2021年2月26日,国际学术期刊 Science 在线发表了ZG科学院分子细胞科学创新ZX(生物化学与细胞生物学研究所)周斌研究组的研究成果“Proliferation tracing reveals regional hepatocyte generation in liver homeostasis and repair”。在该项研究中,他们建立了一种检测细胞增殖的新技术—ProTracer(Proliferation Tracer)。该技术具有长时间不间断检测细胞增殖的能力,可以特异性标记某种特定细胞谱系的细胞增殖,并且实现了不牺牲样品直接活体检测细胞增殖,从多个维度刷新了细胞增殖检测的能力和范围,可以广泛应用于不同组织器官细胞增殖的检测,为发育生物学、肿瘤学、神经科学和再生医学等众多领域的研究提供强大技术支撑。研究人员利用ProTracer技术发现了成体肝细胞的来源,为肝脏再生及疾病临床ZL研究提供了新思路。
该文中的肝脏样本采用了SHIELD方法进行组织透明化,并使用锘海LS18光片显微镜对样品进行3D成像。
LS18 light-sheet microscopic image showing donut-like tdTomato signals in liver
SHIELD是基于CLARITY的改进方法,研究者从蛋白质构象保护出发,从上百种化学试剂中筛选出了P3PE,其环氧化作用很好的保护了组织内源性蛋白质、荧光蛋白,同时具有降低自发荧光等优异性能,SHIELD方法代替了原有的丙烯酰胺固定,摒弃了凝胶包埋的步骤,固定完的样品可直接进行透明化。SHIELD技术可实现脑、心、肝、脾、肺、肾、肠和脊髓等多种组织器官的透明化,比被动式透明化快一个数量级(数天VS数周)。对蛋白结构及荧光的保存可达数周的稳定性。
1.SHIELD固定试剂(锘海代理)
操作简便,无需包埋步骤
凝胶单体交联条件温和
优异的蛋白、核酸、荧光等的保护作用
2.SmartClear II Pro 全自动组织透明化系统(锘海代理)
一键式简易操作,快速有效组织透明化
保护组织结构以及荧光信号完整
适用于脑、心、肝、脾、肺、肾、肠和脊髓等多种组织器官的透明化
3.SmartLabel 主动式标记系统(锘海代理)
一键式简易操作,快速、均匀的免疫染色
保护组织结构以及荧光信号完整
适用于对完整大脑、心脏、脊髓等多种组织器官的免疫染色
锘海LS18光片显微镜—— 专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统
针对大组织样品的3D荧光成像,采用与西湖大学高亮(平铺光片技术发明人)实验室共同研制的光片显微镜Nuohai LS 18,其运用创新的平铺光片技术,克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾,从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像,广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域。
适用于各种透明化样品:
水性透明化方法:SHIELD, CLARITY,CUBIC等
有机溶剂透明化方法:PEGASOS,3/i/uDISCO,AdipoClear,Visikol等
应用方向:
神经科学/发育生物学/肿瘤学/免疫生物学/病理学/生殖医学/动物器官3D成像(脑,肾,肺,骨骼,乳腺等)/组织工程学和类器官/药效评价
锘海一站式科研服务——让科研变得更简单
组织透明化技术和光片荧光显微技术的发展,使研究者能从宏观到微观对生物组织内部的结构及生理、病理特征进行观察和功能性分析。锘海生物科学仪器(上海)股份有限公司提供完整器官的组织透明化、组织免疫荧光染色、高分辨3D显微成像以及大数据分析一体化服务,旨在通过准确、快速、多样化的一站式科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。
SCIENCE 杂志 原文链接: https://science.sciencemag.org/content/371/6532/eabc4346.full
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