2025-02-28 17:43:04纯化分离填料
纯化分离填料是用于生物大分子,如蛋白质、核酸等纯化过程中的关键材料。根据其性质与用途,可分为多种类型,如离子交换填料、亲和填料、凝胶过滤填料等。这些填料通过特定的相互作用机制,如静电作用、亲和作用、分子筛效应等,实现对目标分子的高效分离与纯化。纯化分离填料的选择需根据目标分子的性质、纯化条件及工艺要求综合考虑。在生物医药、生物技术等领域具有广泛应用。

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2022-11-23 13:24:00国粹的传承与创新 | 赛默飞全新中药分离纯化解决方案
国粹的传承与创新中医药是中华文明的传统瑰宝,凝聚着中华民族的博大智慧,也是创新药物研究的重要源泉。1971年,屠呦呦团队在极其艰苦的条件下从青蒿中成功发现了青蒿素,在过去50多年时间里拯救了全 球数以百万的生命,得到了世界的广泛认可和赞誉,于2015年获得诺贝尔生理学或医学奖。在近十年的时间里,中药有效成分的分离纯化技术也得到了长足的发展,赛默飞全新推出的中药分离纯化解决方案,利用高效液相色谱技术结合先进的馏分收集器,可以有效助力科研工作者快速发现和分离复杂中药基质中微量的化学成分,为后续的结构鉴定,药理毒理研究提供可靠的技术支持。以益母草为例,作为一种传统的中药材,其内含丰富的化学成分,具有多种药理作用。益母草中的己糖二酸是一种无毒的葡萄糖衍生物,有助于降低胆固醇和调控人体内的激素水平,但己糖二酸类成分极性较强且结构与性质相近,加之含量较低且稳定性较差,采用传统的分离纯化流程难度很大,但借助赛默飞全新推出的Vanquish™馏分收集系统,以上问题都可以迎刃而解。Vanquish集成馏分收集器亮点01 系统设计人性化Vanquish™集成式馏分收集器的灵活摆搭组合方式为用户提供卓 越的体验Vanquish™集成的馏分收集器(Vanquish Integral Fraction Collector, VFC)模块化的设计更加灵活,可以与液相系统整合到一起,使流路的连接尽可能的短,结合不同流量优化不同延迟体积管路,这种设计的优点是可以最 大程度减小延迟体积、降低峰扩散以及降低馏分重叠的风险,提高低含量组分收集的准确性;同时该模块还标配了先进的循环风冷控温技术,可以最 大限度提高馏分收集过程中暂存在样品盘中的馏分的稳定性。02 软件控制智能化结合 Chromeleon变色龙软件全自动方法向导和利用空气探针独 创的延迟体积测定技术,不需要额外辅助工具以及试剂可自动感知系统延迟体积。系统自带的向导可协助操作精确控制馏分收集器切阀时间,最 大限度提高收集精度和样品纯度。模拟馏分收集工具及可视化收集过程可以帮助客户灵活改进收集策略。03 触发模式多样化紫外检测器——峰触发的益母草提取液馏分收集示意图用户可根据实际应用及分离情况,针对性地选择时间或峰值触发馏分收集,提高分馏效率。同时,通过累积收集或者重组收集等特殊模式,可以达到目标馏分量的积累或者化繁为简的目的。针对中药样品化合物紫外吸收差异问题,可以使用紫外(UV或DAD)、电雾式检测器(CAD)等不同检测器信号触发,满足客户多样化需求。04 分馏结果“理想化”VFC采用的创新流路设计最 大程度降低了残留风险,VFC 具有的多种冲洗、清洗功能,可减少交叉污染,提高分馏纯度。馏分收集的重复性良好,回收率高。对馏分累积收集、浓缩以后,通过紫外光谱、核磁共振波谱及质谱等手段,可以对目标组分进行结构鉴定。本文总结精确的馏分收集是客户在整个工作流程中取得成功的基础。使用Vanquish分离纯化液相色谱系统对益母草提取液目标组分进行纯化馏分收集,重复性好,收集效率高,收集残留率低。说明Vanquish集成式馏分收集器方便开展分析级别的馏分收集,提高收集效率并降低残留,非常适合分析级别的纯化与分离的应用,能够满足科研以及企业客户的需求。
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2023-06-28 17:17:04全自动酸蒸清洗/纯化一体机——AC300
全自动酸蒸清洗/纯化一体机——AC300酸蒸超净清洗是一种自动、密闭、酸蒸汽清洗方法。通过内置可控温加热系统,利用酸蒸汽安全高效地对所 有可溶于酸中的任何痕量金属污染物进行超净清洗,并将其留在液体酸中,绝不会接触正在清洗的反应容器。功能特点:蒸汽单循环技术(OWV)——脏酸不回流,不污染净酸确保洗过的脏酸直接排出系统,而不会回流进酸池造成污染。而传统技术的脏酸要回流进酸池,然后再次蒸发出来去清洗,不断循环,导致脏酸不断污染净酸,从而酸蒸汽也越来越脏,无法胜任稍高污染度的清洗。真实温度控制技术(RTC)——确保蒸汽的高纯度准确测量,是控温精确的前提。采用RTC真实温度控制技术,温度探头经过特殊处理,具有与特氟龙一样的抗酸能力,直接插进酸液,监控酸液的真实温度,从而准确控制温度,确保酸蒸汽的纯度,杜绝其他品牌只监控加热器温度而无法准确控温,酸蒸汽纯度低的问题。PTC半导体加热器——最安全的加热器,没有之一!最适合长时间无人值守!加热器具有自我温度保护功能,在所有温控系统都失灵的极端情况下,其 最高温度也不会超过250℃,避免烧毁仪器甚至火灾。 清洗流程表:AC300让您的酸循环起来!废酸重复使用,节约资金,保护环境AC300不但完美胜任酸蒸清洗任务,还具有自我酸纯化功能,用户只需在软件中勾选酸纯化选项,甚至不用更换酸瓶,AC300即自动抽取废酸瓶中的废酸进行亚沸蒸馏纯化,纯化后的酸自动收集到纯酸瓶,以备下次使用。随后整个系统会自动被超纯水润洗和热空气干燥,以备下一轮的酸蒸清洗任务。废酸纯化流程图:转载自:http://www.hzxpz.com/
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2020-12-23 10:52:40纯化工艺的又一“新选择 "——羟基磷灰石填料Ca++Pure
羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)是目前ZJ有特征的混合模式填料之一,由于其结晶的化学结构、立体构造的特点,羟基磷灰石与抗体的Fab片段、Fc片段可发生相互作用。所以至今为止,羟基磷灰石在抗体及蛋白质的纯化、多聚体和残留核酸的去除等工艺中,作为精细纯化步骤的填料被广泛使用。并且,该填料兼具离子交换和金属亲和力,具有其他填料不具备的特殊分离能力,能够为生物大分子分离纯化提供独特的解决方案。羟基磷灰石纯化工艺的“新选择”!Ca++Pure-HA羟基磷灰石填料由东曹公司采用了优质ding级材料,通过专有工艺研发生产的高纯度的10nm×100nm六边形截面晶体,凝聚成球状颗粒。经过高温烧结,提高了机械强度和化学稳定性,能够满足工业规模的纯化要求。Ca++Pure-HA强大的特性使其可以在高流速和大型层析柱中重复循环使用。Ca++Pure-HA的应用范围分离抗体及蛋白质的多聚体、异构体、分解物、电荷异质体等目标产品内源性杂质分离DNA、HCP、病毒等来自生产工艺或混入的外源性杂质适用于ZZ(精纯)步骤中的分离纯化酸性条件下各填料稳定性对比上图显示的是,在装填有高吸附型羟基磷灰石Ca++Pure-HA、市售高吸附型 (B公司Type I) 和高耐久型 (B公司Type II) 羟基磷灰石填料的层析柱中,连续用弱酸性蒸馏水通液时,层析柱的理论塔板数的变化情况。市售品在大约80~90小时通液后,理论塔板数下降10%以上。与之相比,Ca++Pure-HA的理论塔板数虽然也会缓慢减少,但在约160小时之前,理论塔板数仍保持在90%以上。也就是说,Ca++Pure-HA属于高吸附型,且在酸性条件下的耐久性更好。单克隆抗体多聚体分离实例下图是使用Ca++Pure-HA精纯IgG样品的分离实例。配合使用氯化钾洗脱缓冲液可以有效去除mAb中的聚集体和降解物。从分析结果中可以看到,单体峰和多聚体峰中间的分辨率较高。随后,对纯化后的IgG样品进行尺寸排阻色谱分析。结果显示,单克隆抗体中多聚体的总量从18.8%降到了1.1%,显著降低。优异的耐碱性能从下图中可以看到,Ca++Pure-HA在0.5 mol/L的NaOH溶液中具有良好的耐碱性,即使超过65个CIP循环后,动态吸附载量也没有明显降低。
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2023-06-09 11:39:07经典磁珠一文解读:AMPure XP纯化实用技巧
基于SPRI技术的AMPure XP,采用超顺磁磁珠帮助纯化核酸片段,被广泛应用到NGS行业,PCR体系、酶切、连接反应体系的纯化。作为行业的“金标准“试剂盒,AMPure XP有哪些高频Q&A问题呢?AMPure XP怎么纯化长片段?怎么提高我的样本得率?产物纯度有什么优化的方向吗?我可以选择纯化250 bp的那一条条带吗?小贝总结了10条AMPure XP Q&A问题实用技巧:1、乙醇比例乙醇溶液必须至少70%。当将100%乙醇稀释至70%时,请确保在配置溶液合并之前分别测量水和乙醇的体积。用水补齐乙醇的稀释方式会导致浓度低于预期。请确保存储的乙醇在不使用时保持瓶盖拧紧。2、充分的混合在最 初磁珠与样品结合和洗脱混合期间,彻底的混合至关重要。可用略低于总孔体积的吸头进行混合。洗脱时,需要注意最 小洗脱体积(96孔规格为40 μL,384孔规格为15 μL),以确保磁珠充分重悬。还应保持足够的孵育时间,以确保核酸有足够的时间与磁珠结合或解离。由于样品的粘度,结合过程中的涡旋可能效率不高。3、大反应体系大体积反应可以采用更长的样品&磁珠结合和磁分离时间。可将binding结合时间增加到10分钟,并确保在弃上清液之前所有的磁珠均被充分磁分离。4、避免实验中磁珠损失如果在弃清液的过程中磁珠被吸入枪头,结合在这些磁珠上的核酸则会在这个步骤损失掉。首轮移除上清时,缓慢轻柔地操作,尽可能多地移除清液,同时确保不会干扰磁珠在磁环/磁力架上的吸附。如果意外吸出磁珠,请将所有磁珠重新打回孔中,让磁珠重新磁吸。随后,再度移除上清,尝试缓慢吸液或使用更细的枪头。小体积样品更容易受到磁珠损耗的影响,因为磁珠可能达不到孔中磁铁的水平位置。5、大片段样品的磁珠干燥10 kb以上的片段与磁珠结合非常紧密,如果样品变干则难以洗脱。尽可能完全地弃掉最 后一次乙醇清洗液,立即加入洗脱缓冲液并充分混合。保持盖子打开状态,乙醇在洗脱孵育期间将继续从孔中蒸发。6、低洗脱体积洗脱体积小会导致回收率降低。这是因为会有少量洗脱缓冲液始终包覆在磁珠上。该体积取决于孔的形状和孔中的磁珠量,因此较小的洗脱体积将导致相对较高比例的洗脱液残留。7、当你用紫外吸收法检测回收率不只是PCR双链产物,体系中过量的引物和核苷酸同样产生吸收。因此测量未纯化的PCR反应,可能获得高于实际PCR产物浓度的吸光度值。对比纯化前后的吸收值,则会导致回收率看起来比实际低。小贝建议:在琼脂糖凝胶上运行等量的未纯化PCR反应产物与纯化后的PCR反应产物(例如1/4的未纯化PCR产物和1/4的洗脱液)以便检查回收情况,或使用基于特异性荧光染料的测定,例如PicoGreen。8、引物的残留AMPure XP试剂与PCR反应混合后的试剂最 终浓度决定了PCR产物与磁珠结合的片段大小。AMPure XP主要结合> 100 bp的PCR产物,并丢弃小于50个碱基的引物。较大的引物和引物二聚体可以与磁珠结合。请确保您的PCR产物在循环过程中没有蒸发导致体积变小,并添加正确体积的试剂(见下表)。确保用乙醇冲洗在混合和结合过程中样品有接触到孔内壁的任何地方。如果在纯化体系中存在过量的引物,减少该PCR反应的引物量也可以是一个优化的方向。9、下游酶反应效果不佳如果您的下游酶反应对痕量乙醇极其敏感,请添加两分钟的保守干燥步骤。请注意,大片段会与磁珠紧密结合,在磁珠完全干燥后可能难以洗脱。10、如何选择性保留200-500 bp核酸片段AMPure XP是用于PCR产物纯化的试剂盒。对于片段筛选的应用,请考虑使用 SPRIselect试剂盒。有关 SPRIselect 片筛的更多信息,请访问经典磁珠一文解读:NGS片段筛选比例计算
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2021-10-28 16:08:14制氮机是由哪些填料构成
 制氮机是一种重要的机械设备,要先了解、学习可以打开我们的网站,好好体验一下该产品都有哪些重要性,只有自己正确认识和了解以后,并且可以深入探究的话,而不是停留在表面上。  1.制氮机的日常保养工作,复杂吗?此外,制氮机中一个完整的系统,主要是包括了哪些?  制氮机的日常保养工作,其从专业角度来讲的话,其是不复杂的,所以,是容易进行掌握和操作的。而制氮机中的系统,其在构成上,主要是包括了压缩空气系统、空气净化系统、空气分离系统这三个,都是很重要的,缺一不可。  2.制氮机中的PSA制氮系统,其在填料上,主要是有哪些?  制氮机中,对PSA制氮系统这一个,其在填料上,是有好几层的。其中的吸附剂,是为碳分子筛,然后,还有活性氧化铝干燥剂,起到保护和干燥气体这两个作用。在层数上,一般是为三层。  3.制氮机出口氮气流量,是为200 Nm3/h,注入容积是为5万方的容器,那么,需要多长时间?  根据给出的上述具体这些条件,如果想要得出具体答案的话,那么,是要看具体情况了,其中主要的,是为容器压力。如果容器压力和氮气出口压力是一样的话,那么,可以按每小时算,即可;如果,其压力不同的话,那么,是要另外计算了。  相信对于制氮机,上述的问题能帮大家对该设备有了近一步认识和了解,在这个时候是能增加自己在这一方面的专业知识。
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