增强型CCK8细胞活力、毒性检测试剂盒

产品名称	增强型CCK8细胞活力、毒性检测试剂盒
货号	SNK-010
规格	100 次/500 次
简介	增强型CCK8试剂盒,简称WST-8，是一种基于WST-8的快速、高灵敏度,用于细胞活力、增殖和细胞毒性检测的试剂盒。该试剂盒只需0.5-1 小时即可完成测试，并且比传统CCK-8试剂盒更快，更敏感，并且具有更宽的线性范围。本试剂盒适用于450nm左右吸光度的测定。WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子偶联试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原，生成橙黄色可溶性的formazan。细胞增殖得越多越快，颜色就越深；细胞毒性越强，颜色越浅。颜色的深度和细胞数目之间存在线性关系。与WST-1相比，WST-8更检测灵敏度更高，更易溶解，更加稳定。本试剂盒经过优化，培养时间大大缩短，一般仅需0.5-1 小时即可完成检测。本试剂盒检测非常便捷，只有一管配置好的增强型CCK-8溶液，不需要进一步制备和其他操作。无须使用同位素，所有的检测步骤都在同一个96孔板上进行。酚红和血清对试剂盒的测定无显著影响。 本品对细胞无明显毒性。加入增强CCK-8溶液后，可在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，方便找到最佳测定时间。96孔板每100μL细胞需要10μL增强CCK-8溶液，该试剂盒每1mL可进行100次检测。
使用方法	1.提前将细胞按实验需要接种到96孔培养板里（细胞增殖实验建议2000个/孔/100μL，细胞毒性实验建议5000个/孔/100μL，具体接种数量可以视实验需要及细胞增殖速度调整），待细胞贴壁后，按照实验设计进行加药、细胞因子刺激、转染等细胞处理； 2.细胞处理完成后，每孔加入10μL增强型CCK8工作液，如果担心药物会干扰检测，需设置加了相应量细胞培养液、药物和增强型CCK8工作液，但没有细胞的孔作为空白对照，然后在细胞培养箱内孵育0.5-4 h（建议预实验确定最佳孵育时间）； 3.完成孵育后，在波长450 nm测定吸光度，若没有450nm滤光片，可以选择420-480nm处测定OD值，根据OD值判断活细胞数量以确定处理过程对细胞活性的影响； 4.结果计算：
产品组分
存储条件	2-8℃或-20℃，避光保存。
保质期	2-8℃（一年）或-20℃（两年）（避光，避免反复冻融）

注意事项：
1.试剂盒反复冻融会降低检测效果，虽然该试剂在反复冻融3次后对检测效果无明显影响，但可在第一次解冻后分装成小规格。反复冻融过程中可能出现少量沉淀，应将其平衡至室温，并尽可能溶解。
2.多数情况下，在细胞中加入增强型CCK8工作液孵育0.5-1小时可获得理想结果，但孵育时间因细胞类型、细胞密度等实验条件的不同而不同。
3.信号强度和稳定性会受到温度的影响，反应前将增强型CCK8工作液平衡至室温。
4.由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发问题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加相同量的PBS、水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
5.本产品基于琥珀酸脱氢酶还原反应，样品中应尽量不含较多还原剂及抗氧化剂（还原型谷胱甘肽、巯基乙醇、维生素C等）。用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。
6.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
7.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。