高效液相色谱为什么会出现双峰？
明明实验时只分析一种物质，为什么峰图会出现双峰呢？通常情况下，正确的峰型应该是尖锐而对称的，出现双峰应该是实验过程中有错误的步骤导致的。液相色谱出现“双峰”的原因有很多。一般有以下几种原因：色谱柱、溶剂、进样量、样品特性和pH值。恒谱生uHPLCs简单介绍其中色谱柱、溶剂因素导致出现双峰及解决办法。
色谱柱
如何判断是色谱柱出现问题导致双峰出现呢？操作人员分析单一纯物时，如果每个色谱峰都出现双峰，可以确定是色谱柱头受损或者是柱头污染了。如果是色谱柱正常，进样量少并且色谱峰形为一大峰带一小峰，不一定拖尾，这种情况可能是柱头受堵。可以将色谱柱反过来接，用流动相或其它溶剂冲洗掉堵在柱头的残留物，然后再反过来，一般都能解决。如果反复还是不能解决问题，可能是柱头塌陷的问题。恒谱生液相色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上，但是柱子使用一段时间后，可能有一些吸附作用强的物质保留于柱顶造成柱头塌陷，这时可补加硅胶填料使柱效恢复。每次使用完色谱柱后，需用洗脱能力强的洗脱液冲洗，以延长液相色谱分析柱的寿命。
色谱柱头塌陷的原因有很多，比较常见的是色谱泵压力过高，填料压碎产生空隙。除此之外还有诸如装填时压力过低，不密实；流动相溶解填料，造成空隙；色谱柱入口筛板堵塞等原因。恒谱生色谱筛板能有效地拦截样品、流动相或管线及密封件的颗粒物对色谱柱的污染，保护色谱柱和仪器。筛板使用一段时间后，拦截的污染物会堵塞筛板，因此需要定期更换。但是相较于损坏色谱柱，更换一个筛板显得性价比更高，成本更低廉。
溶剂问题
反相色谱流动相多为甲醇、乙腈、水，实验中往往会从中加各种添加剂以改善分离性能。有时候为了样品的溶解性或稳定性加入了一点的缓冲液，但是缓冲液的酸碱性可能会导致样品转化，从而产生双峰现象。可以更换缓冲液或者更换流动相试一试。
影响双峰出现的原因还有很多，比如样品超过柱载量，从而导致二次分配；仪器间隔记录时间太短都有可能造成双峰出现。因此具体情况要具体分析，以上仅供各位色谱工作者参考。想知道更多色谱相关咨询，可关注恒谱生uHPLCs！
相关产品
-
恒谱生（U）HPLC色谱柱组件-液相色谱柱柱筛板 PEEK杯
-
恒谱生uHPLCs大孔4.6色谱柱筛板-PEEK杯
-
恒谱生用于液相色谱分析仪HPLC通用性PEEK入口溶剂过滤器
-
恒谱生uHPLCs液相色谱多阶不锈钢进样口过滤器 流动相沉子5um液相色谱溶剂过滤头
-
恒谱生2μ,5μ,10μ,20μm入口溶剂过滤器吸滤头 - 液相色谱仪流动相
-
恒谱生HPLC/UHPLC ods液相色谱柱C18反相分离柱，USHA C18，50*150mm
-
恒谱生ODS-AQ C18反相色谱柱极性化合物分析硅胶半制备色谱柱，USHA C18-AQ，10*2
-
恒谱生C4丁基柱液相制备型色谱柱（适合某些蛋白分离），20*250mm，USHA C4
-
恒谱生NH2氨基键合球形硅胶液相色谱柱（用于单糖、二糖、三糖分离）,4.0*100mm，2μ
-
恒谱生二醇基柱正相液相hplc色谱柱分析柱，USHA Diol，4.6*250mm
全部评论(0条)
推荐阅读
-
- 液相色谱为什么要除蛋白，液相色谱为什么要沉淀蛋白
- 液相色谱作为一种高效的分析工具，在处理含有蛋白质的复杂样品时，除蛋白操作不可忽视。通过合适的除蛋白方法，可以有效减少蛋白质对色谱分析的干扰，优化分离效果。
-
- 高效液相色谱检测蛋白浓度
- 本文将深入探讨高效液相色谱如何用于蛋白浓度的测定，分析其原理、优势以及实际应用，帮助科研人员和实验室人员更好地理解和应用这一技术。
-
- 柔性测斜仪会出现哪些故障?
- 柔性测斜仪的准确性和可靠性对于确保工程安全至关重要。然而，在使用过程中，柔性测斜仪可能会遇到一些常见故障，这些故障如果不及时处理，将直接影响其测量精度和使用寿命。
-
- 液相色谱如何调整蛋白质，高效液相色谱检测蛋白质
- 液相色谱技术通过多维的分离机制，可以有效地调整蛋白质的纯度、活性和稳定性。通过优化流动相的条件、选择合适的色谱柱、控制实验参数，科研人员可以实现对蛋白质的精细调节与高效分离。
-
- 高效液相色谱检测蛋白精度
- 蛋白质作为生物体内重要的功能分子，其精确检测与定量对生命科学研究以及疾病诊断具有重要意义。高效液相色谱（HPLC）凭借其高分辨率、优异的分离性能和灵敏度，成为分析蛋白质精度的重要工具。本文将探讨HPLC技术在蛋白质检测中的精度表现，并分析如何通过优化操作条件，进一步提高检测的准确性和重复性。
-
- 反相高效液相色谱梯度操作
- 通过调整色谱柱中流动相的组成或浓度，反相高效液相色谱（RP-HPLC）可以实现不同化合物的分离与检测。梯度洗脱技术，作为一种提高分离效率的重要手段，能够优化分离过程，尤其是在处理复杂样品时，展现出其独特的优势。本文将深入探讨反相高效液相色谱梯度操作的基本原理、应用以及技术挑战，并为实践中的色谱分析提供指导。
-
- 液相色谱梯度洗脱优点，高效液相色谱梯度洗脱原理
- 液相色谱梯度洗脱技术在提高分离度、缩短分析时间、扩展应用范围等方面具有显著优势。其灵活性和高效性使其成为复杂样品分析中不可或缺的重要工具。通过不断优化梯度洗脱条件，可以进一步提升分析的精度和可靠性。
-
- 过量食用亚硝酸盐会出现哪些症状？
- 亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒，味微咸，易溶于水。
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布，观点仅代表作者本人，不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们立即通知作者，并马上删除。
②凡本网注明"来源：仪器网"的所有作品，版权均属于仪器网，转载时须经本网同意，并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品来源，并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱：hezou_yiqi
南京南大仪器有限公司
沪公网安备 31011502008050号
参与评论
登录后参与评论