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一键启动——数字PCR实验

来源:贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司 更新时间:2024-06-27 13:57:38 阅读量:387
导读:一键启动——数字PCR实验


数字PCR(Digital PCR,dPCR)是一种核酸分子绝对定量技术,它通过直接计数DNA分子的个数来实现对起始样品的绝对定量。

作为基于微流控的新一代PCR技术,这三点优势让它能在一众PCR检测手段中突出重围。



绝对定量:

数字PCR能够直接数出DNA分子的个数,实现对起始样品的绝对定量,避免了传统定量PCR中相对定量的局限性。


高灵敏度:

数字PCR能够检测出低频率的突变和表达变化,提高了检测的灵敏度和准确性。


可靠性:

数字PCR采用统计学原理进行数据分析,能够降低实验误差和假阳性率,提高结果的可靠性。

从实验流程上看,数字PCR检测可分为以下四个步骤:


图一:数字PCR检测标准流程展示

随着检测通量以及实验样本处理方式的复杂度持续升级,体系制备成为了让科学家们头疼的难题,主要体现在体系配置工作量大,手工重复性差,前处理耗时长等。

为帮助科学家们在体系配置上的难题,小贝为科学家们推荐一款辅助工具——Biomek i系列自动化移液工作站。



自动化ddPCR(微滴式数字PCR)体系配置


高通量处理:

自动化ddPCR系统能够一次性处理大量样本,大大提高了实验通量,减少了人工操作的时间和误差。


图二:以多重数字PCR检测重组腺相关病毒(rAAV)病毒基因组拷贝数实验流程为例,1小时可完成6*96个待测样本的体系配置。

降低人工成本:

自动化ddPCR系统可以减少对专业操作人员的依赖,降低人工成本。


图三:自动化软件dPCR全流程自动化程序展示。标准化实验流程,全自动化完成,无需人员进行实验操作

结果保障:

可重复性,精确度高,稳定的结果输出。


图A

图B

图四:图A为自动化标准品梯度稀释试验,结果表明定量限可低至 20 拷贝/反应,检测限可至 5~10 拷贝/反应,ddPCR 方法能更好的用于标准品的定量和残留检测。

图B为 AAV 基因组滴度检测的代表性图谱,通过对 自动化AAV 样品的前处理,再通过 ddPCR 系统进行液滴生成并进行 PCR 扩增后读取液滴信号,结果表明使用 ddPCR 对病毒滴度进行检测,其结果阴阳性区分明显,易于分析,结果准确,并且相同样品不同天检测 CV 值 ≤10%。



未来数字PCR可拓展的应用领域:

精准医学:

数字PCR在精准医学领域的应用将进一步拓展,包括基因表达差异研究、拷贝数变异(CNV)研究、肿瘤治疗的伴随诊断等。通过数字PCR技术,可以实现对基因表达的精确定量,为疾病的诊断和治疗提供有力支持。

环境监测:

随着全球对生物安全和环境保护的重视,数字PCR在环境监测领域的应用也将逐渐增多。通过数字PCR技术,可以检测和监测环境中的致病微生物和污染物,为环境保护和公共卫生安全提供重要保障。

农业遗传改良:

在农业领域,数字PCR技术可以用于农作物基因变异的检测和分析,为育种工作提供有力支持。通过数字PCR技术,可以更加精确地检测和分析农作物中的基因变异,为培育高产、优质、抗病的农作物品种提供技术支持。



提供专业的软件硬件支持,以及客户应用开发来满足大家对于生命科学自动化的需求。


苦厄库尔特

关于贝克曼自动化整合部门介绍:

1

自动化整合部门位于美国Indianapolis,该部门位于Beckman质量管理系统下,并经过ISO9001认证,部门配备整合实验室,完成整合设备的研发。


2

整合部门人员包含机械、电子、软件、系统工程师,和工程师支持、项目管理人员。人员配备齐全,售前售后响应快速。

3

如有特殊功能开发,Beckman团队可协助客户在国内进行软硬件开发和测试。

*以上内容涉及设备仅适用于科研和工业,不用于临床诊断。

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贝克曼库尔特公司对颗粒特性的研究始于上世纪的四十年代。从发明电子感应区技术(库尔特原理)用于分析颗粒大小和数目开始至今半个多世纪以来,贝克曼库尔特公司一直专注于颗粒分析的研究开发与应用。其颗粒特性分析仪器已经成为当今具竞争力和独当一面的表征颗粒特性的产品!无论是对粒度的分析,还是颗粒的计数;无论是在微米-亚微米范围的测量,还是在纳米尺度内的测量;既拥有应用库尔特原理的产品,同时也拥有应用激光衍射散射原理以及动态光散射原理的产品,使贝克曼库尔特公司成为粒度分析同业的翘楚!贝克曼库尔特的产品已成为“高准确性”、“高分辨率”的代名词,在用户中享有盛誉。在粒度分析行业发展中一直发挥着深远

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