特色应用 | 食品中维生素C的测定

实验部分

SHI YAN BU FEN

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪； 

色谱柱：Shim-pack GIST C18-AQ（5 μm，4.6×150 mm；P/N：227-30742-07）；

纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）； 

SHIMSEN Disc HPPTFE针式过滤器（P/N：380-00341）； 

LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）； 

Nichipet Air移液枪：Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N：00-NAR-10）； 

Nichipet Air 10-100 μL（P/N：00-NAR-100）； 

Nichipet Air 100-1000 μL（P/N：00-NAR-1000）； 

Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N：00-NAR-10000）。 

 分别精密称取L-抗坏血酸（维生素C）和D-抗坏血酸标准品适量，加TCEP溶液（称取TCEP 125 mg，加水溶解并稀释至500 mL，混匀）溶解并稀释制成每l mL中各含1000 μg的溶液，作为标准品储备溶液，再分别精密量取各标准品储备溶液适量，用流动相稀释制成每l mL中各含10 μg的溶液，作为高浓度混合标准工作溶液；取高浓度混合标准工作溶液适量，用流动相稀释制成每l mL中各约含0.05 μg的溶液，作为低浓度混合标准工作溶液。 

色谱柱：Shim-pack GIST C18-AQ（5 μm，4.6×150 mm；P/N：227-30742-07） 

柱温：30℃

检测波长：265 nm 

流速：1.0 mL/min 

进样量：10 μL 

流动相：量取水900 mL于1 L烧杯中，吸取40 %TBAH 溶液3.25 mL、称取乙酸铵3.85 

g 置于水中，用冰乙酸（约3.14 mL）调pH 值至4.5~5.0，然后加入TCEP 50 mg，再加入乙腈10 mL，最后加水稀释至1 L，混匀，超声5 min，除去气泡。 

实验结果

SHI YAN JIE GUO

按照上述色谱条件（1.3）进行采集，混合标准工作溶液色谱图如下： 

高浓度混合标准工作溶液（10 μg/mL）

低浓度混合标准工作溶液（0.05 μg/mL） 

重复性

低浓度混合标准工作溶液（0.05 μg/mL）重复性

结 论

JIE LUN

本文建立了食品中维生素C的HPLC 含量测定方法。参考《食品中维生素C的测定》征求意见稿中的色谱条件并进行优化，采用色谱柱Shim-pack GIST C18-AQ分析L-抗坏血酸（维生素C）和D-抗坏血酸，结果显示，2个目标物峰峰型对称，且重现性和分离度良好，满足检测要求。