本生阐述：细胞冻存管应如何解冻?

　　细胞冻存管应如何解冻? 可能原因：

　　(1)胰蛋白酶消化过度

　　(2)支原体污染

　　(3)消化液或培养液配制错误、过期储存、储存不当

　　(4)细胞老化(如传代细胞已汇合导致失去贴附性)

　　接种细胞起始浓度太低或太高 解决办法：

　　1. 准备一个培养容器，内装合适体积的适宜培养基，并使其温度和pH与建议的相称 。

　　2. 在37℃或该细胞系正常生长温度水浴下通过轻柔摇动迅速溶解冻存管(约2分钟);

　　3. 管中内容物溶解后立刻将冻存管移到超净工作台内，并用70%酒精消毒表面防止污染，注意无菌操作。

　　4.  拧开冻存管盖，将管中内容物转移到已装有少量培养液的无菌离心管中稀释，离心(一般125g，10分钟)，弃去上清并用1~2ml培养基重新悬浮沉淀细胞，然后转移细胞悬浮液到培养容器内混合均匀。注意：如果冻存液中含5% DMSO，则不必离心，只需用15ml培养液悬浮即可。

　　5.  24小时后检查培养情况，如果需要的话进行扩传。有些细胞系(比如杂交瘤细胞)从冻存状态恢复需要几天时间。 实际上，一些杂交瘤细胞在天培养液中出现死亡细胞并产生许多细胞残骸。许多细胞冻存后活力下降并在融化后24小时到一个状态。此后细胞将恢复并进入对数生。细胞复苏过程不是很难，主要是速溶这步很关键。再有，细胞复苏的状态如何，较大程度上取决于细胞冻存时的操作。还有一点，细胞也是有思想的，你对他好，关心他照顾他，他也不会让你失望的。

      注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师

　　细胞冻存管本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。