CCK8细胞活力、毒性检测试剂盒[暂不提供]

产品名称	CCK8细胞活力/毒性检测试剂盒
货号	SNK-006
规格	100T/500T （100μL体系）
简介	CCK8全称Cell Counting Kit-8，是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒。其检测原理为活细胞线粒体中的脱氢酶能使外源底物WST-8还原为溶于水的橙黄色甲臜，在一定细胞数范围内，甲臜形成的量与活细胞数成正比。根据测得的吸光度值(OD值)，来判断活细胞数量，OD值越大，活细胞数越多，细胞活性越强(如果是测药物毒性，则表示药物毒性越小)。 该检测方法灵敏度高、经济实用，操作方法简单，检测结果几乎不受血清、酚红等试剂影响，已广泛用于细胞因子活性检测、细胞毒性检测等诸多实验过程，可以替代传统的MTT实验。
使用方法	1.提前将细胞按实验需要接种到96孔培养板里（细胞增殖实验建议2000个/孔/100μL，细胞毒性实验建议5000个/孔/100μL，具体接种数量可以视实验需要及细胞增殖速度调整），待细胞贴壁后，按照实验设计进行加药、细胞因子刺激、转染等细胞处理； 2.细胞处理完成后，每孔加入10μL CCK8工作液，如果担心药物会干扰检测，需设置加了相应量细胞培养液、药物和CCK8工作液，但没有细胞的孔作为空白对照，在细胞培养箱内孵育0.5-4 h（建议预实验确定最佳孵育时间）； 3.完成孵育后，在波长450 nm测定吸光度，若没有450nm滤光片，可以选择420-480nm处测定OD值，根据OD值判断活细胞数量以确定处理过程对细胞活性的影响； 4.结果计算
产品组分	试剂名称 100T 500T CCK8工作液 1mL 5mL
存储条件	2-8℃或-20℃，避光保存
保质期	2-8℃（一年）或-20℃（两年）（避光，避免反复冻融）

注意事项：
1.试剂盒反复冻融会降低检测效果，虽然该试剂在反复冻融3次后对检测效果无明显影响，但可在第一次解冻后分装成小规格。反复冻融过程中可能出现少量沉淀，应将其平衡至室温，并尽可能溶解。
2.多数情况下，在细胞中加入CCK8工作液孵育0.5-1小时可获得理想结果，但孵育时间因细胞类型、细胞密度等实验条件的不同而不同。
3.信号强度和稳定性会受到温度的影响，反应前将CCK8工作液平衡至室温。
4.由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发问题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加相同量的PBS、水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
5.本产品基于琥珀酸脱氢酶还原反应，样品中应尽量不含较多还原剂及抗氧化剂（还原型谷胱甘肽、巯基乙醇、维生素C等）。用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。
6.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
7.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。