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上新 | 蛋白酶K灭活太麻烦?热敏版55℃ 10分钟搞定!

来源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 更新时间:2025-05-13 16:45:15 阅读量:167
导读:攻克传统蛋白酶K应用难题,定义实验操作便捷新标杆


在分子生物学研究领域,蛋白酶K凭借卓越的蛋白降解性能,始终是核酸提取与样本裂解等核心实验步骤的关键工具。其通过高效裂解细胞并降解蛋白质,为核酸的快速释放与纯化奠定基础。然而,传统蛋白酶K在实际应用中暴露出显著的技术瓶颈:灭活过程复杂且风险高。无论是采用苯酚/氯仿抽提的多步骤纯化流程,还是高温处理引发的样本降解风险,都可能导致实验周期延长、结果重现性降低,进而影响后续数据分析的准确性与可靠性。





为突破这一技术壁垒,翌圣生物成功研发并推出热敏蛋白酶K(Thermolabile Proteinase K,Cat#14809)产品,该产品只需在55℃条件下加热10分钟即可实现完全灭活,无需额外的核酸纯化步骤,有效避免了酶残留对下游实验的干扰。例如:Thermolabile Proteinase K应用于直扩PCR、DNA&RNA建库等实验中,可省略多次纯化流程,有效降低核酸损耗,提升样本利用率;应用于甲基化DNA分析过程中,通过精准控制酶解条件,避免因过度消化导致的甲基化位点破坏,确保实验结果的准确性与可靠性。


产品简介


Thermolabile Proteinase K

Thermolabile Proteinase K(TLPK)是通过基因工程技术改造获得的重组丝氨酸蛋白酶,保持了与野生型版本相似的活性和特异性,具备广泛的切割活性,能够高效水解多种类型的肽键。在理化性质方面,TLPK展现出良好的缓冲液兼容性,可在多种缓冲体系中保持活性。其最适反应条件为pH 7.0-9.5、温度20-40℃,在此区间内能够发挥最佳效能。该酶具备优异的热敏感性,只需在55℃条件下温育10分钟即可完全热失活。


表1. 普通款和热敏款蛋白酶K特点比较











在此,我们向您推介翌圣生物全新研发的来源于毕赤酵母表达系统的Thermolabile Proteinase K(Cat#14809),该产品消化能力强、热敏性好、纯度高、残留低。数据展示如下:


消化能力强、热敏感

分别使用翌圣及进口品牌Supplier A的TLPK处理限制性内切酶PvuII后,使用处理后的PvuII对λDNA进行处理,结果显示翌圣TLPK可有效抑制PvuII活性,且55℃条件下温育10分钟可使TLPK完全热失活,对后续反应体系中的添加的蛋白无影响。


图1.消化能力与热敏感性能验证



无核酸外切酶、切口酶、RNase残留

将0.12 U TLPK分别与核酸底物孵育,并通过琼脂糖凝胶电泳分析谱带变化。实验结果表明,翌圣的3个批次TLPK均未检测到核酸外切酶、切口酶或RNase残留,为实验结果的准确性和可靠性提供了有力保障。


图2.核酸外切酶、切口酶、RNase残留结果验证



为满足多样化实验需求,翌圣生物精心推出蛋白酶K系列产品,涵盖普通型与热敏型两大品类。普通型蛋白酶K适用于常规蛋白降解场景,而热敏型产品则凭借快速热灭活特性,为下游分子生物学实验提供高效解决方案,为科研工作者提供精准适配的实验工具选择。




翌圣生物


翌圣生物科技(上海)股份有限公司成立于2014年,是一家聚焦生命科学产业链上游核心原料,从事核苷酸、蛋白、细胞和类器官四大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业。公司兼备核心技术自主研发和规模化生产能力,核心产品数量达数千种,覆盖分子克隆、qPCR、NGS、体外转录、抗体、蛋白纯化及分析、细胞培养、转染、报告基因检测和类器官等多种系列,广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。

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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

翌圣生物科技(上海)股份有限公司是一家聚焦生命科学产业链上游核心原料,从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业。核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类,广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。

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