SCIEX质谱在二甲双胍基因毒杂质分析中的解决方案

基因毒性杂质（GTIs, Genotoxic impurities）是药物合成、配置及储存过程中可能的中间体，反应产物或降解物，其能直接或间接损伤细胞DNA，甚至产生致突变和致癌作用，因其毒性较强对用药安全性产生了极大的威胁。自2018年从雷尼替丁及二甲双胍中相继发现亚硝胺类杂质NDMA（N-亚硝基二甲胺），亚硝胺类基因毒性杂质也受到了极大的关注。为防范类似事件再次发生，严格控制药物的用药安全，监管部门陆续发布了关于药物成分中基因毒性杂质允许限值的指导原则以确保药品的安全。对此，SCIEX持续关注并相继出台多种基因毒性杂质检测方案。

二甲双胍是一种处方药，临床主要用来控制二型糖尿病人的高血糖，由于病人用药周期较长，其中基因毒类杂质的危害也更大。本方案使用LC-MS/MS法同时测试二甲双胍不同剂型中8种亚硝胺类杂质的含量，该方法在满足FDA对8种亚硝胺类杂质灵敏度要求[1] 的同时可排除二甲基甲酰胺(DMF)对NDMA的干扰。另外，同时检测杂质个数及专属性也优于欧洲药典5种亚硝胺方法[2]。

SCIEX Triple Quad™ 4500系统

用于二甲双胍中8种亚硝胺类基因毒性杂质的检测

SCIEX提供了SCIEX ExionLC™系统 + SCIEX Triple Quad™ 4500系统检测二甲双胍中8种亚硝胺杂质的方法，该方法灵敏度高、选择性强、重现性好，通过了多种剂型回收率验证且符合法规要求。

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灵敏度

8种亚硝胺杂质定量限低于1 ng/mL，完全满足法规对基因毒杂质灵敏度的要求。

图1，1 ng/mL 对照品中8种亚硝胺化合物提取离子流图

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标准曲线

8种亚硝胺杂质在线性范围内线性关系良好，相关系数大于0.997。

表1， 8种基因毒杂质的线性范围

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回收率

8种亚硝胺杂质在不同剂型二甲双胍中回收率均在85%-115%之间，方法通用性好、抗基质干扰能力强。

表2 ，8种基因毒杂质回收率结果

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专属性

本方案可分开二甲基甲酰胺(DMF)和NDMA，排除假阳性，确保检测结果更准确。

图2，NDMA杂质及DMF干扰可完全分开

参考文献

[1]. Liquid Chromatography Electrospray Ionization High Resolution Mass Spectrometry Method for the Determination of Nitrosamine Impurities in Metformin Drug Substance and Drug Product，2020,03, U.S. FOOD & DRUG Administration.

[2]. European pharmacopoeia n-nitrosamines in active substances, Council of Europe, 2020. European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare (EDQM).