上新 | 突破跨膜蛋白制备技术难题，Claudin18.2-VLP全长跨膜蛋白隆重亮相！

跨膜蛋白是嵌入细胞膜磷脂双分子层中实现细胞内外跨越的一类蛋白，是细胞膜的重要组成部分。在物质运输、信号转导和细胞间识别等多种细胞功能中发挥着重要作用。人类的许多疾病都与这些膜蛋白功能异常有关，因此它们成为理想的药物作用靶点。目前以跨膜蛋白为药物靶点占现阶段己知药物靶点的60%以上。而针对抗体药靶点，膜蛋白几乎占90%以上。以跨膜蛋白为靶点的创新药研发一直是医药领域的研究热点。

抗原制备是研发抗体药候选分子的首要问题，然而体外制备有活性的跨膜蛋白是公认的技术难题。跨膜蛋白制备难点：

具有全长完整结构的多次跨膜蛋白在药物研发中具有重要意义。为助力跨膜蛋白靶点药物的开发，翌圣生物开发出基于哺乳细胞的病毒样颗粒（VLPs）表达跨膜蛋白技术平台,该技术平台所制备的多次跨膜蛋白，具备完整的生物活性。

  VLPs（Virus-Like Particles）是由多个病毒的一种或者多种衣壳蛋白自动组装形成的纳米级别的微小颗粒。VLPs颗粒不含病毒核酸，不能进行自主复制，安全性高，具有与病毒颗粒类似的整体结构。细胞在感染病毒后会从细胞膜表面通过一种类似细胞膜出芽的方式分泌100-300nm左右的纳米膜颗粒，包膜VLP可通过这种“出芽”的方式带走含有目的蛋白的细胞膜，从而获得可溶形式的多次跨膜蛋白。

VLP技术平台可以通过各种宿主细胞系统生产，如昆虫细胞、哺乳动物细胞和植物细胞。与昆虫和植物细胞系统相比，哺乳动物细胞表达系统更接近人类细胞的生理环境，因此在蛋白质翻译、修饰和折叠方面具有更高的保真度。YEASEN基于哺乳动物细胞表达系统的VLP技术平台改进了生产工艺，可以显著提高表达水平，降低细胞毒性。

翌圣生物搭建了基于HEK293表达系统的包膜VLP技术平台，能够将目的膜蛋白完整展示在VLP表面，使这些复杂的膜蛋白转变为可溶性的、高浓度的蛋白用于抗体免疫和筛选。YEASEN已成功开发出一系列VLP全长多次跨膜蛋白产品,包括Claudin 18.2、GPRC5D、CCR8、CD20及CLDN18.1等多个热门靶点。

图1.VLP展示目标蛋白的过程

平台优势

（1）ELISA验证Human Claudin18.2生物活性

Figure 2. Immobilized Human CLDN18.2 VLP at 5 ug/mL (30 uL/well) can bind IMAB362. The EC50 was approximately 0.008401 μg/ml.

（2）ELISA验证Human GPRC5D生物活性

Figure 3. Immobilized Human GPRC5D VLP at 5 ug/mL (30 uL/well) can bind Monoclonal Anti-Human GPRC5D antibody, The EC50 was approximately 0.006247 ug/ml.

（3）DLS验证Human A2AR纯度

Figure 4. The mean peak Radius of VLP is 117.7 nm with more than 95% intensity as determined by DLS（dynamic light scattering）.

（4）ELISA 验证Human CD20 生物活性

Figure 5. Immobilized Human CD20 VLP at 5 ug/mL (30 ul/well) can bind obinutuzumab(P214063), The EC50 was approximately 0.006752 μg/ml.

Figure 6. Immobilized Human CD20 VLP at 5 ug/mL (30 ul/well) can bind Anti-CD20 / MS4A1 Reference Antibody (divozilimab), The EC50 was approximately 0.01698 μg/ml.