特邀专栏 | 单细胞悬液制备仪在4类细胞实验中的应用,你了解多少?
细胞是构成生命体的基本单位,因此大部分生物学研究都以细胞为研究对象。
细胞可以来源于两种途径,一种是直接从组织或器官中分离得到的原代细胞,另一种是通过连续传代培养获得的细胞株。
由此可知从组织中分离单细胞进行原代细胞培养是极为常见的,这些原代细胞会被实验者后续运用于各种不同的实验场景。
但是目前实验室从实质组织中获取单细胞,仍存在较多问题:消化不彻底、活率一般、细胞表面抗原破坏等一系列缺陷。
单细胞悬液制备仪的出现则帮助解放了人工,极大提升获得单细胞悬液的效率,温和不刺激保留细胞原有表面抗原,提升细胞活率。具体运用场景如下:
1
类器官培养
类器官培养是一种在体外培养环境中培养和维持类似于真实器官的组织结构和功能的技术。
这种技术的目标是通过模拟器官内部的细胞相互作用和生理过程,实现对器官的研究、药物筛选和治 疗等方面的应用。
类器官培养通常涉及从组织中提取细胞,并在特定的培养基中培养和培育这些细胞。
在提取细胞的过程中,单细胞悬液制备仪可以起到非常重要的作用,通过单细胞悬液制备仪我们可以得到活性更高和数量更多的细胞,更有利于提高类器官的成活概率。
在类器官培养中,细胞可以自发地组织成三维结构,这些结构还可以表达特定的细胞标记物和功能蛋白,同时通过调整培养条件,例如氧气水平、温度和细胞密度等,可以更好地模拟器官的生理环境。
2
细胞分选
细胞分选培养是一种将特定类型的细胞从混合细胞群中分离出来,并在体外的培养环境中单独培养的技术。
这种方法可以用于纯化特定细胞群,研究其特性和功能,以及开展相关的实验和应用。
细胞分选之前需要先得到细胞悬液,这时候就可以用单细胞悬液制备仪破碎组织样本得到细胞悬液。
目前常用的细胞分选技术有两种:流式细胞术(FACS)或磁珠分选法。
这些技术基于细胞的特定表面标记物或生物学特性,通过使用特定的抗体或分子探针,将目标细胞与其他细胞区分开来。分选后,目标细胞可以被单独收集,然后在培养皿或生物反应器中进行培养。
细胞分选培养的优点是可以获得纯化的细胞群,从而消除其他细胞对实验结果的干扰,更好地研究和理解目标细胞的特性和功能。
此外,通过分选培养,可以获得足够数量的目标细胞,以进行进一步的实验和应用。
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3
单细胞测序
单细胞测序是一种高分辨率的基因组学技术,用于对单个细胞的基因表达进行全面分析。
与传统的均质细胞群测序相比,单细胞测序可以揭示细胞群中的细胞异质性和个体细胞的功能差异。
通过单细胞测序,研究人员可以识别和分类不同类型的细胞,研究细胞类型的分化和发育过程,以及细胞在不同环境或疾病状态下的响应。
此外,单细胞测序还可以揭示细胞间的相互作用和通信网络,帮助我们更好地理解细胞系统的功能和调控机制。
单细胞测序的过程通常包括单个细胞的捕获、细胞溶解和RNA提取、cDNA合成和文库构建,Z 后进行高通量测序。
而进行这些步骤的前提是实验员能成功地将组织样本解离成单个细胞,通过单细胞悬液制备仪,实验员可以高效地将组织样本转化为单个细胞的悬液,为后续的单细胞测序提供高质量的样本。
Reference:A Single Cell Transcriptomic Atlas Characterizes Aging Tissues in the Mouse
4
组织匀浆制备
组织匀浆是将生物组织破碎并转化成胶状的混合物,这种混合物可以进一步用于测定细胞质和细胞核成分的含量,提取酶和其他细胞成分以及进行其他生物学研究。
组织匀浆的过程通常包括将组织样本切碎或研磨,并在适当的缓冲液中加入酶或蛋白酶,以帮助消化组织并释放细胞,这个过程都可以通过单细胞悬液制备仪完成。
随后,样本会通过离心或过滤等方法去除未消化的组织碎片,得到组织匀浆。组织匀浆还可以用于分离细胞器、核酸或蛋白质等细胞内成分。
总的来说,单细胞悬液制备仪在各类细胞实验中具有广泛的应用。
它的高效、自动化的特点使得细胞样本的制备更加方便和可靠,为细胞学研究、生物医学研究和临床应用提供了重要的支持。
随着技术的不断进步和发展,相信单细胞悬液制备仪将在细胞领域的研究和应用中发挥越来越重要的作用。
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