PCR的类型

聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的Zda特点，是能将微量的DNA大幅增加。以下是PCR的类型，下面就让小编带你了解一下吧。

1.reverse PCR

两个引物之外的DNA片段是由反向的互补引物来扩增的，扩增某个已知DNA片段两边的未知序列。

在扩增未知序列之后，可以对其分析，例如可以对连接已知DNA片段的序列进行探索。被用来克隆只知道部分序列的全长cDNA，对基因文库的插入DNA进行扩增。对基因组文库进行建立。

2.不对称 PCR

目的：扩增使得特异长度的单链DNA产生。

方法：采用限制性与非限制性两种不同浓度的引物，0.01:0.5微米是它们的Z佳比例。限制性引物的量是关键。

用途：

（1）研究基因组DNA结构功能

（2）核酸序列测定的模板的制备

（3）杂交探针的制备

3.多重 PCR

在一个反应体系中，对两个以上的引物进行使用的PCR，被叫做多重PCR。多个PCR产物的产生是它的结果。其被用来对特定基因序列的存在或缺失进行检测。

4.real-time PCR

该技术的定量功能是通过在传统PCR的基础上将荧光标记探针加入来实现的，在PCR扩增过程中，每一轮循环产物的累积荧光值是通过特定设计的PCR仪器来检测的，从而能够对模板的起始浓度进行很好的推算。

探针设计的要求：

（1）和引物与模版结合的稳定程度相比，探针与模板结合的稳定程度要更加的高，所以探针的Tm值至少要高于引物的Tm值5摄氏度。

（2）防止和引物发生重叠或者杂交。

（3）GC碱基的含量应当在40％-60％，防止单核苷酸序列的重复。

（4）探针的长度应当在20-40个碱基之间，从而使结合特异性得到保证。

除此之外，实验的结果会受到探针和引物的距离或者探针的浓度或者探针与模板序列的同源性的影响。