【文献速递】利用靶向癌细胞的抗体对γδ T细胞进行化学工程化以增强肿瘤免疫治疗

γδ T细胞作为独特的 T 淋巴细胞亚群，凭借不依赖主要组织相容性复合体（MHC）识别肿瘤抗原、可进行异体输注且无移植物抗宿主病风险等优势，在过继性细胞治疗领域具有广阔应用前景，已被证实能在体外和体内发挥抗肿瘤活性，成为肿瘤免疫治疗的研究热点。然而，传统体外扩增的未工程化 γδ T 细胞存在明显瓶颈：一方面，肿瘤靶向效率低，难以精准定位并作用于肿瘤细胞；另一方面，输注细胞的活化能力有限，导致临床治疗获益不佳。为突破这些限制，虽有研究尝试将嵌合抗原受体（CAR）工程化改造应用于 γδ T 细胞，但基因工程技术不仅成本高昂，还存在大规模生产耗时的问题。与此同时，细胞表面化学工程作为调控免疫细胞功能的灵活策略，已在自然杀伤细胞、αβ CAR-T 细胞等研究中展现潜力，因此，探索通过化学工程手段为 γδ T 细胞赋予肿瘤靶向功能，以提升其抗肿瘤活性并简化生产流程，成为解决当前 γδ T 细胞治疗困境的关键方向。

基于此，本研究成功开发了一种基于代谢糖标记与点击化学的 γδ T 细胞表面化学工程策略，确定细胞表面唾液酸（作为细胞表面聚糖的末端糖）为抗体锚定的最佳位点，并利用快速代谢糖标记（fMGL）技术，将抗 PD-L1 纳米抗体（αPD-L1）高效、稳定地偶联到 γδ T 细胞表面，构建出 αPD-L1-γδ T 细胞偶联物。功能验证显示，该偶联物在体外对 PD-L1 阳性癌细胞系（如卵巢癌细胞 OVCAR-8、A2780-DDP 等）及患者来源的原发性癌细胞均表现出显著增强的杀伤活性，机制上通过结合 PD-L1 靶向肿瘤细胞并诱导其焦亡实现；在卵巢癌腹腔转移小鼠模型中，αPD-L1-γδ T 细胞能有效抑制肿瘤生长、延长小鼠生存期，且可通过 CCR5/CCL5 信号轴招募并激活 CD8? T 细胞，重塑肿瘤免疫微环境，进一步强化抗肿瘤免疫应答。此外，该化学工程策略具有良好的通用性，可用于偶联不同功能分子（如 GFP、DNA 适配体等），且避免了基因工程的高成本与复杂性，为 γδ T 细胞过继性细胞治疗的优化提供了新平台，对推动癌症 “活体药物” 的发展具有重要意义。

文章中，为评估αPD-L1-γδ T 在卵巢癌腹腔转移小鼠模型中对肿瘤生长的影响，采用了生物科技有限公司的AniView多模式动物活体成像系统进行观察。实验结果显示，载体（PBS）处理组小鼠体内肿瘤生物发光信号持续增强，表明肿瘤持续生长，且小鼠体重随肿瘤进展呈明显下降趋势，反映肿瘤生长对小鼠机体的消耗，导致整体健康状态恶化。未工程化γδ T细胞处理组虽能在一定程度上抑制肿瘤生长，使生物发光信号增强趋势减缓，但抑制效果有限；而αPD-L1-γδ T 细胞处理组小鼠的肿瘤生物发光信号显著弱于前两组，且随时间推移抑制效果更明显，此外后两组均维持了更好的体重，这证明αPD-L1-γδ T 细胞在体内对 PD-L1 阳性卵巢癌腹腔转移肿瘤的生长具有更高效的抑制作用，进一步验证了该细胞偶联物的体内抗肿瘤活性优势。