蛋白纯化折腾半个月没结果，快放假了老板才把原因告诉我！

眼瞅着十一假期越来越近，原本计划做好实验放飞自我，数据却一直出不来，别人做蛋白纯化几天搞定，我做蛋白纯化只能靠手动，半个月反反复复结果依旧让人...

只好请教老板，如何快速搞定蛋白纯化实验（文末有法宝，亲测管用！！！）

我：「老师，我选择的是凝胶过滤色谱法，我的目标蛋白电荷密度并不高，上样的量也不大，但分辨率就是不高，而且有好多成分我还是想回收一下但做不到。 」

老师：「分辨率不高这个问题，首先样品与洗脱料液比应该保持一致，其次要再检查一下色谱柱装填是否匀实了，这些都会影响分辨率。层析液全收集这个事儿是这样，咱现在的仪器通路是有限的，只能收集这么多，你就尽量挑你关注的来吧。」

我：「行吧，那实验过程中会出现浑浊现象，这个是什么原因呢？」

老师：「有可能是你实验的蛋白自身不稳定，需要检查缓冲体系是否适宜，环境是否温度太高，你可以加入肌氨酸钠，迅速使蛋白变性，浑浊现象会消除。」

我：「老师，还有，还有问题，这个仪器镍柱好像堵了，每次开机要启动好久，基线还漂移的很过分，平衡的时间越来越久，一上午都耗在等机子上了。」

老师：「这个机器的镍柱是刚换的，如果你样品杂质颗粒处理的比较好，液料比也合适的话，就要看纯化上清时蛋白质有没有产生絮状沉淀，尽快加入 DTT 还原。至于基线花长时间都不平的问题啊，同学们给我反映很多次了，但仪器用的太久了，我也很无奈。」

我：「老师，我以前一直以为是我没有找到软件，怎么自动换算 AU 值，结果发现大家都是手动自己算的。」

老师：「咱的这台仪器都『老当益壮』这么久了，电脑也卡，启动也慢，啥都得手动，但是换一台全自动进口的实在是太贵，公共实验室地方紧紧巴巴，便宜一点的吧，全是手动也不划算，跟学院申请了很多次了，经费也有限，确实挺为难的。」

我：老师还是厉害啊，但是 3 天要搞定实验，实在有点为难，要如何才能搞定呢？

老师：虽然我平时扣扣搜搜的，那也是没办法，这次我给你们特别准备了一台全自动蛋白纯化仪，完全满足你们日常使用，胜任常规蛋白纯化~

我：全自动！！！

老师：你赶紧扫下二维码去试 用吧，用的好就买，这台仪器费用还可以，为师还有些经费能支持。

这台能入我老板法眼的蛋白纯化仪究竟有何来历：

Blupadstart 蛋白纯化系统

Blupadstart 蛋白纯化系统，小巧紧凑的一体化设计，能够开展各种常用的纯化技术，如亲和层析、离子交换层析、脱盐和缓冲液交换，以及凝胶过滤，通过 Blupadstart、预定义模板或自定义方法实现全自动多蛋白纯化，操作界面简洁，流程直观，满足科研需求的同时让一切简单起来：

• 开机即可检测：紧凑型一体机，配备高清 10.1 寸触摸屏点击运行，开机基线即可平衡，无需预热；

• 检测灵敏：标配 260/280 mm 固定波长，5 万小时寿命 LED 冷光源，步进电机程序控制检测系统；

• 软件功能强大：中英文操作界面可互换，UV、梯度谱线、温度电导率、收集试管号同屏幕显示，可实时监测，范围广、精度高，并可进行补偿；

• 独立运行的馏分收集器：XY 轴模式，支持全收，按峰收集，美国进口进样阀和三通收集阀，支持 Load、Inject、Waste 功能；

• 实时修改运行参数：高精度恒流泵系统，可提供连续、稳定的精 准流速（流速范围 0.1～10 mL/min，最 大耐压压力 3bar），支持实时在线修改梯度和流速；

• 兼容所有层析填料：Size Exclusion（SEC）－分子筛、凝胶过滤，（HIC和RP）－疏水和反相均可完  美适应

• 数据实时保存：实验数据支持 Excel 导出，实时自动保存，可防止意外断电导致的数据丢失。

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内容策划：王三三、刘果

内容审核：嘉鹏市场部、朱晓芳

题图来源：站酷海洛