GX液相色谱仪注意事项
GX液相色谱仪一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。GX液相色谱仪以它分辨率高、分析速度快和应用广泛的优点倍受仪器分析工作者的青睐,广泛地应用于医药卫生、环境监测、食品检测等领域。
GX液相色谱仪使用注意事项
1、流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。
2、流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。
3、不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。
4、使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。
5、长时间不用GX液相色谱仪,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相(如甲醇等),因为纯水易长霉。
6、每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。
7、C18柱不能进蛋白样品,血样、生物样品。
8、堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。清洗方法;①以异丙醇作溶剂冲洗:②放在异丙醇中间用超声波清洗;③用10%稀硝酸清洗。
9、气泡会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。
10、如果进液管内不进液体时,要使用注射器吸液,通常在输液前要进行流动相的清洗。
11、要注意柱子的pH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。
12、更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗,然后插入新的流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。
GX液相色谱仪使用中常见问题
1、色谱柱中的流动相是否会会排干的问题:
不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相,泵将溶剂瓶中的流动相吸干了,GX液相色谱仪系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗?事实上,如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气,泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体,而不能输送空气。
2、色谱柱变干的问题:
可能发生的原因有忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样,整个色谱柱干涸的情况不太容易发生,多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了,因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。
即使色谱柱真的变干了,也不一定就不可救药了。可以尝SY一种完全脱气的、表面张力低的溶剂(如经氦气脱气的甲醇)冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面;已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。GX液相色谱仪色谱柱大约需要(以1mL/min的流速)冲一个小时或更多的时间被彻底浸润,恢复到正常状态。
3、使用PEEK管路和接头需要注意以下问题:
如果经常需要改变流路或更换不同品牌的色谱柱,使用PEEK材料制成的管路和接头会非常方便。PEEK管路容易连接;PEEK接头不仅无需工具,手拧即可固定,而且容易调节锥箍之外的管路长度,方便与不同品牌或规格的色谱柱相连接。
使用此类材料的管路需要注意的是:PEEK对卤代烷烃和四氢呋喃的兼容性不好。虽然未观察到上述溶剂溶解PEEK材料的明显迹象,但PEEK遇到上述溶剂会变脆。另一个西药考虑的因素是压力限。不锈钢管可耐受6000psi的压力,但PEEK管只能耐受近4000psi(但多数GX液相色谱仪应用系统压力不会超过3000psi)。
使用PEEK接头时则无需担心接头耐溶剂性能,因为接头几乎或很少与溶剂直接接触。但手拧固定的PEEK接头压力限低于不锈钢管,因而压力太高时,可能会使接头在管路上滑动而产生死体积或漏液。
4、预防液相泵的故障:
处于良好操作状态的泵,应该能使色谱图上的基线平稳;保留时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,对流动相进行过滤和脱气。
下面列出预防GX液相色谱仪泵故障的几项措施:
①用高质量试剂和HPLC级溶剂;
②过滤流动相和溶剂;
③脱气;
④每天开始使用时放空排气,工作结束后从泵中洗去缓冲液;
⑤不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中;
⑥定期更换垫圈;
⑦需要时加润滑油;
⑧查阅有关泵操作手册中的其它建议。
⑨为了使GX液相色谱仪故障发生后尽快 排除,平时应常备密封、单向阀(入口与出口)、泵头装置、各式接头、保险丝等部件,以及更换工具。
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