- 2025-01-10 17:02:12丙二醇检测方案
- 丙二醇检测方案通常涉及多种分析仪器与方法。常用方案包括使用气相色谱仪(GC)进行定量分析,通过特定的色谱柱与检测器,如FID,实现高灵敏度检测。此外,高效液相色谱仪(HPLC)也是常用工具,采用合适的流动相与检测波长,能准确测定丙二醇含量。另外,还有利用近红外光谱仪进行快速筛查的方法,适用于大批量样品。选择方案时需考虑样品性质、检测限及精度要求,确保结果的准确性与可靠性。
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- 经初步调查分析,此次在涉事企业生产的纯牛奶中检出丙二醇的问题,系在生产过程中超范围使用食品添加剂香精所致。
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丙二醇检测方案问答
- 2022-08-09 15:01:18ibidi实验方案|肿瘤细胞2D侵袭检测方案
- AnielloFederico*,JochenUtikalSkinCancerUnit,GermanCancerResearchCenter(DKFZ),69120Heidelberg,Germany.*Correspondingauthor.E-mailaddress:a.federico@dkfz-heidelberg.de为了研究肿瘤微环境影响下肿瘤细胞的运动性和侵袭特性,建立了体外2D侵袭方案。这种2D侵袭方案是一种共培养试验,在这种情况下,是由肿瘤和基质细胞(例如成纤维细胞)组成的。一旦两种细胞类型接触,在不同的条件下评估侵袭成纤维细胞单层的肿瘤细胞的数量,在我们的研究中,我们在模拟实体肿瘤微环境中发现的条件,例如与基质细胞(成纤维细胞)的相互作用以及成纤维细胞释放的可溶性因子(Nnetu等,2012)。我们使用A375黑色素瘤细胞系和真pi成纤维细胞进行了此测定。黑色素瘤细胞激活成纤维细胞,继而维持肿瘤细胞的生长,恶性转化和耐药性(Flach等,2011)。然而,在刺激所测试的抗ai化合物后,我们发现与成纤维细胞直接接触的黑素瘤细胞显示出运动能力受损并且未能侵袭成纤维细胞层。材料和试剂1. GFP-A375细胞系(ATCC)2. 番茄皮成纤维细胞(从健康患者中分离)3. MEF细胞培养基4.PBS(Sigma-Aldrich;D8537)5.胰蛋白酶-EDTA溶液(Sigma-Aldrich;T3924)6. 台盼蓝溶液(Sigma-Aldrich;93595)7.DMSO(CarlRoth;A994.2),在0.1%最终浓度下使用8.MithramycinA(BioTrend;10-2085-5mg),在300nm浓度下使用,用DMSO稀释仪器设备1. 层流净化罩2. 12/24孔多孔板(GreinerBio-One)3. 台式离心机4. 细胞计数器5. 2孔插件(ibidi: 80209)/预置2孔插件培养皿(ibidi:81176)6.细胞培养管7. 涡旋8. 镊子9. 光学显微镜10. 荧光显微镜11. NIS-Elements软件ibidi:81176实验流程01. 将GFP-A375和番茄成纤维细胞系稳定地保存在MEF培养基中,在37°C和5%C02加湿培养箱中。02. 当细胞达到亚融合度(约80%融合度)时,在带有PBS的通风橱中清洗它们,以去除死细胞和碎片。03. 在培养箱中用胰蛋白酶-EDTA溶液胰蛋白酶消化细胞约5分钟,然后添加MEF培养基以阻止反应。04. 将细胞悬浮液收集在15ml细胞培养管中,并用台式离心机(1500xg,5´,RT)短暂离心。05. 将细胞重新悬浮在新鲜培养基中;将一体积的细胞悬液与另一体积的台盼蓝溶液混合,用细胞计数器计数活细胞。06. 在MEF缓冲液中以4x105细胞/ml的浓度稀释细胞。07. 在多孔板上,在每个孔的中间放置一个Culture-Insert2孔(2孔培养插件)。08. 用75µl(3x104细胞)FP-A375细胞填充插入物一侧,并用番茄成纤维细胞填充另一侧。用移液器上下混合插入物中的细胞,以确保细胞完全分布。09. 将多孔板放在培养箱中,放置过夜。10. 第二天,在镊子的帮助下,小心地从每孔中取出培养基和插件,并用PBS清洗。11. 小心除去PBS,然后加入新鲜的MEF培养基。12. 用光学显微镜检查GPF-A375与Tomto成纤维细胞之间产生的间隙的闭合状态。13. 一旦每个孔中的间隙完全闭合,请使用荧光显微镜和成像软件获取荧光图像。确保肿瘤细胞尚未侵入成纤维细胞单层。14. 小心地除去培养基,并在控制组孔中添加培养基+0.1%PBS,在处理组孔中添加培养基+300nM丝裂霉素A。将板放在培养箱中24小时(处理孵育时间)。24小时后,在荧光显微镜下重新采集共培养孔,以评估治疗组与对照组(绿色荧光细胞散布在红色标记层上)的肿瘤细胞侵袭行为的任何变化(图2)。图1:2D侵袭系统的示意图图2:2D侵袭检测的荧光图像将黑素瘤细胞和成纤维细胞共培养,然后暴露于300nmMithramycinA(或DMSO)。24小时后,评估侵袭成纤维细胞层的肿瘤细胞的数目。A375细胞显示出大规模的侵袭行为,受到MithramycinA治疗的损害。比例尺:500μm。备注:1.此处描述了MEF培养基组成(参考文献1)。2.此文仅供参考。3.此实验方案来自ibidi的实际用户,更多详情可联系本文作者。参考文献:1.MithramycinAandmithralogEC-8042inhibitSETDB1expressionanditsoncogenicactivityinmalignantmelanoma. FedericoA,SteinfassT,LarribèreL,NovakD,MorísF,NúñezLE,UmanskyV,UtikalJ.MolelucarTherapy-Oncolytics2020;doi: https://doi.org/10.1016/j.omto.2020.06.001 (Methoddescribedinthisprotocolwasincludedinthispublishedarticle).2.Theimpactofjammingonboundariesofcollectivelymovingweak-interactingcells. NnetuKD,KnorrM,KäsJ,ZinkM.NewJournalofPhysics2012;doi:https://doi.org/10.1088%2F1367-2630%2F14%2F11%2F1150123.Fibroblastscontributetomelanomatumorgrowthanddrugresistance. FlachEH,RebeccaVW,HerlynM,SmalleyKS,AndersonAR.Molecular pharmaceutics2011;doi:10.1021/mp200421k
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- 2022-12-26 12:55:446种脂溶性维生素的快速检测方案
- 维生素是维持人体生命活动所必需的一类营养物质,大多数由食物供给,属于人体内的一类调节物质。维生素分为水溶维生素和脂溶维生素,脂溶性维生素是不溶于水而溶于脂类的一类维生素,在人体生长、代谢、发育过程中发挥着重要作用,包含维生素A、维生素D、维生素E和维生素K。VD在肝脏可转化为25羟基维生素D(25OH-VD),其浓度水平与体内的VD直接相关,因此体内25OH-VD2、25OH-VD3可作为检测VD水平的生物标志物。VK是激活凝血因子以及蛋白质C和S的必须辅助因子,目前已知主要有K1、K2、K3、K4几种形式,四烯甲萘醌VK2(MK4)既是VK2的家族成员,也是肝外组织中K1的代谢物。当这些脂溶性维生素缺乏或过量时均会对人体造成伤害。具体见下表:一次性评估体内多种维生素水平,才能全面“查漏补缺”。准确测定人体中性维生素的含量,可以帮助临床医生准确评估人体维生素营养状态、吸收障碍或毒性水平。解决方案沃特世团队依托质谱平台ACQUITY UPLC I-Class Xevo TQ-S IVD和 TQ-XS IVD开发了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术在维生素检测中的应用,在5 min内即可完成6种脂溶性维生素的同时分析。前处理采用Andrew Alliance机器人搭配Oasis μElution PRiME HLB的固相萃取板,实现样本前处理自动化,并解决LC-MS/MS检测维生素的各种挑战和难点。该方法检出限低、分离效果好、稳定性佳,可满足临床高通量自动化检测需求。图1. Andrew+移液机器人用于6种脂溶性维生素前处理操作时的工作台布局,以及ACQUITY UPLC I-Class Xevo TQ-XS IVD检测平台。实验部分 前处理样本预处理:取100 μL 血清或者BSA稀释标准品,加入内标工作液,涡旋混匀,随后加入乙腈沉淀蛋白,离心取上清液,做SPE净化。 液相色谱条件液相色谱系统:ACQUITY UPLC I-Class系统色谱柱:ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱, 1.7 μm,2.1 mm x 50 mm进样体积:5 μL结果与讨论 高通量,一针进样,同时检测该方案5 min内即可完成6种脂溶性维生素的同时测定,可同时检测血清中维生素A(VA)、25-羟基维生素D2(25OHVD2)、25-羟基维生素D3(25OHVD3)、维生素E(VE)、维生素K1(VK1)、四烯甲萘醌K2(VK2-MK-4),真正实现“一针进样,同时检测”。图2. 6种脂溶性维生素的标准品和血清色谱图。 灵敏度高,线性范围宽,满足临床检测需求正常人体血清中维生素A含量113 - 977 ng/mL;维生素E含量3.8 - 17 μg/mL;维生素D含量20 - 50 ng/mL;维生素K1含量为0.10 - 2.20 ng/mL。由于6种脂溶性维生素在血清中含量差异较大,VK1、MK4和25OH-VD2含量低,同时测定高低浓度物质是串联质谱测定的难点,常存在低浓度、灵敏度差及高浓度过饱和现象。而Xevo TQ-S IVD和TQ-XS IVD优异的灵敏度及超宽线性范围,可实现同时准确定量这几种维生素。自动化前处理,满足高通量检测需求Andrew+机器人可在无人值守状态下自动完成移液、震荡、混匀和96孔板SPE前处理过程。不仅大幅节省了样品处理的时间,提高了通量,还可以简化样品制备过程、减少实验失误,从而确保分析结果的稳定重现。手动前处理96个样本的时间大概是2 - 3 h。如果用Andrew+做自动化前处理,只需要提前把溶剂和样本放到设置好的Domino blocks里中就可以完成自动化前处理和SPE流程。过程仅需不到1 h就可以完成。结论本方案使用Waters UPLC I-Class超高效液相色谱系统搭载UPLC色谱柱进行分离,再用Xevo TQ-S IVD和TQ-XS IVD串联四极杆质谱仪对血清样品中6种脂溶性维生素定量检测。96个样本的前处理不到1 h,每个样本的液相分析时间仅5 min,每天可以检测至少200例样本。6个脂溶性维生素的加标回收率85% - 115%之间,精密度RSD
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- 2023-06-07 16:12:08【成套方案】之「医学硬组织切片成套制备方案」
- 1、新鲜硬组织取材固定(以牙齿为例):根据材料尺寸/性质,通过切割机获得所需样本,再使用4%多聚甲醛或10%福尔 马林溶液固定至少24小时;2、脱水浸润:酒精上行脱水:无水乙醇:7200=1:1; 无水乙醇:7200=3:7; 7200原液I、II;3、样本包埋光聚合法包埋:7200原液+固体包埋颗粒(12小时);配合真空冷镶嵌机进行抽真空,放置模具自动灌胶,去除气泡,修复包埋样本4、粘接样本块至载玻片采用T4000树脂粘接,并注意液体比例,配合压合台确保粘样均匀5、切割出目的切面利用真空吸盘固定,采用切割机对包埋块进行切割,使其暴露出目的切面6、目的切面打磨抛光通过真空吸盘固定包埋块,配合磨片机对目的切面进行打磨抛光7、粘接平行平面利用光固化技术,配合压片装置将平行载片添加到已经过抛光处理的目的切面8、切割获得组织切片(厚)使用切割机及真空吸盘再次对载片进行分离切割,此处可获得厚度约100微米的(厚)切片9、磨片至所需厚度使用磨片机对(厚)切片进行最 终磨片,使用砂纸作为介质,实时检测磨削量,得到最 终的薄片(<10μm)10、染色封片HE染色、甲苯胺蓝染色、Ladewig染色法等对切片进行染色,中性树胶封片11、组织切片显微观察可使用生物显微镜进行显微图像采集拍照
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- 2023-07-27 17:18:25方案速递|最新《猴痘防控方案》发布,天隆方案助力猴痘疫情防控
- 近日,国家疾控中心及国家卫健委联合发布最新《猴痘防控方案》,旨在进一步做好猴痘防控工作,及时有效应对猴痘疫情,提升猴痘防控工作的科学性、精准性和有效性。最新方案 要点01《猴痘防控方案》指出,猴痘防控应该坚持“预防为主、防治结合、精准防控、快速处置”的原则,落实“早发现、早报告、早隔离、早治疗”措施。 02该方案对猴痘的疾病特征(病原学特征、流行病学特征、临床特征)进行了总结。指出,2022年5月以来的猴痘疫情主要通过男男性行为传播,病程约2-4周,2022年以来非地方性流行区病例的病死率约为0.1%。 03介绍了针对各类人群(重点人群、出入境人员和一般人群)的宣传教育及干预措施。其中,出入境人员应该做好21天自我健康监测。 04方案对猴痘疫情的监测、报告以及疫情处置进行了详细规定。其中,猴痘病毒核酸阳性是病例确诊的重要标准,并指出,具备猴痘病毒检测能力及猴痘病毒实验活动资质的医疗机构也可开展检测。 05对猴痘实验室检测进行了相关规定:1. 猴痘病毒核酸检测皮肤或黏膜病变部位标本,可同时采集口咽拭子标本。2. 荧光PCR方法是猴痘确诊的重要方法,其中荧光定量PCR检测的Ct值≤32时,应该进行病毒基因测序。3. 实验室资质:应当符合《病原微生物实验室生物安全管理条例》(国务院令第424号)或《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定,具备生物安全二级(BSL-2)实验室及以上实验室条件,并备案猴痘病毒相关实验活动。 06该方案还对院内感染控制及其他工作要求进行了相关规定。天隆猴痘核酸检测 整体方案 天隆猴痘核酸检测整体方案涵盖自主研发的系列核酸提取、基因检测设备及试剂,检测快速,结果可靠,操作简便。其中,天隆猴痘核酸试剂基于荧光PCR技术平台,采用一管法检测,检测灵敏度达200 copies/mL,可在40min内实现猴痘病毒的快速检测。该试剂已获得欧盟CE及英国MHRA等多项权威注册认证,不仅广泛应用于国内多个省、市级疾控中心,海关及国际旅行保健中心,同时在美国、意大利、西班牙、委内瑞拉、希腊、印尼等近20个国家得到应用,助力猴痘疫情防控。 以时刻在线的紧迫感护航生命健康,以全面精准的方案筑牢防控屏障,天隆科技始终在路上。
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- 2022-01-24 09:49:53牙膏中重金属检测的微波消解方案
- 2020年4月国家市场监督管理总局发布了GB/T 38789-2020 《口腔清洁护理用品 牙膏中10种元素含量的测定 电感耦合等离子体质谱法》,并于2020年11月1日起实施。该标准明确了牙膏中As等10种元素的测定方法及检出限,前处理方法选用的正是高效便捷的微波消解法。事实上,国家一直将牙膏参照有关普通化妆品的规定进行管理,以保障消费者权益,也保证牙膏产品健康有序发展。2015年,原国家食品药品监督管理总局关于化妆品生产许可有关事项的公告中要求牙膏类产品的生产许可工作按照化妆品执行。2018年正式实施的牙膏标准 GB/T 8372-2017 《牙膏》中要求产品的微生物和重金属均需按照《化妆品安全技术规范》规定执行。2021年1月1日实施的《化妆品监督管理条例》第七十七条规定同样指出“牙膏参照有关普通化妆品的规定进行管理”。 为应对牙膏中多元素测定,保障牙膏产品质量,屹尧科技M系列微波消解仪采用了高效、快速、稳定的前处理方法。参照GB/T 38789-2020标准对牙膏进行微波消解前处理,后端使用ICPMS分析测定牙膏中的金属元素含量。实验过程高效快速,结果稳定准确。
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