ELISA试剂盒研究干细胞生物学的性状

ELISA试剂盒的培养已经广泛应用于产前遗传学诊断，但其生物学性状和在体内的起源仍没有完全明确。羊水中包含了多种异质细胞群，这些细胞主要来源于胎儿的皮肤，胎儿的消化器官、呼吸器官和尿道，以及羊膜上皮。间充质干细胞（ MSCs） 是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层和外胚层。MSCs Z初在中发现，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。

ELISA试剂盒均有成功分离羊水来源干细胞的报导，大多是利用羊水细胞贴壁的特点通过多次传代的方法获得干细胞。Tsai MS 等采用两步培养法从孕中期羊水中成功分离出具有MSCs 特征的干细胞。随后De Coppi 等通过免疫磁珠方法分离出c － Kit （ CD117） 阳性细胞，这些细胞在体外增殖迅速，可以形成稳定的细胞系，他将这些细胞命名为羊水干细胞。此外通过克隆化培养的方法也可以从羊水中获得干细胞。从现有研究情况看来，目前尚未形成统一的羊水干细胞培养体系。

ELISA试剂盒采用贴壁法分离获得羊水细胞，培养细胞使用低糖DMEM 培养基。收集的20 例羊水标本中有17 例原代培养成功，并获得可以持续传代的稳定细胞系。培养的羊水细胞体外增长迅速，倍增时间约36h。流式细胞仪检测显示细胞表达CD29、CD44、CD105 等间充质干细胞表面标志，不表达造血干细胞表面标志CD45 和CD133。RT － PCR 的结果表明分离获得的干细胞表达Oct － 4 和Nanog 基因，且不同代的细胞间均有表达。Oct － 4 和Nanog 被认为是干细胞多能分化的主要调节因子，干细胞分化后其表达立即下调。以上结果与文献报道一致，表明羊水细胞经体外培养扩增可以得到具有MSCs 性质的干细胞。