饲料中氯霉素的测定

1、提取

称取5 g 饲料置于50 mL 塑料离心管中，加入30 mL 乙酸乙酯，超声提取15 min，其间用手振动2 次。

取出离心管，4000 rpm 下离心5 min，将上清液转入250 mL 平底烧瓶中。再向离心管中加入30mL 乙酸乙酯重复提取一次，合并提取液。30 oC 下将提取液减压蒸馏至近干。

向平底烧瓶加入4 mL 甲醇氯化钠溶液（甲醇：4% 氯化钠水溶液=30：70）和4 mL 正己烷溶解残渣， 混合液转入10 mL 离心管。将离心管涡旋混合2 min，然后在4000 rpm下离心2 min，弃去上层的正己烷，再加入4 mL 正己烷，同上操作，弃去正己烷层。下层清液待净化。

2、净化

a 活化： 依次用6 mL 甲醇和6 mL 水活化ProElut PLS 150 mg/6 mL (Cat.#68004)，流出液弃去；

b 上样： 将待净化的提取液加入柱中，流出液弃去；

c 淋洗： 用6 mL 20% 甲醇水溶液淋洗，淋洗液弃去，并将PLS 柱抽干；

d 洗脱： 用6 mL 甲醇洗脱，收集洗脱液；

e 重新溶解：在40 oC 下用氮气将洗脱液吹至近干，然后用1 mL 40% 甲醇水溶液定容，供HPLC 分析

色谱柱：Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603)

流动相：甲醇/ 水=40/60

流速：1 mL/min

进样量：20 μL

检测器：UV 280 nm

柱温：30 oC

适用于预混饲料和配合饲料中氯霉素的检测。

1. 氯霉素