理论与实践双剑合璧，解锁多色分选与纳米流式新境界——第五季“人人都是流式高手”培训班圆满落幕

深圳湾实验室生化分析平台负责人程德春老师向参会学员介绍了深圳湾实验室生物医学实验技术中心生化分析平台的概览。目前，生化分析平台已与广东省和全国范围的多所高校科研院，以及多家生物医药单位进行了丰富的科研合作和服务，从细胞周期基础研究，到药品疫苗开发评估，2024年中心已支持课题组和项目组200余家，企事业单位科研项目50余家。在流式细胞术方向，中心可提供涵盖研究方法开发与验证，流式实验全流程用户培训和分级管理。

夯实内功，洞悉前沿

应用专家蒲志群从流式分析分选技术原理切入，详细为学员介绍了流式细胞术的基础原理、系统组成、基本设置原则等方面的理论，同时介绍了运用流式技术的前沿应用方向，为学员建立了流式细胞术原理和应用的理论框架。

流式细胞术上机前的样本制备是实验成功的基础，样本制备的质量会直接影响检测准确性、分选效率及数据可靠性。深圳湾实验室生化分析平台黄智清老师根据他多年的流式实践经验，向学员详细介绍了流式实验前针对不同样本类型的制备方案设计和制备流程，针对实验中常见问题和疑难问题，与学员分享了他的经验和重点关注的方面，内容干货满满。

近些年，科研、临床和工业对微纳颗粒的研究应用非常广泛。微纳颗粒可作为疾病诊断时液体活检靶标，又可作为递送药物的载体。流式细胞术是研究微纳颗粒非常有效的技术手段之一。应用专家贺姮以细胞外囊泡 (EV) 为例，介绍了检测EV的挑战--粒径过小，高度异质性以及缺乏参比的标准化，以及传统流式检测EV的挑战：灵敏度和分辨率不够。基于以上需求和难点，CytoFLEX nano提供6个荧光通道，利用405 nm激光作为散射光，提高纳米颗粒散射光信号强度，精准定量、测定和分辨粒径低至40 nm的小颗粒。

经典传统流式应用广泛，有着实验设计简单，灵敏度高等优势。随着检测标记物的增加，样本复杂性的增加（高自发荧光或复杂组织的样本来源），光谱流式越来越受到科研用户的关注。高级应用经理吴永强介绍了CytoFLEX Mosaic集成经典传统模式与全光谱模式的双模块设计和优势，为不同场景提供精准解决方案，更广的光谱覆盖范围降低方案中荧光素之间相似性；光谱数据分析软件CytExpert Spectral的多色分析能力可去除自发荧光带来的干扰，配置的算法有助于降低Spread Error，提高信号分辨率，得到更准确结果。

多色流式的核心挑战在于平衡荧光染料特性、仪器性能与实验设计的复杂性。深圳湾实验室生化分析平台李梦元老师介绍了多色流式方案设计及优化方面需要考虑的因素。在方案设计时需要考虑的因素众多，李老师着重从引起spread的因素出发，讨论了荧光染料选择与抗原表达量的搭配，优化电压设置和补偿调节，评估抗原共表达避免溢漏干扰，科学合理的实验对照设置等方面的理论和方案设计经验。

为了在流式分选后获得不错的细胞（颗粒）的产量、纯度和活性，以满足分选实验目的，需要从分选前、分选中和分选后每个阶段充分考虑分选实验的影响因素，针对性地做好样本的过程控制和仪器的质量控制。高级应用经理张毅向学员介绍了流式分选实验质量控制应考虑的样本制备、仪器状态和参数设置，以及分选质量控制时在质控目标、仪器质量控制和样本质量控制应该如何进行。

手把手闯关，解锁黑科技

CytoFLEX LX实操中，学员通过7色人外周血PBMC免疫分型方案，掌握从开机校准到分析演示及结果分析的全流程。

CytoFLEX nano专场，以人唾液外泌体检测为例，展示纳米流式在小颗粒分析中的应用。

CytoFLEX mosaic分别展示了14和24色人外周血PBMC方案演示，学员体验了光谱流式解决多色Panel的优势，结合自动化分析工具快速解析T细胞亚群，现场演示数据通过Cytobank云端平台实时分析。

CytoFLEX SRT分选仪实操环节，通过7色hPBMC中T4/T8细胞分选，学员实践了分选参数优化策略。

技术痛点一站式解答

培训特设互动问答环节，工程师团队针对学员提出的补偿调节难题、分选得率提升及仪器维护要点进行现场答疑。学员纷纷表示，理论结合实操的模式“直击实验瓶颈”，仪器和软件的操作简便易用，尤其是光谱流式分析结果美观，组群区分度很好，令人影响深刻。

关关难过关关过，流式江湖再启程

本次上机培训课程得到了深圳湾实验室生物医学实验技术中心生化分析平台的大力支持。课程不仅传递了流式技术的“内功心法”，更通过的仪器平台（如Mosaic、SRT、nano）展现了“实战利器”的效能。未来双方将持续合作，推出更多针对性的流式前沿领域的专题培训。