- 2025-01-21 09:32:06普通氨基酸
- 普通氨基酸是构成蛋白质的基本单位,具有氨基和羧基官能团。它们在生物体中发挥着至关重要的作用,参与蛋白质合成、能量代谢、信号传导等多种生物过程。普通氨基酸种类繁多,根据侧链(R基)的不同可分为不同类型,如甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸等。这些氨基酸在人体中有的可自身合成,称为非必需氨基酸;有的则必须从食物中摄取,称为必需氨基酸。它们在维持生命活动、促进生长发育等方面具有重要意义。
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普通氨基酸问答
- 2022-04-18 09:18:05普通气体发生器的介绍
- 下面仅就市场上常用的三种气相色谱仪的气体发生器(氢气发生器、氮气发生器、空气泵)的结构、特点做简单的分析。 一. 气体发生器的干燥过滤装置 下面谈谈气体发生器上的干燥过滤器,无论是分体的发生器还是组合的发生器,都需要对输出的气体进行干燥净化,即除湿除烃(或者除油)等。现有的除湿除烃方法基本都采用吸附剂吸附法,吸附剂大体都采用变色硅胶、分子筛和活性炭。由于使用变色硅胶除湿,需要定期观察硅胶的变色程度,采用透明的有机玻璃材料或者工程塑料成为优选,不锈钢管由于不能随时观察硅胶的颜色不太适用。过滤管的安装样式1)吊装式:净化管的进气口和出气口都在仪器上部,出管口向下,从电解分离池或者压缩机过来的气体首先从固定盖中间内突起的进气口向下通过内衬芯管进入干燥剂底部,然后经过吸附剂的过滤后再从向上返回到固定盖周边的出气口,从而保证气体经过有效的过滤后再输出。2) 立装式:净化管的进气口和出气口都在仪器底部,开口向上。此方法有两种:a净化管内加衬管,吸附剂装入衬管内,气体先经吸附剂吸附后再经净化管与衬管中间的缝隙到净化管底部输出, 此,方法由于受结构及加工工艺的影响,衬管不易从净化管内取出,甚者气体受吸附剂阻力的影响而不流经吸附剂,造成未过滤的气体直接输出,影响色谱的正常使用;b净化管内加导管吸附剂装入净化管内,气体先经吸附剂吸附后再经导管输出,此方法多为不锈钢管采用,但不锈钢管为不透明不便于用户直接观察吸附剂的变化;不方便使用。由于受工作原理的限制,氮气发生器和氢气发生器电解分离池出来的气体湿度都比较大,当气体经电解分离池后或多或少都会有水汽凝结成水珠、采用立装式固定净化管,液滴由于重力的作用,会在更换过滤器时滴入出气口,进入色谱仪的管道,造成管路系统的污染。吊装式避免了以上的问题。我单位现有的净化管完全采用吊装方式。有些厂家为了降低电解分离池输出气体的湿度,在电解池和净化管之间加装了汽水分离器,由于分离器内的过滤材料多为烧结的粉末金属材料,电解分离池输出的未干燥气体为碱性气体,碱性气体会腐蚀分离器内粉末金属材料甚至造成堵塞,影响发生器的正常使用,极端情况可能会由于堵塞造成压力过高引起爆炸,希望用户使用时一定注意。二、 高纯氢发生器目前市场上为气相色谱配套的氢气发生器按电解膜材料分主要有碱石棉膜、离子膜、钯金属膜三种。碱石棉膜价格低廉、使用方便、便于维护;离子膜价格稍高、且目前国内此项技术不太成熟、同时离子膜对电解水质要求较高,水的电导率不高时会产生离子膜“中毒”现象,更换离子膜的费用也比较高。钯金属膜制氢价格高、以300ML/min的输出量计算,价格大约在4万元左右。若使用不当、会使钯金属表面氧化,造成电解率下降,影响正常的使用。 三、 空气泵目前市场上为气相色谱仪配套的空气泵,其压缩机主要以冰箱压缩机为主,另外就是采用摆动活塞式的压缩机,摆动活塞式压缩机又分为进口和国产。冰箱压缩机价格低廉、但是压缩后的气体含油,所以需要经过活性炭脱油。另外由于冰箱压缩机一般需要闭环运行。但是在色谱仪空气泵上使用时,是开环使用,这样当空气输出流量很大时,润滑油随工作温度的升高蒸发很快,压缩机会由于缺少润滑油而损坏。摆动活塞式压缩机的活塞是无油润滑,产气量大,即使系统出现漏气也不会造成压缩机的损坏,抗误操作的能力强。通过合理安装可以降低其工作噪音(55dba)。工作的可靠性大大高于冰箱压缩机式的空气泵。 四 、氮气发生器 氮气发生器从制氮原理上来分有中空纤维膜分离法、变压吸附法、电化学分离法三种。1)中空纤维膜分离法:氮气纯度99.999%,流量范围为0-10升/min。2)变压吸附法:氮气纯度99.999%,流量范围为0-10升/min。3) 电化学分离法:氮气流量在0.3-0.5L/min, 氧含量可以控制在几个ppm, 气体露点根据吸附剂效能可以达到-55℃。目前国内配套气相色谱仪的氮气发生器主要是该类型的。电化学分离法的氮气来自于在电解分离池, 空气中的杂质气体经过电解分离池后, 在电解液和贵金属及电场作用下被分离。电解分离池内电解液主要为KOH或NaOH与蒸馏水配制而成, 一些厂家为了节省制造成本,选用低价格的不锈钢(贵金属的含量极低), 因而使电解分离池在强碱液及电场的作用下极易损坏,降低了氮气的纯度,影响到仪器的正常使用。电化学分离法制造氮气还要求整个气液系统有完善的自动控制功能,否则在突然断电停机时,电解分离池内没有电场的作用,空气不能被分离,输出将的是大量的空气,如果不能及时的关闭氮气输出,大量的空气直接进入色谱柱将造成色谱柱提前损坏。所以在氮气输出气路中增加断电保护切换阀是必须的。 目前市场上的氮气发生器一般都具有启动后延时排空的功能,即氮气发生器在刚刚开机的10分钟内,由于气体纯度低及管路系统内有空气,所以需要把输出的气体排空到大气。排空气体的流量控制,大多数厂家都采用在排空阀出口加固定气阻,这种方法在排空的过程中,可以控制输出的气体流量,但是排空结束,氮气切换到色谱气路中时,由于输出的氮气要很快在连接的管路内建立压力,所以会使氮气发生器输出流量很快增大,电解分离池在短时间内来不急分离空气,从而使大量的没有分离过的空气直接进入色谱系统,造成色谱柱损坏或者脱氧管很快失效。一些厂家在排空口前增加针型阀来限流,这种方法hui出现另外的问题,当氮气系统从排空切换到正常供气状态时,由于色谱仪的柱头压力逐渐上升稳定后,针型阀的输出流量会慢慢变小,如果要想得到正常的流量需要再次调节针型阀通径,这样会使稳定的高纯度氮气系统再次被污染。要想的到高纯度而又稳定的氮气除克服上述问题,还须克服电解分离池的堵塞和返液现象。
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- 2022-08-17 10:08:59普通PCR引物 VS qPCR 引物
- 导读说起引物,大家都再熟悉不过了。引物,在核苷酸聚合作用的起始时,可以刺激合成另一种大分子,并与反应物以共价键形式连接的序列。在核酸化学中,引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链。无论是做普通PCR还是荧光定量PCR,设计合适的引物是非常关键的一步。普通PCR和荧光定量PCR的检测方式具有较大的差别。荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光,普通PCR通过检测插入DNA中核酸染料的量来测定PCR产物量。荧光定量PCR可以通过扩增曲线进行精确定量,普通PCR则是通过电泳的方式进行定性分析。那么在普通PCR和荧光定量PCR的引物设计方面,有什么相同点和不同点呢?今天小编就给大家汇总一下。相同处:▶ 序列的查找是一致的。▶ 序列选取应在基因的保守区段。▶ 选取合适的扩增片段大小。▶ 避免引物自身或与引物之间形成4个或4个以上连续配对。▶ 避免引物自身形成环状发卡结构。▶ Tm值在55-65℃,GC含量在40%-60%。▶ 引物之间的Tm相差避免超过2℃。▶ 引物的3’端避免出现3个或3个以上连续相同的碱基。不同处:荧光定量PCR 引物▶ PCR产物长度:要求在300bp以内,一般选80-150bp之间。▶ 引物特异性:对引物要求高,尽量减少引物二聚体的产生,熔解曲线要求单一产物。▶ 扩增效率:荧光定量 PCR的目的是进行定量或者相对定量,扩增效率应在90%—110%之间。▶ 多对目的基因同时扩增,文献上查来的引物条件会不同,需要设计尽可能条件一致的引物。▶ 目的基因含量比较低时,需要设计灵敏度比较高的引物。普通PCR 引物▶ 普通PCR的扩增长度,根据实验的要求不同,一般是从150bp到几千bp不等。▶ 相对于荧光定量PCR,普通PCR对二级结构要求较低。▶ 对扩增效率要求不高。▶ 可以选用梯度PCR仪,选择不同退火温度,对引物退火温度要求不需要一致。Cielo™实时荧光定量PCR系统Harness of the power of qPCR☑ 数据可靠性:连续1000次实验后,结果高度一致。☑ 应用灵活性:提供多种qPCR应用分析。☑ 流程智能化:中英文用户界面,触控操作,可多机联用。☑ 在线便捷性:主机可独立运行qPCR程序,数据可USB、Wi-Fi等网络传输。
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- 2017-09-11 19:56:26复合氨基酸和普通氨基酸片有什么区别?
- 复合氨基酸和普通氨基酸片有什么区别? 我想利用它来,哪中比较好???
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- 2022-07-11 09:57:23抑郁有可能是氨基酸摄入过多了
- 饮食正是影响肠道微生物群组成的主要因素之一,因此饮食如何通过微生物群来影响大脑健康和精神疾病,也受到了很多研究的关注。日前,西班牙赫罗纳生物医学研究所(IDIBGI)的一支研究团队,在人类以及果蝇、小鼠等多个物种中证明,抑郁的严重程度与血液中一种常见氨基酸——脯氨酸(proline)含量升高显著相关,而血液中的脯氨酸水平则取决于饮食以及肠道微生物的组成与代谢活性。研究结果发表在《细胞》旗下子刊Cell Metabolism上。伦敦国王学院(King’s College London)的代谢专家Sandrine Claus教授评论说:“据我所知,这是***次有研究团队真正证明,脯氨酸摄入量与抑郁行为之间存在因果关系。”研究人员从一份调查食物摄入频率的问卷中注意到了脯氨酸。这份问卷调查包含人们日常摄入的80项食物,涉及各种膳食营养素。研究人员将数十名参与者的问卷调查结果与他们的抑郁症评估得分进行了比较。结果显示,各项膳食营养素中,脯氨酸与抑郁特征的关联***为明显。在对参与者进行血液检测后,结果同样显示,血液循环中的脯氨酸含量与抑郁严重程度显著相关。那些膳食脯氨酸摄入量高且血液脯氨酸高于中位数的受试者,抑郁评分***高。“我们发现,不仅是在重性抑郁中,在中性抑郁患者中也可以看到脯氨酸循环含量升高的现象。”研究人员强调。然而,研究人员敏锐地注意到数据中有些不一致的地方。简单来说,通过饮食摄入脯氨酸同样多的人,血浆的脯氨酸水平并没有全都升高。在对这些参与者的血液和粪便样本进行多组学分析后,研究人员找到了解释:血浆脯氨酸水平与特定几种肠道细菌(例如某些乳酸杆菌属的细菌)的存在及其活性有关。摄入的脯氨酸量相同,但血液循环中的脯氨酸含量有差异的个体,肠道菌群的组成不同,而其中脯氨酸较高的人,肠道菌群的组成特征与较严重的抑郁症密切相关。▲该研究示意图脯氨酸与抑郁症之间的联系在后续的动物实验中得到了进一步验证。研究人员给一些小鼠的饮食中额外添加了脯氨酸补充剂,一段时间后,这些小鼠的脯氨酸循环含量高于普通饮食的小鼠,而它们在承受压力时,也会比对照组小鼠表现出更多的类似抑郁的行为,例如不再对好喝的糖水感兴趣。小鼠实验还显示了肠道菌群在其中起到的重要作用。研究人员从20名人类志愿者中获取了粪便样本,通过粪便移植将其中的肠道菌群植入无菌小鼠体内。这些志愿者中,有一部分人的血浆脯氨酸水平很高,抑郁程度也相对严重。结果他们的肠道菌群进入小鼠肠道后,小鼠的行为也跟着有了变化。研究人员发现,来自抑郁评分***高的受试者的肠道菌群,诱导小鼠出现了更明显的抑郁情绪特征。不仅如此,研究人员还通过RNA测序发现,粪便移植后的小鼠,大脑中一些基因表达发生了变化。这些小鼠的前额叶皮层(这个脑区与认知有关)中,与抑郁行为相关的基因表达增加,以及一个关键基因——编码脯氨酸转运蛋白的基因slc6a20a表达增加。而这个脯氨酸转运蛋白的表达量高低,在果蝇实验中得到证明,会影响动物是否更容易出现抑郁行为。尽管无法在人类身上进行类似的实验,但综合这些动物实验的结果来看,特殊的肠道菌群通过脯氨酸代谢影响了大脑在发展抑郁症状方面的功能。研究人员指出,后续他们将进一步在人群中验证脯氨酸含量不同的饮食对抑郁症状与表现的影响,研究结果有望通过针对肠道菌群和膳食脯氨酸为有效抑郁症打开新的窗口。生物磁珠对细胞筛选的方法已日渐成熟,原理是将包被一抗的磁珠与细胞表面对应的分子特异性结合,或者将包被二抗的磁珠与已经与细胞表面分子特异性结合的一抗结合。磁珠携带与之结合的细胞吸附与分离柱或试管上,实现阳性细胞或阴性细胞的分离。洛阳吉恩特生物自主研发生产了各类生物磁珠,可以实现稳定的实验结果。
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- 2022-11-29 12:00:18【Application Note】受阻、非标准氨基酸的微波辅助多肽固相合成
- 摘要•微波增强的多肽固相合成(SPPS)能够快速有效地进行大体积氨基酸(如Aib和N-Me-A)的常规困难偶联• 酰基载体蛋白衍生物VQAibAibIDYINGOH和VQ(N-Me-A)(N-Me-A)IDYING-OH的合成在2小时内完成,纯度分别为95%和86%• GEQKLGAibAibAibASEESLG-NH2的合成在3小时内完成,纯度为 89%介绍在许多生物学相关的化合物中都可以找到受阻的非标准氨基酸,例如α-氨基异丁酸(Aib)和N-甲基丙氨酸((N-Me)-A)(图1)1-3。然而,包括Aib或N-甲基化氨基酸的肽合成已被证明具有挑战性;第二个甲基引入的空间位阻,无论是在α-碳还是酰胺氮上,都使这些氨基酸衍生物在传统SPPS中难以偶联。图1 位阻、非标准氨基酸然而,通过使用微波增强的SPPS,与受阻非标准氨基酸相关的困难已被最小化。在SPPS中使用微波能量可以快速有效地完成大体积氨基酸(如Aib和N-甲基丙氨酸)的常规困难偶联4,5。材料和方法试剂N-α-Fmoc-α-氨基异丁酸获自AnaSpec(Freemont,CA)。Fmoc-N-Me-Ala-OH获自Peptides International(Louisville,KY)。所有其他氨基酸均获自CEM Corporation(Matthews,NC),并含有以下侧链保护基团:Asn(Trt)、Asp(OMpe)、Gln(Trt)、Glu(OtBu)、Lys(Boc)、Ser(OtBu) 和Tyr(tBu) 。Oxyma Pure和Rink Amide ProTideTM LL树脂购自CEM Corporation(Matthews,NC)。N,N-二异丙基碳二亚胺(DIC)获自CreoSalus(Louisville,KY)。Fmoc-Gly-Wang Resin LL购自NovaBiochem(St.Louis,MO)。哌啶获自Alfa Aesar(Ward Hill,MA)。三氟乙酸(TFA)、3,6-dioxa-1,8-octanedithiol(DODT)、三异丙基硅烷(TIS)和乙酸购自Sigma-Aldrich(St.Louis,MO)。二氯甲烷(DCM)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)和无水乙 醚(Et2O)购自VWR (West Chester,PA)。HPLC级水(H2O)和HPLC级 乙 腈(MeCN) 购 自 Fisher Scientific (Waltham, MA) 。多肽合成:GEQKLGAibAibAibASEESLG-NH2使用CEM Liberty Blue™自动微波肽合成仪在Rink Amide ProTide LL树脂(离子交换容量:0.18meq/g)上以0.1mmol规模制备多肽。用哌啶和Oxyma Pure在DMF中进行脱保护。使用DMF中的DIC、DMF中的Oxyma Pure和5倍过量的Fmoc-AA-OH进行偶联反应。使用具有TFA/H2O/TIS/DODT的CEM Razor高通量肽切割系统进行切割。裂解后,肽在无水乙 醚中沉淀并冻干过夜。多肽合成:VQAibAibIDYING-OH使用CEM Liberty Blue自动微波肽合成仪在FmocGly-Wang LL 树脂(离子交换容量:0.33meq/g)上以0.1mmol规模制备。用哌啶和Oxyma Pure在DMF中进行脱保护。使用DMF中的DIC、DMF中的Oxyma Pure和5倍过量的Fmoc-AA-OH进行偶联反应。使用具有 TFA/H2O/TIS/DODT的CEM Razor高通量肽切割系统进行切割。裂解后,肽在无水乙 醚中沉淀并冻干过夜。多肽合成:VQ(N-Me-A)(N-Me-A)IDYING-OH使用CEM Liberty Blue自动微波肽合成仪在FmocGly-Wang LL 树脂(离子交换容量:0.19meq/g)上以0.1mmol规模制备肽。用哌啶和Oxyma Pure在DMF中进行脱保护。使用DMF中的DIC、DMF中的Oxyma Pure和5倍过量的Fmoc-AA-OH进行偶联反应。使用具有 TFA/H2O/TIS/DODT的CEM Razor高通量肽切割系统进行切割。裂解后,肽在无水乙 醚中沉淀并冻干过夜。多肽分析在配备有PDA检测器的Waters Acquity UPLC系统上分析肽,该检测器配备Acquity UPLC BEH C8柱(1.7mm和2.1x100mm)。UPLC系统连接到Waters 3100 Single Quad MS用于结构测定。在Waters MassLynx软件上进行峰分析。使用(i)H2O和(ii)MeCN中的0.1%TFA梯度洗脱进行分离。结果在Liberty Blue自动微波肽合成仪上GEQKLGAibAibAibAibASEEDLG-NH2的微波增强SPPS产生了89%纯度的目标肽(图2)。图2.GEQKLGAibAibAibASEEDLG-NH2的HPLC色谱图在Liberty Blue自动微波肽合成仪上的VQAibAibIDYING-OH的微波增强SPPS产生了纯度为95% 的目标肽(图3)。图 3:VQAibAibIDYING-OH的HPLC色谱图在Liberty Blue自动微波肽合成仪上的VQ(N-Me-A)(N-Me-A)IDYING-OH的微波增强SPPS产生了纯度为86%的目标肽(图4)。图 4:VQ(N-Me-A)(N-Me-A)IDYING-OH的HPLC色谱图结论微波增强的SPPS能够快速有效的进行大体积氨基酸(如Aib和N-Me-A)的常规困难偶联。常规合成GEQKLGAibAibAibASEEDLG-NH2需要40小时且纯度< 10%,但微波增强SPPS在3小时内产生目标肽且纯度为89%。此外,酰基载体蛋白衍生物VQAibAibIDYING-OH和VQ(N-Me-A)(N-Me-A)IDYING-OH的合成在2小时内完成,纯度分别为95% 和86%。微波增强的SPPS已被证明是一种有效的工具,可以最 大限度地减少SPPS中受阻的非标准氨基酸相关的困难。参考文献Mueller, P.; Rudin, D. O. Nature. 1968, 217, 713–719.Rebuffat, S.; Goulard, C.; Hlimi, S.; Bodo, B. J. Pept. Sci. 2000, 6, 519–533.Ahmed, G.; Elger, W.; Meece, F.; Nair, H. B.; Schneider, B.; Wyrwa, R.; Nickisch, K. Bioorg. Med. Chem. 2017, 25, 5569–5575. Collins, J. M. Microwave-Enhanced Synthesis of Peptides, Proteins, and Peptidomimetics. In Microwaves in Organic Synthesis, Third Edition; de la Hoz, A.; Loupy, A.; Wiley-VCH: Weinheim, 2012; 897–959.Ben Haj Salah, K.; Inguimbert, N. Org. Lett. 2014, 16 (6), 1783–1785.
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