破解药物代谢产物鉴定难题：SCIEX ZenoTOF质谱超高灵敏度EAD解离技术

独有的电子活化解离（EAD）模式可保留不稳定结构，提供更丰富的二级信息，实现药物代谢位点的确认。

在大鼠的肝细胞中进行咪达唑仑的体外孵育，研究咪达唑仑的代谢过程及代谢产物。并分别在ZenoTOF 8600系统和ZenoTOF 7600系统采集MS¹和EAD MS/MS谱图，使用信号强度进行两组数据对比。以羟基咪达唑仑代谢产物为例，在ZenoTOF 8600系统上观察到EAD MS/MS的信号强度是ZenoTOF 7600系统的5倍（图1）。且由于灵敏度的提升，在MS²谱图中可观察到独有的EAD碎片离子（如：m/z 180.0211、m/z 204.0442、m/z 242.0842和m/z 277.0538），且碎片离子的质量偏差均小于5ppm，更准确可靠的说明其羟基化位点，即4-羟基咪达唑仑；而上述碎片离子在ZenoTOF 7600系统上的信号较低，小于100cps，所以无法进行位点确认。

图1. 咪达唑仑Ⅰ相代谢产物—4-羟基咪达唑仑的EAD MS/MS谱图

同样，我们也在两个质谱平台上评估了对Ⅱ相代谢产物鉴定的能力。以普萘洛尔的葡萄糖醛酸化代谢产物为例，我们可以直观的看到在ZenoTOF 8600系统上EAD MS/MS的信号强度是上一代的9倍（图2），且同时也检测到独有的EAD碎片离子（如：m/z 292.0932、m/z 304.1543、m/z 336.0837和m/z 362.1592），证明其为4-羟基普萘洛尔的葡萄糖醛酸化代谢产物。而上述碎片离子在ZenoTOF 7600系统上的信号较低，甚至低于25cps，不足以用于代谢位点的确认。也正是由于ZenoTOF 8600系统表现出更高的灵敏度，因此可实现更精准的结构表征。

图2. 普萘洛尔Ⅱ相代谢产物—4-羟基普萘洛尔葡萄糖醛酸化代谢产物的EAD MS/MS谱图