蛋白质分子量的测定：SEC-MALS 与传统校正法

溶液中蛋白质的物理性质和行为取决于与蛋白质的纯化和构成及其 自身固有属性相关的多种因素 尺寸排阻色谱 (SEC) 是一种强大的工 具，常用于分析蛋白质的回收率分子量和聚集性 SEC 的工作原理涉及在样品流经多孔的惰性色谱柱基质时对样品进 行分离 较小的分子进入填料孔内，而较大的分子则被排除在外，因 此可更快速地通过色谱柱 结果是获得基于流体力学体积的分离，但 是人们通常要求得出分子量 以前，通过比较未知蛋白质与（已知分 子量的）标准球状蛋白质的洗脱时间估算分子量，我们把这一过程称为 传统校正法 通常使用诸如紫外 (UV) 等单一的浓度检测器完成上 述操作 然而，现在我们联合使用光散射检测器和浓度检测器（紫外 或折光率，RI），可不依赖保留时间测定蛋白质分子量 这一进步非 常有用，因为许多蛋白质不具有球状结构，使得它们测得的分子量不准 确 由于增加了更多检测器（如另一台浓度检测器）特性粘度 (IV) 和动态光散射 (DLS) 检测，可极大地增加单次 SEC 测定所获得的信息 量 Malvern SEC-MALS 20系统是一款 20 角度光散射设备， 能够不依赖于洗脱体积测定蛋白质分子量 在此应用说明中，一些蛋 白质使用 SEC 进行分离 使用多角光散射 (MALS) 或传统校正法测定 它们的分子量， 并讨论了这些结果的差异 马尔文科研级多检测器凝胶色谱系统Viscotek TDAmax 马尔文科研级多检测器凝胶色谱系统Viscotek 270max 马尔文凝胶渗透色谱系统Viscotek HT GPC/SEC 马尔文稀溶液粘度计Viscotek DSV