直播预告 | 核酸第二期-寡核苷酸的分析表征以及实验室仪器验证

核酸系列 · 第二期研讨会

寡核苷酸的分析表征以及实验室仪器验证

寡核苷酸的分析技术挑战

寡核苷酸具有较强电负性，分子结构不稳定且容易降解，因此为了达到提高稳定性和增加结合亲和力等目的，寡核苷酸药物一般需要经过化学修饰。寡核苷酸药物曾因为安全问题和递送系统问题陷入技术发展的低谷，提高其稳定性和靶向性是寡核苷酸药物的技术发展方向之一。

在第 一期研讨会寡核苷酸的纯化策略与工艺开发中的过程分析，我们了解到寡核苷酸的合成、化学修饰和分离纯化是一个复杂的多步骤过程。在这些步骤中，分析技术如同药物开发过程的眼睛，掌握寡核苷酸的准确分子量、含量、纯度以及杂质等信息对各步骤的工艺优化有着指导性的意义。同时这些工艺过程也引入新的杂质，给寡核苷酸药物的纯度和杂质分析增加了难度。

基于高分辨液质系统的寡核苷酸分析解决方案

目前寡核苷酸的分析存在很多挑战，特别是以液相质谱为中心的方法仍然存在着准确度精密度低、重复性差和灵敏度低等诸多技术问题。在早期的寡核苷酸研究过程中，偏重于分子量的快速鉴定以及定量分析，常规分辨率的液相质谱可满足应用需求。而核酸序列作为寡核苷酸药物的关键质量属性，其正确性会直接影响药物的有效性与安全性。在质量研究和杂质分析等需要深度分析和表征的阶段，高分辨液相质谱可以进行核酸修饰和杂质的定性定量分析，以及核酸序列确认等更加深入的表征分析工作。

以往，寡核苷酸的杂质鉴定和测序确认是一个缓慢而费力的过程。在第 70 届 ASMS 质谱与相关专 题会议上，安捷伦科技宣布推出 MassHunter BioConfirm 12.0 软件。这款软件可支持安捷伦高分辨率液质联用系统生成的数据，用于寡核苷酸纯度分析和序列确认。这套稳定快捷且易于使用的工作流程，可用于寡核苷酸的各种常规分析，包括鉴定全长产物和潜在杂质，MS/MS 的寡核苷酸序列确认等，同时确保合规性和数据完整性，大大提升液相质谱分析方法的科学可靠性和工作效率。

基于毛细管电泳技术平台的寡核苷酸分析解决方案

Oligo Pro II 系统将毛细管凝胶电泳与紫外检测相结合，可实现 ssDNA 和 ssRNA 的高分辨分离和直接检测。Oligo Pro II 系统专为高通量寡核苷酸分析而设计，可完成每天数百个样品的分析。60 nt 以内的分辨率可达到 n-1，提供 12、24 或 96 规格的毛细管阵列以扩展通量。

Oligo Pro II系统

片段分析仪系统

片段分析仪系统利用自动化平行毛细管电泳实现了可靠的核酸质量控制。凭借其独特设计和直观功能，通过自动执行关键步骤（如凝胶上样和样品注入）解决常见的质控瓶颈，提高了实验室效率。小 RNA 试剂盒专用于 microRNA 和小 RNA 的质量控制。小 RNA 分子量标准品包含 15 到 200 nt 的 6 个片段，可实现小 RNA 和 microRNA 准确精密的定量分析和分子量测定。专注 200 nt 的小范围可以使 microRNA（10 到 40 nt）和小 RNA（40 到 200 nt）的各个区域放大，从而实现高分离分辨率和每个区域的详细分析。

安捷伦 CRISPR 解决方案

安捷伦凭借领先的 Oligo RNA/DNA 合成技术，为客户提供一系列高品质的 CRISPR 产品，满足客户在细胞/基因治 疗、诊断、药物筛选和科研等领域的应用。

化学合成的single guide RNA: SureGuide sgRNA

安捷伦在 CRISPR sgRNA 合成方面有两个独特优势：专 利的 TC-RNA 合成技术，可以合成更长的sgRNA，长达 164 mer；专 利的 sgRNA 化学修饰技术，可提高向导 RNA 在各种细胞类型中的效率、稳定性和特异性。（美国专 利号：US 2016/0289675 A1）。

SureGuide CRISPR DNA 文库

安捷伦独特的 SurePrint 合成技术，确保合成的 Oligo 文库错误率可低至 1/500 nt – 1/1000 nt。文库类型包括可直接包装，可直接克隆，及 Oligo 文库，用户可根据自己的需求选择合适的文库类型，并可以灵活定制。

基于生物制药实验室分析仪器确认与验证的解决方案

随着越来越多核酸药物研发项目从早期研究进入临床研究阶段，实验室的合规越来越需要重视。《药品记录与数据管理要求》中二十三条规定, 采用电子记录的计算机（化）系统验证项目，应当根据系统的基础架构、系统功能与业务功能、综合系统成熟程度与复杂程度等多重因素，确定验证的范围与程度，确保系统功能符合预定用途。该法规条文，明确提出了计算机化系统验证（CSV）必须开展，且应根据药研实验室标准流程打造，围绕“人机料法环”，依据 GAMP® 5 指南开展并最 终通过 CSV 验证。安捷伦验证启始工具包和咨询服务可提高实验室自动化水平并加快软件验证。

8月4日，安捷伦技术专家和合规专家将针对安捷伦基于液质系统和自动化电泳等多技术平台，以及生物制药实验室仪器确认与验证等解决方案一一在云端研讨会中展开讨论。安捷伦核酸解决方案系列·云端研讨会诚邀大家一起探讨核酸领域的前沿发展和技术挑战，第二期研讨会寡核苷酸的分析表征以及实验室仪器验证将于 8 月 4 日下午两点开始，欢迎线上交流讨论，赢取知识好礼！

本书第 一版由Thomas Kramps和Knut Elbers共同编写，译本由军事科学院军事医学研究所王升启研究员主译，科学出版社2020年出版。本书第 一版包含五个部分，RNA疫苗的简介、自复制RNA载体、非复制mRNA载体、RNA疫苗的佐剂和递送、RNA疫苗临床前和临床药物开发，详细介绍了RNA疫苗研究过程中涉及到的实验方法和操作技术，是一本RNA疫苗研究方面的百科全书，相信能够为RNA疫苗研究者提供较全面的参考。