今天小编为大家分享一篇来自南京师范大学王琛教授课题组有关SERS技术在细胞领域的研究成果,希望对您的科学研究或工业生产带来一些灵感和启发
结果分析
作者利用γH2AX作为限制靶点的特性,构建了一种基于小尺寸(15nm)金纳米探针的γH2AX免疫传感器,探针以4-巯基苄腈(4-MBN)修饰的15nm GNPs为增强颗粒,PEG2000为稳定链,TAT为穿透肽,γH2AX单克隆抗体为探测识别物,建立为抗-γH2AX@GPMT的SERS传感器。
实验时通过TAT穿透肽的小颗粒和核靶向功能进入细胞核,将构建的SERS细胞传感器与药物一起孵育。若药物没有遗传毒性探针以分散状态分布,拉曼信号弱。相反,如果药物具有遗传毒性发生DNA损伤,产生γH2AX的局部表达,诱导探针进一步免疫识别和聚集,在原位构建增强热点,产生高强度拉曼信号实现遗传毒性鉴定。
结论
本研究以γH2AX为细胞核内定向靶点,突破了SERS探针进入细胞核效率和信号增强因子之间的局限性。构建了一种基于GNP探针的γH2AX免疫传感器来评估药物遗传毒性。该传感器具备TAT膜穿透性和核靶向功能,使小颗粒探针能够穿过核孔并成功进入细胞核。该探针进入细胞核内后,GTIs诱导DNA损伤和γH2AX局部过表达,导致原位构建增强热点并产生强拉曼信号,进一步增强了探针的免疫识别性能,解决了小探针增强性能差和大探针入核效率差的矛盾难题。本文所设计SERS探针可原位分析细胞核内遗传毒性,为药物遗传毒性筛选提供了一种新方法,也为细胞核内原位实时检测提供了实验灵感。
南京师范大学王琛教授课题组简介
王琛,南京师范大学化学与材料科学学院教授,博士生导师,国家优秀青年科学基金获得者(2020年),江苏省“青蓝工程”优秀青年骨干教师、中青年学术带头人,南京师范大学中青年领军人才;南京师范大学本科、硕士,2011年博士毕业于南京大学化学化工学院生命分析国家重点实验室,2012-2016南京大学从事物理学博士后,2016-2017年麻省理工学院(MIT,美国)访问学者。至今,在Angew. Chem. Int. Ed., Sci. China Chem., Nano lett., ACS Nano, Anal. Chem.等学术期刊发表研究论文60 余篇;参编英文图书 《Nanobiosensors: From Design to Applications》(Wiley);主持多项国家自然科学基金、江苏省重点研发、江苏省自然科学基金等项目;担任Chinese Chemical Letters期刊编委,中国分析测试协会青年学术委员会委员,江苏省材料学会副秘书长。
文章信息
本文以“Confined Target-Triggered Hot Spots for In Situ SERS Analysis of Intranuclear Genotoxic Markers”为题发表在Analytical Chemistry上,中国药科大学韩凌飞为第一作者,南京师范大学王琛教授和中国药科大学柳文媛教授为通讯作者。
本研究采用的是北京仪器有限公司RTS2 多功能激光共聚焦显微拉曼光谱仪,如需了解该产品,欢迎咨询。
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