「rTEV Protease重组烟草蚀纹病毒蛋白酶」价格、参数、图片

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产品描述

重组型TEV蛋白酶（rTEV）是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶，不仅保持天然TEV酶的功能活性，且在广谱的温度范围内表现出更强的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶，具有很强的位点特异性，严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七氨基酸序列为：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH 7.0，30℃时可达到最佳活性，但在pH 6.0-8.5和温度4-30℃的广泛范围内皆有活性（见表1），使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His标签，通过Ni-NTA树脂去除，以达到纯化目的蛋白的目的。

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表1. 不同温度下rTEV酶切活性

反应时间（h）	不同温度下剪切活性（%）
反应时间（h）	4℃	16℃	21℃	30℃
1	34	58	56	70
2	58	80	78	90
3	71	99	99	99
3.5	84	99	99	99

产品性质

来源（Source）	大肠杆菌
外观（Appearance）	无色透明液体
比活力（Specific Activity）	5 U/μL
活性定义（Unit Definition）	在1×rTEV Buffer（50 mM Tris，pH 8.0，0.1 mM EDTA，1 mM DTT）中，30℃反应1 h，剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
纯化（Purification）	Ni柱亲和纯化
纯度（Purity）	≥95%（by SDS-PAGE）

产品组分

编号	组分名称	产品货号/规格
编号	组分名称	20403ES80/ （1000 U）	20403ES92 （10×1000 U）	20403ES10 （10 KU）	20403ES50 （50 KU）
20403-A	rTEV Protease（5 U/μL）	200 μL	10×200 μL	2×1 mL	10 mL
20403-B	rTEV Buffer （10×）	600 μL	10×600 μL	6 mL	30 mL

运输与保存方法

冰袋运输。rTEV Buffer于-20℃保存，一年稳定。rTEV Protease，-20℃保存，6个月稳定；-80℃长期保存，一年稳定。建议收到货或者第一次使用时分装各组分保存，避免反复冻融。

应用实例

1. 在EP管中配制如下反应体系。

组分	用量
融合蛋白	40 μg
rTEV Protease (5 U/μL)	4 μL
rTEV buffer（10×）	10 μL

2. 30℃孵育2h或4℃过夜。

注意事项

1. 影响天然TEV酶活性的常见因素：1）PMSF和AEBSF（1 mM），TLCK（1 mM），Bestatin（1 mg/mL），EDTA（1 mM），Pestatin A（1 mM）以及E-64（3 mg/mL），而rTEV可兼容上述抑制剂；2）Zn离子浓度（>5 mM），同样对rTEV活性有抑制；3）与半胱氨酸反应的试剂，也是rTEV的潜在抑制剂。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. 本产品仅作科研用途！

HB221013