技术干货 | MCAO造模技术答疑（五）

第五期线栓MCAO造模技术答疑来了

快来看，你的难题如何解决

1.加热垫设置为37℃，室温25℃做实验，堵塞1h，发现没有梗死，38℃出现梗死，好像半影区很明显梗死大小不稳定，39℃梗死是否太大呢？

答：手术过程中保证小鼠体温在 37°C，缺血时的温度会影响梗死体积的生成，温度过低，会由于低温保护作用，造成梗死灶体积过小或每只模型梗死体积不一致；而温度过高会加重脑损伤，导致梗死体积过大，动物容易死亡。

2.术后应该怎样具体护理才能降低小鼠死亡率？比如打什么抗生素和使用什么止痛药等等？

答：1）术后抗感染：手术后大多数动物死亡会源于术后感染，所以抗感染是重要的护理环节。首先切口周围应严格用碘伏消毒，消毒范围不应低于1.5 cm；同时，从术后当天开始，每天腹腔注射4万单位青霉素，连续注射7天；术后生活的笼具垫料也应进行严格的消毒灭菌，垫料需每天更换一次。

2）术后镇痛：术后切口强烈的疼痛，也是实验动物死亡因素之一。在缝合伤口后，可以选择性的以 2.5 mg/kg标准于小鼠尾静脉注射，以达到镇痛目的。

3）术后饮食：MCAO术后1周内，为死亡高发期，其中一个重要的原因就是术后自主进食不佳。术后应采用流食，可 以喂养奶粉，或用10%蔗糖代替。如若1天内小鼠仍没有进食行为，可以采用灌胃处理。

4）环境温度：术后饲养的环境温度应在 27°C±0.5°C，不宜过高，过高会出现灌注流速太大引起的脑出血，湿度为 70%±5%，通风良好，避免噪声及动物间的相互干扰。

3.有时候术后第2-3天死亡，解剖没有发现颅底出血，有哪些可能的原因？

答：首先要找出死亡原因，解剖死亡大鼠的脑，先看是否有蛛网膜下腔出血，如有出血，表明死因是进拴太深，以后注意插线深度；如无出血，则还要再看是否有严重的大脑半球水肿，如脑水肿严重，则表明死因是脑缺血时间太长，需要缩短缺血时间；如既无出血，又无明显的脑水肿，那就要注意动物状态或生活环境是否太差。

4.术后第2天发现解剖小鼠大脑背面出血，是手术伤到哪里了吗？

答：大脑背面出血可能是蛛网膜下腔出血，可能是线拴插入过深。

5.异氟烷麻醉手术插入线栓堵塞时死亡，拔线栓时死亡，分别是什么原因？

答：插栓时死亡原因：

a）麻醉剂量过深；

b）窒息：呼吸道分泌物增多，操作时压迫小鼠的气管及分离血管时损伤迷走神经，导致小鼠窒息死亡。

c）手术过程中失血过多：包括分离颈部血管时出血、血管破裂出血、血管夹闭不全出血、线栓头脱落出血、反复多次插入线栓出血等。

拔栓时死亡原因：

a）线栓已经插破血管，拔线时导致大出血；

b）拔栓时颈外动脉没有结扎好，导致大出血；

c）再灌注会加重小鼠的大脑损伤，小鼠无法承受。

6.术后声音沙哑，是怎么回事？

答：可能是控制声音的脑区缺血，导致小鼠声音沙哑。