在肿瘤免疫、神经科学等前沿领域,理解细胞在原位空间环境中的相互作用是突破疾病机制的关键。传统技术受限于信号强度、多重荧光的光谱串扰和检测通量,难以实现多靶标原位同时分析。Thermo Fisher Scientific推出的EVOS S1000空间生物学成像系统和Invitrogen Aluora空间扩增试剂,以创新技术攻克多重荧光检测瓶颈,为空间生物学研究提供全新工具。
技术优势
三重突破,定义行业标杆
超高灵敏度,攻克低丰度靶标
通过共价信号扩增技术,显著提升弱表达蛋白检出能力。对比传统染料(如Alexa Fluor?),信号强度提升10倍以上,曝光时间缩短至1/20(如PCNA检测中,Aluora 594仅需50ms vs AF594的1000ms),大幅降低背景噪声。支持超低抗体浓度(稀释比达1:100,000),节约珍贵样本与试剂成本。
人结肠组织中Alexa Fluor 594(左)与Aluora 594染料(右)的显影效果
两份样本均按1:1000比例染色PCNA且曝光时间相同。点状染色显示PCNA蛋白定位。缩短曝光时间可减少背景噪音对信号检测的干扰。
8色光谱分拆,实现9重标记
Invitrogen Aluora空间扩增试剂中8种专属荧光染料(430/488/514/555/594/647/700/750nm)经光谱优化,在EVOS S1000空间成像系统上实现零串扰分拆。无需循环检测(cyclic detection),单次成像即可解析9重标记(8蛋白+DAPI),完整保留组织空间结构。其光谱匹配Akoya Opal染料,可作为无缝替代方案。
灵活兼容,解放实验设计
支持任意一抗(兔源、鼠源、生物素化),无需预偶联。兼容FFPE组织、自动化工作站,可与其他IHC策略联用。工作流程标准化:从单重优化到9重检测,试剂盒(Rainbow Kit)覆盖100张玻片需求。
应用场景
从肿瘤微环境到神经图谱
9重标记解析乳腺导管癌(IDC)微环境:同步可视化癌细胞、T细胞(CD4/CD8)、B细胞(CD20)、巨噬细胞(CD68)、增殖标志物(PCNA)、基质蛋白(Vimentin)的空间互作,揭示免疫逃逸机制。
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小鼠脑组织9重成像:同步标记神经元(MAP2/NeuN)、胶质细胞(GFAP/AQP4)、干细胞(SOX2)及功能蛋白(GAD67),构建神经环路空间图谱。
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人扁桃体、结肠、淋巴瘤等多组织验证,信号稳定性>95%。
对比优势
三重突破,定义行业标杆
指标 | Aluora | 传统荧光试剂 |
多重能力 | 9重单次成像 | 通常≤4重 |
低丰度靶标灵敏度 | 信号扩增10倍+ | 依赖高浓度一抗 |
抗体消耗 | 稀释比1:1,000–1:100,000 | 1:10–1:200 |
实验流程 | 兼容自动化,FFPE专属优化 | 部分需反复脱盖/染色 |
在FFPE肠组织PCNA检测中,Aluora 488仅需6ms曝光(1:100,000抗体),而竞品在1:10,000浓度下仍需175ms,且背景显著升高。
一体化解决方案
仪器 + 试剂协同创新
Aluora?与EVOS? S1000空间成像系统深度整合:
16-bit sCMOS相机 + 蔡司APO物镜,实现亚细胞分辨率。
定制红外激光自动对焦,支持4玻片连续扫描。
预装Aluora光谱配置文件,一键式分拆分析。
Invitrogen EVOS S1000空间生物学成像分析系统是一款宽场光谱成像系统,整合了多重光谱荧光、透射明场、相差及彩色明场成像等诸多功能。
快速:20分钟即可完成1cm2组织的9标成像(10x;扫描、光谱解析及拼接);
灵活:兼容多种荧光染料、抗体、RNA探针及显色试剂;
全面:支持光谱荧光、透射明场、相差及彩色明场成像;
高灵敏度:配备420万像素16-bit科研级sCMOS相机,可清晰检测组织内复杂的多重染色信号;
可变倍率:支持2.5x–40x物镜(5孔物镜转盘);
高效:自动化激光聚焦与软件辅助聚焦流程加速图像采集;
易用:直观的软件界面,适用于不同经验水平的用户(图像采集、导航及数据检索);
兼容性:支持TIFF、OME-TIFF及分层图像格式,适配各类数据分析软件;
高分辨率:光谱解析技术减少荧光串色,生成高分辨率图像。
Aluora试剂专为FFPE组织设计,支持从单重成像到9重成像(含DAPI)的多种成像方式。具有灵活性,可与小鼠IgG、兔IgG或生物素标记的IHC抗体panel配合使用,适用于常规成像和空间多重成像。部分货号请见下表,还有多种试剂盒可供选择:
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