转膜仪问题、原因和注意事项

转膜仪是用来转印蛋白的仪器。电泳转印为转移蛋白Z常用的方法，该技术有效、迅速，并且使得蛋白在凝胶中保持高分辨率。在凝胶中向印迹膜载体转印分离的蛋白质的过程，即是电泳转印法。因为此技术往膜上转印蛋白GX、快速和准确，并且能够使得蛋白在凝胶中保持高分辨率。，因此在转移印迹技术中得到广泛的应用。

问题

问题：

转移效率不高。

原因：

在凝胶依然留有分子。

1.凝胶浓度太大。

2、转移缓冲液中的甲醇，从凝胶中洗掉阻滞蛋白，将甲醇除去，那么使转移效率提高，然而却使得与硝化纤维的结合效率下降。

3、在凝胶中沉淀蛋白，为了使转移效率提高，使用含SDS的缓冲液。然而却对某些抗体的结合反应产生影响和使得与硝化纤维的结合效率下降。

4、转膜时间偏短。

5、缓冲液的pH不在等电点周围，电荷不是Z大，缓冲液改成适合pH的。

6.滤纸太干。

7.电路错误。

移物丢失、弥散

3、若多张膜一次转移，这种影响将会产生。

4、电压过高

1、膜与凝胶结合不紧。

2、凝胶没有完全平衡。

注意事项

1、不提倡转移过久的时间，时间过久会导致仪器会过热,如果转移高于2h，那么将会烧毁仪器。

2、电源要求。Trans--Blot8cel1请不要使用Mode1250/2.5power supply压器，要使用微电脑控制的Mode200/2.0o1y压器(编号:165-4761和165-4762),或者Model1000/500powesupply稳压器(编号:165-4710和165-4711)。

3、环境温度高于50摄氏度，请不要使用该仪器。

4、电源极性不要弄错。不然，将会被腐蚀不锈钢电极板，此时应当使用温和的清洗剂对电极进行清洁。

5、该仪器电压应当低于25v。不然将会烧毁电极。

6、只有在特殊的情况下，才能够对转移缓冲液的pH值进行调整。操作应当根据使用说明来进行。无故对转移缓冲液的pH值进行调整，会降低缓冲液的电阻。Model200/2.0power suppl1能够使较好的监控电阻得以确保，使合适的电源被提供。