CGCS 2024（第五届）国际细胞与基因治疗中国峰会暨展览会于2024年5月22-24日在南京扬子江国际会议中心召开。翌圣生物研发科学家滕以刚博士受邀参加并在会议上进行了“翌圣生物新型PEI转染试剂在AAV大规模生产中的应用”的主题报告：为我们介绍了翌圣生物自主研发的新型Ultra PEI-AAV转染试剂，该产品专为悬浮体系中制备高滴度AAV而设计；翌圣生物的Ultra PEI-AAV转染试剂以其卓越的产品性能和高转染效率，AAV病毒滴度可提升2倍左右，有效降低了AAV制备成本。
截至目前，共有14种体外基因疗法和29种体内基因疗法通过FDA获得批准。由于AAV具有低免疫原性、广泛的趋向性和非整合性等特点，腺相关病毒（AAV）载体已成为临床试验和 FDA 批准申请的首选[1]。
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Ultra PEI-AAV转染试剂与PEI及其他竞品相比，在悬浮293F细胞中分别生产AAV2/AAV5/AAV8/AAV9，可以大幅度提高AAV产量，且病毒产量显著高于竞品；针对不同血清型均有很高转染效率。
在悬浮体系中进行AAV病毒载体的大规模生产时，转染试剂和质粒的用量是影响生产成本的关键因素。Ultra PEI- AAV转染试剂，当质粒和转染试剂的使用量减少至一半，对病毒产量的影响较小，能够有效控制并降低大规模生产的成本。
在大规模瞬时转染中，转染复合物比例过高会给生产带来挑战。翌圣生物的Ultra PEI-AAV转染试剂经过工艺优化，成功将转染复合物体积降至1%，极大地便利了大规模AAV病毒载体的生产。优化后的转染复合物不仅易于制备，而且有效解决了传统大规模生产中因体积限制而带来的挑战，为AAV病毒载体的商业化生产提供了强有力的支持。
在大规模瞬时转染中，生产工艺往往要求在限定的时间内高效地制备大量的转染复合物，并将这些复合物加入到悬浮培养的细胞中，以实现高效的细胞转染。翌圣生物的Ultra PEI- AAV转染试剂与质粒结合形成的转染复合物，经过工艺优化后，能在6小时内保持高稳定性，同时不影响AAV病毒滴度，充分满足了大规模AAV制备的工艺需求，保证了生产过程的高效性和连续性。
翌圣生物的Ultra PEI- AAV转染试剂在与市场上的主流产品相比时，具有以下显著优势：
病毒滴度显著提高：在病毒产量上实现了显著提升，对于AAV2、AAV5、AAV8和AAV9等多种血清型，均能实现2倍左右的病毒滴度增长。
降低使用成本：该产品通过减少50%的DNA和转染试剂用量，仍然保持高产量，有效降低了生产成本。
工艺放大更方便：转染复合物的体积经过优化后可降至1%，并且具有长达6小时的稳定性，这些特性共同为大规模AAV病毒载体的制备提供了极大的便利和成本效益
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参考文献
[1] Wang JH, Gessler DJ, Zhan W, Gallagher TL, Gao G. Adeno-associated virus as a delivery vector for gene therapy of human diseases. Signal Transduct Target Ther. 2024 Apr 3;9(1):78. doi: 10.1038/s41392-024-01780-w. PMID: 38565561; PMCID: PMC10987683.
[2] Srivastava, A., Mallela, K. M. G., Deorkar, N. & Brophy, G. Manufacturing challenges and rational formulation development for AAV Viral vectors. J. Pharm. Sci.110, 2609–2624 (2021).
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