师姐,我的细胞怎么又飘起来了?怎么办?
师兄,细胞培养基变黄了,是不是没救了!
在生命科学的实验室里,“细胞培养” 堪称最大的“玄学”之一,上面这些崩溃的呼喊,相信不少小伙伴都喊过。
细胞就像身价千万的 “金贵宝宝”,轻易就能左右我们的心情。实验数据好坏、心情的喜怒哀乐,全被它拿捏得死死的。
然而,同样的细胞、同样的操作步骤,为什么别人的细胞活力满满、茁壮成长,自己的却 “体弱多病”、支离破碎?别慌,细胞养成是有窍门的,今天就给大家分享细胞成长秘籍,带你避开那些细胞培养路上的 “大坑”!
先来说说细胞培养里的 “王牌选手”—— 血清。它可是给细胞提供营养的关键,不过在使用血清的时候,这三大误区一定要注意:
误区一
血清浓度越高越好?大错特错!
常见场景:“细胞用10%血清长得不好,加到20%总行了吧?” 结果,细胞状态越来越差,简直是 “反向生长”。
真实情况:一般来说,常规细胞培养用10%的血清浓度就足够了。要是原代细胞,可以适当提高到15% 。
但血清浓度太高,反而可能让细胞 “跑偏”,比如干细胞,可能突然就改变形态开始分化了。建议大家选择高品质的新西兰/澳大利亚来源的胎牛血清,营养丰富还安全,给细胞更好的呵护!
误区二
血清能随便换批次、换品牌?别乱来!
常见场景:“这瓶血清用完了,换个牌子试试,说不定有惊喜!” 结果,细胞直接 “摆烂”,根本不配合。
真实情况:不同批次的血清,成分多少都有差异。想更换批次或者换品牌,可不能直接上手就换,要慢慢来。最好用新旧血清混合培养2-3 代,让细胞慢慢适应。这里给大家推荐HyClone胎牛血清,它的批次稳定性高,而且常备现货,不用担心缺货的问题!
误区三
血清能反复冻融?可别这么干!
常见场景:“血清得低温保存,这次没用完,冻起来下次接着用!” 想法很美好,现实却很残酷——细胞状态肉眼可见地变差。
真实情况:反复冻融血清,会让血清的活性大打折扣,还会产生一堆蛋白沉淀,营养物质也跟着流失了。正确做法是把血清分装成小份,比如装到50 ml的离心管里,用一管取一管,方便又安全。另外,已经化冻的血清要尽快用完哦,别让细胞 “饿太久”!
说完血清,再给“实验室小白”们提个醒,细胞宝宝 “娇气得很”,下面这些“踩雷”行为千万别有:
行为一
细胞消化全凭心情?No!
常见场景:“细胞全都飘起来了,这下肯定解离好了!” 结果一看,细胞全碎成渣渣了,简直“欲哭无泪”。
真实情况:用胰酶消化细胞的时候,一定要在显微镜下盯着。看到细胞变圆了,就赶紧终止消化。要是等到细胞全飘起来,那就消化过度了。推荐大家试试HyClone HyrTryp消化液,它很温和,不会伤害细胞,尤其是那些 “娇贵” 的细胞,用它再合适不过了。
行为二
吹打细胞像摇奶茶?No!
常见场景:“使劲吹打,多吹几次,细胞团肯定能散开!” 结果事与愿违,细胞不但没散开,反而坨成一团,就像奶茶里的珍珠一样。
真实情况:吹打细胞的时候要轻柔,千万别吹出一堆气泡。因为气泡产生的剪切力会伤害细胞,而且破碎细胞释放出来的核酸会缠在正常细胞上,让细胞更难分离,“越帮越忙”。
细胞培养门道多,细节不注意,实验就 “凉凉”,科研经费也跟着打水漂。想知道更多细胞培养的实用小技巧吗?
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