PNGase F(N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F)

产品描述

N-糖苷酶 F (PNGase F)是一种酰胺水解酶，经过和平空间站伊丽莎菌克隆，主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。并在 E. coli大肠杆菌中重组表达，可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨残基之间的酰胺键，同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品带his和sumo标签，常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。

产品性质

产品组分

运输和保存方法

干冰运输；-20℃保存；有效期12个月。

使用方法

1、变性条件下蛋白质去糖基化：

1）在水中加入1 μL Buffer 1和目标糖蛋白（1-20 μg），至终体积10 μL；

2）100℃温度下煮沸10 min使其变性，冰上冷却，离心10秒；

3）加入2 μL的Buffer 2、2 μL的10％NP-40、6 μL去离子水，总反应体积20μL；

4）加入2 μL的PNGase，轻轻混匀。在37℃孵育1-3 h。