饲料中万古霉素测定

1.样品准备

提取

(1)称取1 g均质样品于15 mL离心管中，加入8 mL乙酸提取液 *和4 mL。

(2)振荡4 min， 4000 rpm下离心4 min，收集上清液；

(3)下层残留物用5 mL、5 mL 乙酸提取液重复提取两次，合并三次提取液；作为上样液，待净化。

*乙酸提取液：10%乙酸溶液（用50%甲醇水溶解）

2.SPE柱净化——ProElut PXC 500 mg/12 mL（Cat.# 68207）

(1)活 化：依次加入6 mL甲醇，6 mL水，流出液弃去；

(2)上 样：将上样液加入柱中*，流出液弃去；

(3)淋 洗：依次用10 mL水，3 mL甲醇淋洗，流出液弃去；

(4)洗 脱：10 mL10%氨水（甲醇：水=3:7）溶液洗脱，收集洗脱液；

(5)重新溶解：在50 ℃下用减压蒸馏将洗脱液浓缩近干，然后用1%乙酸重新定容至1mL，上机供HPLC分析。

分析条件

色谱柱：Spursil C18 250×4.6mm ID，5μm（Cat.#82001）

流 速：1.0 mL/min

检测器：UV 210nm

柱 温：30 ℃

进样量：20 μL

流动相：50mmol/L磷酸二氢钾(1L磷酸二氢钾溶液需加入300uL磷酸)：乙腈(92:8)

适用于饲料中万古霉素的测定

万古霉素