血清中氧化三甲胺的GX液相色谱串联质谱法测定研究

    胆碱作为人类必需营养素，在调节脂代谢、FZ脂肪肝和心血管疾病等疾病和促进神经发育等方面的作用已达成共识，但越来越多的研究发现胆碱水平升高与代谢综合征、心血管疾病等的发生风险呈正相关，这与胆碱依赖肠道菌群的作用下生成氧化三甲胺有着密切关系，体内高水平的TMAO可影响胆固醇代谢、促进动脉粥样斑块形成、加重脂代谢紊乱，在胆碱促心血管疾病的发生中起着关键作用。因此，评估体内TMAO水平对探讨胆碱在肠道的代谢情况及胆碱依赖肠道菌群代谢物与慢性疾病的关系有着重要的意义。目前测定TMAO的离子色谱法等方法检测限为1~8μmol/L，灵敏度较低，不能满足人体生物样品的检测要求：而应用较多的气相色谱-质谱联用法虽然灵敏度较高，但操作繁琐、耗时长，样品衍生过程可使TMAO降解从而影响测定结果的准确性。因此，建立高灵敏度、准确简便的测定TMAO水平的方法非常迫切。本课题组已建立的GX液相色谱串联质谱法检测血清胆碱的方法快速、准确且灵敏，本研究将此方法应用于测定血清TMAO的水平，以期为科研和临床检验提供参考。

仪器简介

    LC-600A智能全控液相色谱系统由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等，实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。

样品处理：

取30μL血清或标准应用液，加入3倍体积的除蛋白液，旋涡混匀后4℃、13200r/min离心15min。取上清移至密封的样品瓶后上机检测，以保留时间和质谱图定性，内标法定量。

质谱条件：

测定结果：