- 2025-02-10 11:42:42曲妥珠单抗
- 曲妥珠单抗是一种重组DNA衍生的人源化单克隆抗体，可特异性地作用于人表皮生长因子受体2（HER2）的细胞外部位。它常用于治疗HER2过度表达的转移性乳腺癌，以及早期乳腺癌的辅助治疗。虽然这与科学仪器无直接关联，但科学仪器的进步也促进了生物医药领域的研究与发展。如有科学仪器相关问题，欢迎随时向我提问。
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曲妥珠单抗问答
- 2023-06-09 11:39:07经典磁珠一文解读：AMPure XP纯化实用技巧
- 基于SPRI技术的AMPure XP，采用超顺磁磁珠帮助纯化核酸片段，被广泛应用到NGS行业，PCR体系、酶切、连接反应体系的纯化。作为行业的“金标准“试剂盒，AMPure XP有哪些高频Q&A问题呢？AMPure XP怎么纯化长片段？怎么提高我的样本得率？产物纯度有什么优化的方向吗？我可以选择纯化250 bp的那一条条带吗？小贝总结了10条AMPure XP Q&A问题实用技巧：1、乙醇比例乙醇溶液必须至少70%。当将100%乙醇稀释至70%时，请确保在配置溶液合并之前分别测量水和乙醇的体积。用水补齐乙醇的稀释方式会导致浓度低于预期。请确保存储的乙醇在不使用时保持瓶盖拧紧。2、充分的混合在最 初磁珠与样品结合和洗脱混合期间，彻底的混合至关重要。可用略低于总孔体积的吸头进行混合。洗脱时，需要注意最 小洗脱体积（96孔规格为40 μL，384孔规格为15 μL），以确保磁珠充分重悬。还应保持足够的孵育时间，以确保核酸有足够的时间与磁珠结合或解离。由于样品的粘度，结合过程中的涡旋可能效率不高。3、大反应体系大体积反应可以采用更长的样品&磁珠结合和磁分离时间。可将binding结合时间增加到10分钟，并确保在弃上清液之前所有的磁珠均被充分磁分离。4、避免实验中磁珠损失如果在弃清液的过程中磁珠被吸入枪头，结合在这些磁珠上的核酸则会在这个步骤损失掉。首轮移除上清时，缓慢轻柔地操作，尽可能多地移除清液，同时确保不会干扰磁珠在磁环/磁力架上的吸附。如果意外吸出磁珠，请将所有磁珠重新打回孔中，让磁珠重新磁吸。随后，再度移除上清，尝试缓慢吸液或使用更细的枪头。小体积样品更容易受到磁珠损耗的影响，因为磁珠可能达不到孔中磁铁的水平位置。5、大片段样品的磁珠干燥10 kb以上的片段与磁珠结合非常紧密，如果样品变干则难以洗脱。尽可能完全地弃掉最 后一次乙醇清洗液，立即加入洗脱缓冲液并充分混合。保持盖子打开状态，乙醇在洗脱孵育期间将继续从孔中蒸发。6、低洗脱体积洗脱体积小会导致回收率降低。这是因为会有少量洗脱缓冲液始终包覆在磁珠上。该体积取决于孔的形状和孔中的磁珠量，因此较小的洗脱体积将导致相对较高比例的洗脱液残留。7、当你用紫外吸收法检测回收率不只是PCR双链产物，体系中过量的引物和核苷酸同样产生吸收。因此测量未纯化的PCR反应，可能获得高于实际PCR产物浓度的吸光度值。对比纯化前后的吸收值，则会导致回收率看起来比实际低。小贝建议：在琼脂糖凝胶上运行等量的未纯化PCR反应产物与纯化后的PCR反应产物（例如1/4的未纯化PCR产物和1/4的洗脱液）以便检查回收情况，或使用基于特异性荧光染料的测定，例如PicoGreen。8、引物的残留AMPure XP试剂与PCR反应混合后的试剂最 终浓度决定了PCR产物与磁珠结合的片段大小。AMPure XP主要结合> 100 bp的PCR产物，并丢弃小于50个碱基的引物。较大的引物和引物二聚体可以与磁珠结合。请确保您的PCR产物在循环过程中没有蒸发导致体积变小，并添加正确体积的试剂（见下表）。确保用乙醇冲洗在混合和结合过程中样品有接触到孔内壁的任何地方。如果在纯化体系中存在过量的引物，减少该PCR反应的引物量也可以是一个优化的方向。9、下游酶反应效果不佳如果您的下游酶反应对痕量乙醇极其敏感，请添加两分钟的保守干燥步骤。请注意，大片段会与磁珠紧密结合，在磁珠完全干燥后可能难以洗脱。10、如何选择性保留200-500 bp核酸片段AMPure XP是用于PCR产物纯化的试剂盒。对于片段筛选的应用，请考虑使用 SPRIselect试剂盒。有关 SPRIselect 片筛的更多信息，请访问经典磁珠一文解读:NGS片段筛选比例计算
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- 2023-03-06 15:51:24HM&M珠磨机：与盐野义制药合作研发难溶性药物所需的湿法珠磨机
- 全文共2144字，阅读大约需要7分钟盐野义制药的田中先生说“金属污染物改革对产品化的品质、安全性、规模化生产产生了很大的影响”。近年来，许多药物候选化合物显示出难溶性的特质，其有效的解决方法是通过珠磨机将药物纳米化。药物纳米化可以有效改善药物生物利用度，药物纳米化已经在基础研究和商用生产中得到应用。这里的问题是，传统的珠磨机在结构上不可避免地会产生锆等金属的磨损，从而污染到产品。能解决这个问题的研究报告很少。于是，盐野义制药开始着手与广岛金属公司共同研究和开发用于解决难溶性药物在研磨时引入污染物这一问题的新型珠磨机。阐明各种参数的影响，探索最 优条件纳米制剂制造的要求事项设置了以下5点：1、粉碎后粒子粒径 :＜200 nm2、处理速度:几十分钟~几个小时3、金属污染的极小化（金属污染物含量控制）：处理过程中料液：＜1 mg/L，原料药：＜10 μg/g4、不引起变质的处理温度：＜ 30℃（优选＜10℃）5、易于清洗：机器拆洗容易珠磨机通过搅拌使磨珠与目标粒子在料液内碰撞而粉碎、分散。我们的目的是抑 制在此过程中因磨珠碰撞而产生的污染。纳米制剂制造注意事项的①、②、③与磨珠粒径和圆周速度（转速）有关，为了达到事项②对处理速度的要求，选择“高速运转/小、中粒径珠子”是合适的。为了达到事项③对污染物的控制，需要选择“低速运转/小粒径珠子”。我们探索能在不降低效率的情况下减伤磨珠污染的技术解决方案。为了达成要求事项的技术性讨论磨珠粒径：当磨珠粒径变小时，与粒子接触的频率会增加，处理速度能更快；磨珠粒径变大，冲击力会增强，引入污染物的概率会更大。因为这样的关系，所以选取具有短时间处理能力、污染物引入少的最 佳磨珠粒径。圆周速度（转速）圆周速率（转速）越高，磨珠间接触的频率和冲击力会上升，一方面污染量随着转速的升高而急剧增加，以一定速度急剧增加，另一方面，处理速度与圆周速率呈正比例关系。我们需要在污染量较少的情况选择最 快的处理速度。药物浓度从粒径变化、污染量确认的观点出发，在5～50w/w%的范围内进行了变更实验。装置结构考虑了在珠磨机中抑 制冲击力的低速运转时的磨珠行为。研究的结果是，在卧式结构中，磨珠无法贯穿整个研磨腔体，可能会排除未经处理的浆料，从而降低处理效率。在立式结构中，通过采用重力下降的方式，浆料可以可靠地通过磨珠聚集到磨机底部，不会出现浆料无法排出的情况。因此，珠磨机结构上选择了能使料液从上往下流转的狭缝型立式珠磨机。机械密封所谓机械密封，是指在机体上一种防止料液泄露或从外部引入污染物的轴封装置。通过密封液最 小化内外压，抑 制滑动部分微米级间隙的泄漏。但是，这种设计存在着密封件自身损坏、引入污染物、清洁灵活性差等问题。为此，开发了无需密封液的密封结构，降低了从密封部分带来污染的风险和提高清洁效率。其他通过各种比较，选择了韧性高、污染性小的氧化锆材质磨珠。在搅拌转子设计上，比较鞘式和盘式，最 后选择了能够在系统内均匀搅拌，且能够在短时间内进行粉碎、分散处理的鞘形。低速运转时处理效率是常规的1.8倍。在上述条件的基础上，将难溶解性的苯妥英作为模型药物，展示了最 优化处理条件的案例。使用多种药物浓度的料液进行粉碎后，主药浓度在40w /w%之前，金属污染量基本没有受到影响。当浓度高于该浓度时，料液的粘度显著增加，粉碎效率降低，污染量也增大。与传统的5 w/w%处理相比，40 w/w%处理的污染量提高了1/8，生产效率提高了8倍。另外，研究了无密封液的影响，没有发现对苯妥因粒子粒径变化和粉碎效率的影响。密封材料钨、镍的污染量为零，避免了污染风险。图1总结了通过3年的共同研究降低污染量的成果。通过逐一解析各种参数对比珠磨机产生污染的影响并进行优化，将料液污染量降低到0.73 mg/ L。此外，图2总结了原料药的处理时间和每克原料药的接触时间。处理速度按浓度换算提高了1.6倍，污染量也成功地大幅降低为1.6 μg/g目标值，约为现有技术的1/30。抑 制污染量和高效化的重要参数有磨珠直径和圆周速率（转速）。粉碎效率和污染量两者需要权衡。对填充率和药物浓度也进行了研究，发现影响很小。由此，得出结论，最 佳条件为珠径：0.5 mm以下的小粒径到中等粒径，周速：6 m/s以下的低速到中速，浓度为40 w/w%。另外，处了把苯妥因作为模型药物进行了检验，其他的难溶解性药物在相同条件下也实施了粉碎的结果，粉碎可以达到200nm。特别是，对低熔点的药物，也可以适用，如以前的技术难以粉碎的非诺贝特，显示了本技术的进一步适用性。一体式无密封珠磨机《APEX磨机F&M系列》通过本共同研究开发的是一体式无密封珠磨“APEX磨F&M系列”。通过无密封，实现了来自机械密封的金属污染零为零、密封液的混入为零、省略了由于机械密封的损伤而定期整备、装置的紧凑化，组装和分解容易，可实现浸泡放置清洗。此外，电动机直接连接旋转轴，取消了V带，防止了V带产生磨损粉末。以前，机械密封所承担的防珠漏是通过使用下降流和在磨机上部安装泵送环来解决的。从150 mL的实验机到2 L的生产机。无密封技术正在申请实用新型和专 利。广岛金属与机械公司从1983年开始生产销售湿珠磨机。技术研究开发越来越深入。平田先生以高品质纳米粒子医药品制造技术的领先企业为目标，满怀干劲地表示将进一步开展技术拓新。
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- 2023-08-09 13:42:02低至3折 | Clean NGS高通量测序产物纯化及片段筛选磁珠限时促销
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- 2023-08-05 18:35:44通过 dLAMP-on-a-chip 的微流体分步乳化，无泵且高通量地生成单分散水凝胶珠。
- FluoSurf 4%(w/w) in HFE7500表面活性剂连续油相4% (w/w) FluoSurf premixed in HFE 7500 was donated by Emulseo (France) and used for initial optimization experiments.通过 dLAMP-on-a-chip 的微流体分步乳化，无泵且高通量地生成单分散水凝胶珠。阶梯乳化（Step emulsification - SE）通过限制的急剧变化产生液滴，已成为流动聚焦技术的潜在替代方案。 水/分散相通过浅入口通道连续泵入预先填充有油/连续相的深室中。 由于需要一个或多个泵来维持液滴生成的连续流动，以及随之而来的高样本量的使用，限制了该技术仅适用于研究实验室。 在这里，我们报告了一种无泵 SE 技术，可使用
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- 2022-07-04 17:35:41高通量冷冻研磨仪对样品前处理时如何选择研磨珠？
- 研磨珠对样品研磨来说是不可或缺的一类耗材应用，但对磨珠的选择也切不可忽视。由于磨球的直径、材质等不同，对样品的研磨效果也有不同，因此在样品前处理实，对磨球的选择还是很重要的。 高通量冷冻研磨仪在被应用研磨时，其对研磨珠和样品的准备通常在5:1左右，磨球和试品的体积不能超过球磨罐体积的百分之80，通常在百分之40到百分之60之间较佳。 在选择应用磨球时，通常会根据磨球的直径来进行选择；当磨球的直径3mm到40mm的范围内去选择。通常，研磨珠通过直径大小可分为大、中、小三个规格的磨球，大磨球可产生更大的动能，使样品可迅速破碎，小磨球可提高样品研磨的密度和一致性。 在样品前处理过程中，不仅要选择球磨罐的应用，还要选择研磨珠的应用，但不同材料的球磨罐匹配的磨球也不同。在使用聚氨酯材料的球磨罐时，是可以与玛瑙磨球、氧化锆、氧化铝等磨球一起使用；在使用聚合物聚乙烯球磨罐时，是可与氧化铝、氧化锆和玛瑙磨球一起应用；在使用聚四氟乙烯球磨罐时，是可与氧化锆、氧化铝、玛瑙磨球一起应用；在使用聚丙烯球磨罐时，是可与氧化锆、玛瑙磨球、氧化铝等一起应用；在使用尼龙球磨罐时，是可与不锈钢板、氧化锆、氧化铝、玛瑙磨球等一起研磨应用的。 在使用高通量冷冻研磨仪开展样品的研磨实验时，不但要牢记掌握研磨机的使用技巧，还要能够正确的选择出所需应用的耗材等，使用不同直径大小的磨球或不同规格的磨球，对样品的研磨处理效果都会不相一致，甚至有时还会影响到样品的研磨效果，所以对磨球的正确选择是很重要的一个选择应用哦！
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