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诺坦普(Nanotemper) Tycho NT.6蛋白品质分析仪

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详细介绍


诺坦普(Nanotemper) Tycho NT.6蛋白品质分析仪

 

Tycho NT.6蛋白品质分析仪.png

Tycho 可以在一次实验中告诉您蛋白品质信息⸺蛋白是否存在、纯度、浓度、结构的完整性、批次间品质的相似程度以及其功能。

Tycho 首次实现了 3 分钟内检测任意蛋白样品的品质,仅需 10 µL 样品,无需标记,使您的实验设计和纯化工作更加高效。

解决方案

直到完成了一个漫长的实验但无结果,您才发现实验出了问题。随后就需要对问题进行枯燥的、漫无边际的排查。也许您在 SDS-PAGE 上只能找到一个弥散的条带,或无法在 Western 上看到一个目的条带,也许 ELISA 无结果,或在结合实验中看不到相互作用。Tycho NT.6蛋白品质分析仪1.png

使用 Tycho,将新制备样本的结构完整性或折叠情况与高品质的样品进行比较,以检验它们的相似性。如果不同,您制备的可能是一个有污染物的低品质的样品⸺这表明需要纯化或优化您的纯化流程。

确定样品品质的一部分工作是确认蛋白是否存在,以及纯化效率。这些信息将有效地帮助您计划下一步实验。

通常,您会使用分光光度计检查纯度和浓度,然后通过 SDS-PAGE 或 Western 确认其一致性。而现在,我们有更高效便捷的选择。

与传统方法相比,Tycho 给出的结果有更丰富的内涵。它不仅告诉您蛋白是否存在,以及蛋白profile 是否一致,而且可以给出未知蛋白的相对浓度信息。因此,在未来让我们把那些既耗费时间,又耗费大量珍贵样品的传统方法放一边吧。

如果您选择储存蛋白,您需要找到蛋白合适的缓冲液条件。当然,这取决于是准备长期冻存还是在冰箱中短期保存。

如果您想要马上使用蛋白,首先要问问自己,您的样品所在缓冲液是否与下一步的实验条件兼容。如果答案是否定的,您必须要找出既能满足实验需求,又能确保蛋白品质(protein quality) 的缓冲液条件。Tycho NT.6蛋白品质分析仪2.png

Tycho 可以帮助您确定样品储存或者 assay development 所需的缓冲液条件,保证蛋白的品质。利用 Tycho,您可以快速筛选不同的缓冲液、添加剂、赋形剂以及储存温度、储存时间,从而确定蛋白处于条件。因此, 通过 Tycho,您可以节省大量时间,避免重复纯化一批又一批蛋白。

真正的问题可能出在蛋白功能上,一个经常容易被忽视的蛋白品质参数。传统方法检测两个分子相互作用耗时较长,且实验体系不易建立,通常大家会直接跳过这一步。直至问题出现,我们才意识到功能测试的必要性。

Tycho 可以在 3 分钟内检测蛋白的功能,告诉您目标蛋白是否和其他分子相互作用。Tycho 通过非标记的方法、用极少量的样品来进行检测,比传统的方法更加简单。

系统升温过程中(温控范围 35‒95 ℃,升温速率 30 ° C/min),检测并记录波长为 350 nm  和 330 nm 时的蛋白内部色氨酸和酪氨酸残基的內源荧光信号。这些荧光信号的变化可以表明蛋白折叠状态的转变。在转变发生时的温度被称为拐点温度 (Ti),350 nm 与 330 nm 的比值被用来计算 Ti 值。Tycho NT.6蛋白品质分析仪3.png

每一个蛋白去折叠的过程都是。在检测过程中,Tycho 可记录全部的荧光信号,包括初始值以及在整个实验过程中的信号变化 (Δ ratio)。通过参考去折叠过程中的信号参数,比较和验证不同批次间的蛋白品质。

流程监测

初始纯化:检测蛋白是否存在

  • 色谱纯化:找出包含您目标蛋白的组分, 并检查其功能性

  • 纯化蛋白:确认批次间的相似度、纯度、功能性以及浓度

  • 储存样品:选择最适的储存条件。冻融后与储存前的数据对比,如相似度、纯度、功能性和浓度等信息

    Tycho NT.6蛋白品质分析仪4.png

  • 实验方法开发:检测蛋白的浓度,并测试其是否功能性以及活性

    产品特点

  • 免标记检测:无染料标记,无需对您的样品进行任何修饰⸺天然条件下检测,从而得到更直接、更相关的蛋白品质及蛋白功能的信息。

  • 仪器小巧方便:Tycho 小巧美观,却可以整合全部的蛋白品质信息,为您节省大量的实验空间。

  • 任意蛋白类型的检测:无需透析或样品稀释。可在宽广的浓度范围,及任意缓冲液中进行蛋白品质检测。

  • 节省宝贵样品:Tycho 仅需 10 µL 的样品便可检测您的蛋白品质,而且会节约您下游的一些实验参数的测定。

  • 3 分钟内得出结果:实现在 3 分钟内快速生成数据,从而轻松决定下一步做什么,推动实验快速进行。

  • 体验直观的用户界面:在测试同时可编辑样品名称,记录完整的实验信息。实验结束时,轻松便捷地导出原始数据、自动分析结果及总结报告图。

  • 可测任意类型的样品:抗体、激酶、多聚复合物、转录因子、膜蛋白、标签蛋白、点突变体、酶、病毒颗粒、功能性蛋白(单克隆 mAbs)等

样品数量

6个

测量时间

3分钟

样品消耗量

10μL

样品浓度范围(标准IgG参照)

0.010 至 200 mg/m L 以上

浓度范围(同一测试中)

1-500倍不同浓度(标准IgG参照)

测量参数

Inflection temperature (Ti)
Sample brightness
Aratio (between 95 ℃ and 35℃)
Initial ratio (350 nm/330 nm at 35℃)

Ti*值重复性(在70℃时)

标准偏差小于0.15℃ 相对标准偏差小于0.2%

ΔTi值显著性标准

±0.3℃

温控范围

35 ℃ - 95℃

升温速度

30℃/min

变性曲线斜率精度

±0.05℃/min

荧光检测通道

330+/-5 nm 和350+/-5 nm

荧光源

內源色氨酸和(或)酪氨酸

仪器尺寸

31 cm (长)×37cm (高)×18 cm (宽)

仪器重量

6.6 Kg

TychoTM NT.6 耗材


数量

样品体积

样品浓度范围
(标准IgG参照)

TychoTM NT.6 毛细管

200 支

10 µL

0.010 至 200 mg/mL 以上


产品直通车
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