjugatereagent50μltoeachwell,exceptblankwell.7.incubate：Operationwith3.8.washing：Operationwith5.9.color：AddChromogenSolutionA50ulandChromogenSolutionBtoeachwell,evadethelightpreservationfor15minat37℃10.Stopthereaction：AddStopSolution50μltoeachwell,Stopthereaction（thebluecolorchangetoyellowcolor）.11.assay：takeblankwellaszero,Readabsorbanceat450nmafterAddingStopSolutionandwithin15min.StepsdescriptionStandard,SamplediluentAddStandard,Samplediluent,incubatefor30minat37℃.Wash5time,AddHRP-Conjugatereagent,incubatefor30minat37℃.Wash5times,AddChromogenSolutionAandB,incubatefor30minat37℃.AddStoppSolutionReadabsorbanceat450nmwithin15mincalculateCalculateTakethestandarddensityasthehorizontal,theODvalueforthevertical,drawthestandardcurveongraphpaper,FindoutthecorrespondingdensityaccordingtothesampleODvaluebytheSamplecurve,multipliedbythedilutionmultiple,orcalculatethestraightlineregressionequationofthestandardcurvewiththestandarddensityandtheODvalue,withthesampleODvalueintheequation,calculatethesampledensity,multipliedbythedilutionfactor,theresultisthesampleactualdensity.Importantnotes1.Thekittakesoutfromtherefrigerationenvironment首ldbebalanced15-30minutesintheroomtemperature,ELISAplatescoatedifhasnotuseupafteropened,theplate首ldbestoredinSealedbag.2.washingbufferwillCrystallizationseparation,itcanbeheatedthewaterhelpsdissolvewhendilute.Washingdoesnotaffecttheresult.3.addSamplewithsamplerEachstep,Andproofreaditsaccuracyfrequently,avoidstheexperimentalerror.addsamplewithin5min,ifthenumberofsampleismuch,recommendtouseVolley.4.ifthetestingmaterialcontentisexcessivelyhigher（ThesampleODisbiggerthanthefirststandardwell）,pleasediluteSample（n-fold）,Pleasediluenteandmultipliedbythedilutionfactor.（×n×5）.5.Closureplatemembraneonlylimitsthedisposableuse,toavoidcross-contamination.6.Thesubstrateevadethelightpreservation.7.Pleaseaccordingtouseinstructionstrictly,Thetestresultdeterminationmusttakethemicrotiterplatereaderasastandard.8.Allsamples,washingbufferandeachkindofreject首ldaccordingtoinfectivematerialprocess.9.Donotmixreagentswiththosefromotherlots.Storageandvalidity1．Storage：2-8℃.2．validity：sixmonths.[详细]

  2018-11-16 10:02

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• 鱼白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒使用说明书

  鱼白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼白细胞介素2（IL-2）水平。用纯化的鱼白细胞介素2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鱼白细胞介素2（IL-2）浓度。鱼白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（320ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。鱼白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。160ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液80ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液40ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液20ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液10ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。鱼白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。鱼白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2019-01-02 10:00

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• 鸡白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒使用说明书

  鸡白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒使用说明书[详细]

  2024-09-15 18:32

  选购指南

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• 人白细胞介素2（IL-2）ELISA检测试剂盒 使用说明书

  人白细胞介素2（IL-2）ELISA检测试剂盒 使用说明书[详细]

  2014-05-30 00:00

  安装说明

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• 鸡白细胞介素2(IL-2) ELISA试剂盒实验使用说明书

  鸡白细胞介素2(IL-2) ELISA试剂盒实验使用说明书 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。[详细]

  2023-09-13 08:42

  应用文章

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• 人白细胞介素2(IL-2) ELISA试剂盒实验使用说明书

  人白细胞介素2(IL-2) ELISA试剂盒实验使用说明书 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。[详细]

  2023-09-13 08:42

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• 猪透明质酸（HA）elisa试剂盒使用说明书

  猪透明质酸（HA）elisa试剂盒使用说明书[详细]

  2015-04-14 00:00

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