一键“变身”：Simple Switch二维液相与并联Vanquish Duo系统一键切换助力在线深度表征

前言

随着蛋白组学、代谢组学、相互作用组学、生物制药研发及中药现代化研究的不断深入，复杂体系分离已成为分析化学研究的热点和难点之一。这些情况需要结合多种分离模式来提高系统分离能力，增加峰容量，并结合MS获取更多峰信息。尽管有些一维分离模式如离子交换、尺寸排阻等所用的流动相质谱不兼容，但带中心切割的2D-LC在组分洗脱过程中可以将目标分析物进行补集后再通过二维质谱兼容的分离模式进行峰识别和纯度确认。因此，擅长于复杂样品分析的二维或多维色谱分离及质谱前端技术已成为液相色谱发展的重要方向。有些产品需要同时使用正交色谱模式或多个测定项目来进行研究和质控，如抗体药物需要SCX/RP做电荷异构体分析和完整蛋白水平分析，或SCX/SEC做电荷异构体分析和聚集体分析；中药配方颗粒做特征图谱与含量测定等。这就需要至少两台液相色谱来同时工作以提升效率。

赛默飞Simple Switch二维液相与并联Vanquish Duo系统可以在两种工作模式之间进行灵活的软件辅助切换，即Trap柱或Loop环中心切割2D-LC系统与两个独立的1D-LC系统。系统一经搭建好管路，无需重新搭建即可实现两种工作模式的切换，是市场唯 一的解决方案。

一、并联Vanquish Duo系统

用户可利用并联Vanquish Duo系统在“同一台”液相色谱上完成相同方法或两个不同方法的分析测试任务，不再需要两台独立的液相色谱来完成两倍量的样品分析工作，如图1。并联Vanquish Duo系统的配置和流路连接见图2和图3，其中左侧色谱柱处在左侧LC，右侧色谱柱处在右侧LC，两套系统独立分析各自的样品且互不干扰。图2的系统配置了双三元泵和双针双流路自动进样器，图3的系统将双三元泵用两个独立的单泵模块来替代，真正意义上实现了“ 一台设备的外观、两套液相的应用”。

图1. 双梯度并联LC应用优势

二、Vanquish 2D-LC四种应用场景

Vanquish系统可以实现2D-LC的应用功能，共包括四种应用场景：在线固相萃取（Online SPE）、Loop环单/多中心切割、 trap柱中心切割、Simple Switch二维液相与并联Vanquish Duo系统一键切换，见图4。目前，擅长于复杂样品分析的二维或多维色谱分离技术和质谱前端技术已成为液相色谱发展的重要方向。在线二维或多维色谱分离的实现往往需要复杂的仪器配置和管路连接，并需要软件的繁琐设置和支持等等，这些原因极大地制约了二维或多维色谱分离技术的应用。赛默飞Vanquish 2D-LC在Chromeleon软件的控制下，结合独特的阀切换技术，通过灵活的流路连接设计，可以轻松实现在线二维或多维色谱分离等高级应用，帮助用户解决复杂体系的分离难题。

图4. Vanquish 2D-LC 四种应用场景

三、Simple Switch二维液相与并联Vanquish Duo系统一键切换

2D-LC系统中配置Vanquish双针双流路自动进样器可以大大提高仪器的可用性和价值，因为其可以在两种工作模式之间进行灵活的软件辅助切换，即Trap柱或Loop环中心切割2D-LC系统与两个独立的1D-LC系统。系统一经搭建好管路，无需重新搭建即可实现两种工作模式的切换。由于使用了Vanquish双针双流路自动进样器，与使用两个单自动进样器的方案相比，Simple Switch所需的仪器模块数量和整体仪器尺寸与“2D-LC”相同。 

Simple Switch可应用的2D-LC流路设置，主要介绍以下三种：

1、用于单中心切割的Simple Switch 2D-LC系统——2D色谱柱补集，其仪器配置和管路连接见图5和图6。

图5. Simple Switch Trap Heart-Cut 2D-LC System without ¹D detection – Trapping on 2D Column

用于单中心切割的Simple Switch 2D-LC系统——Trap柱补集，其仪器配置和管路连接见图7和图8。

图7. Vanquish Simple Switch Trap Heart-Cut 2D-LC System without ¹D detection – Trapping on Trap Column

用于Loop环多中心切割的Simple Switch 2D-LC系统，其仪器配置和管路连接见图9。图9中A和B分别为右侧柱温箱加或不加上阀。如果安装了该阀，当作为两个独立的1D-LC使用时，右侧LC可以选择仅使用2D光学检测器或仅使用质谱检测器。在该系统中，左侧柱温箱上阀阀位5可以直通废液或者连接集成式馏分收集器Vanquish Fraction Collector（VFC）。当作为2D-LC使用时，一维中的某些组分含量太低，直接切入二维流路无法实现有效检测，可以通过VFC对这些组分进行多次收集实现富集后，再通过单独的右侧1D-LC进行分析。

图9. Vanquish Simple Switch Multiple Loop Heart-Cut 2D-LC System

总 结

带中心切割的2D-LC在组分洗脱过程中带有目标分析物的捕获功能，可以通过MS检测直接进行峰识别和纯度确认，尽管一维分离中的流动相是MS不兼容的。

2D-LC中配置Vanquish双针双流路自动进样器大大提高了仪器的可用性和价值，因为其在不增加仪器模块和尺寸的前提下可以在两种工作模式之间进行灵活的软件辅助切换，即中心切割2D-LC系统或两个独立的1D-LC系统。

总而言之，Simple Switch可使仪器操作更高效，并增加液相和质谱检测器的投资回报。