饲料中维生素A的测定

饲料中维生素A的测定

1  仪器及试剂

仪 器：

1). 分析天平一台（精度0.1mg）；

2). 恒温水浴锅一台；

3). 容量瓶；

4). 微量进样器（5ul或10µl）一支；

5). 微量可调移液枪（1000ul）一支、吸头多个；

6). 旋涡混匀器一台；

7). LC-10TvpGX液相色谱仪；

试 剂：

1). 超纯水（≥18MΩ∙cm）；

2). 甲醇，色谱纯；

3). 维生素A乙酸酯标准品：含量≥99%；

4). 维生素A乙酸酯标准贮备液；

5). 维生素A乙酸酯标准工作液；

2  样品制备

称取饲料样品1g，极ng确至0.0001g，置于100ml的棕色容量瓶中，加入约80ml的甲醇，瓶塞不要拧紧，于65℃超声波水浴中超声提取30min，冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，充分摇匀。如果试样中维生素A乙酸酯的标示量低于107IU/kg，则将溶液过0.45µm滤膜过滤，进样测定。否则，需将溶液用甲醇进一步稀释，使维生素A乙酸酯的进样浓度与维生素A乙酸酯标准工作液浓度接近。

3  色谱条件

色谱柱：Vertex C18色谱柱　150mm×4.6mm×5μm；

流动相：甲醇+水（98+2）；

流速：1.0mlmin；

温度：室温；

进样量：20μl；

检测波长：326nm。

4  色谱图