低丰度/稀有菌株筛选,还在“千淘万漉”吗?
微生物群落中数量不占优势的低丰度/稀有菌株,往往在群落中扮演着重要角色,且对生态系统的稳定性和功能发挥至关重要。对此类菌株的筛选目前多采用人工单克隆挑取方法,该方法捕获率低、周期长、重复挑取率高、且下游检测成本高。
在低丰度/稀有菌株筛选中,
运气好时是
“千淘万漉虽辛苦,吹尽狂沙始到金”
更多时候是
”千淘万漉好辛苦,吹尽狂沙没有金“!
RAcolony高通量菌落智能筛选系统在培养皿原位,基于菌落微观图像及拉曼光谱表型进行“去重复”分析,高效获取低丰度菌/稀有菌株,提高“淘金”效率。
用20种肠道菌株构建模拟样本:每个样本包含3种低丰度物种(1%,0.8%,0.5%),每个平皿保证300个左右菌落数,共8个平皿(重复),其中每皿所含的3种低丰度物种分布在不同菌株上。
利用图像“去重”筛选,在含有3株低丰度物种的微生物群体中,挑取总菌落数的1/10,即40个菌落(Fig. 2A和B),去重筛选后的物种覆盖度接近85%,此时丰度低至0.5%的稀有物种的捕获率在80%以上。
菌落筛选别再“千淘万漉”
RAcolony可以让低丰度菌株筛选更高效!
END
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