SCIEX ZenoTOF 7600能量分辨质谱（ER-MS）实现天然产物异构体鉴定

EAD是SCIEX高端的ZenoTOF质谱上标配的全新碎裂技术，和碰撞诱导碎裂(CID)技术互为补充。EAD具备两条协同作用的途径：

通过产生自由基阳离子，引发并传递超快自由基链式反应，从而生成诊断性碎片离子；

将离子提升至激发态，使其能够发生竞争性裂解。

研究团队先以15种二糖（覆盖连接方式1-2/1-3/1-4/1-6、组成及α/β构型异构体）和103种黄酮（含黄酮醇、异黄酮等6类骨架，及O-糖/C-糖两种糖苷类型）的标准品，基于SCIEX ZenoTOF 7600质谱系统，结合在线能量EAD采集模式开展实验。

对芹菜素O-葡萄糖苷m/z 433（[M+H]?）的分析（图2）表明，在8 eV KE下，芹菜素4'-O-葡萄糖苷可检测到m/z 397（[M+H]-2H?O）和m/z 295（^0,2X?-H?O），而芹菜素7-O-葡萄糖苷并不产生任何高m/z的碎片离子；在KE 15 eV时，芹菜素5-O-葡萄糖苷则出现m/z 325（^1,4X?-H?O）和m/z 359（^3,5X?）特征碎片离子。

研究通过能量分辨质谱（ER-MS）构建碎片离子强度-不同KE曲线图，进一步验证该方法的可行性（图3）。例如，在图（A，B）中特征碎片m/z 157，其能量依耐性曲线中，葡萄糖与半乳糖组成的二糖异构体（如乳糖vs蜜二糖）曲线差异显著，归因于C4-OH取向引发的1^,?A?裂解偏好；在图（C，D）中的特征碎片m/z 245，则可区分α/β糖苷键（如α-麦芽糖vs β-纤维二糖），该结果体现了不同结构异构体在EAD介导的能量依赖性上的解离差异。

SCIEX ZenoTOF 7600系统是由SCIEX公司推出的最新的高端高分辨系列质谱，不但包含传统的CID碎裂模式，还包含EAD碎裂模式。EAD碎裂模式和CID碎裂模式因其碎裂原理不同，其两者碎片表现出强互补性，为结构的准确鉴定提供了进一步完善的解决方案。

EAD碎裂模式的电子动能 (KE，Electron Kenetic Energy，EAD参数) 可调，保证了EAD技术可以在一台仪器上实现ECD (Electron Capture Dissociation)、HotECD (Hot Electron Capture Dissociation) 和EIEIO三种裂解，从而使其能真正做到大分子和小分子应用的全兼容。EAD因其碎裂模式的独特性被广泛应用到蛋白质从头测序、免疫太祖学、蛋白翻译后修饰精准定位、二硫键位点鉴定、脂质分子结构精准注释（sn-位置、双键定位、双键顺反等）和天然产物（代谢物）同分异构体的定性和定量，在分析化学的进步发挥了独特作用。